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野油菜黄单胞菌野油菜致病变种致病相关基因的克隆和鉴定

第1章 前言第1-31页
   ·单细胞微生物基因组学研究第13-19页
     ·全基因组的测序与注释第14-15页
       ·全基因组测序第14页
       ·全基因组注释第14-15页
     ·基因组间的比较研究第15-16页
       ·系统进化第15页
       ·基因水平转移第15-16页
       ·病原物致病性第16页
     ·基因的破坏及功能研究第16页
     ·功能基因组研究第16-19页
       ·特定培养条件下,病原菌的体外表达图谱第17页
       ·生物合成途径的抑制及新药物靶点的鉴定第17页
       ·基于阵列芯片的比较基因组第17-19页
   ·病原细菌的致病机理第19-26页
     ·人类病原菌致病生化因子第19-21页
       ·荚膜第19页
       ·细胞壁组分第19页
       ·毒素第19-20页
       ·粘附素第20-21页
     ·植物病原菌致病生化因子第21-23页
       ·多糖第21页
       ·毒素第21-22页
       ·生长激素第22页
       ·胞外酶第22页
       ·依赖于hrp基因的效应蛋白分子第22-23页
     ·病原菌致病生化因子的调控第23-24页
       ·双组分调控系统第23-24页
       ·σ因子第24页
       ·数量感觉系统第24页
     ·毒性因子分泌的保守性机制第24-25页
     ·基因的水平转移与病原菌的进化第25-26页
   ·植物病原菌的Ⅲ型分泌系统第26-30页
     ·编码植物病原菌Ⅲ型分泌系统的基因第26-27页
     ·植物病原菌Ⅲ型分泌系统的研究进展第27-30页
       ·分泌系统的超大分子结构第27-28页
       ·分泌蛋白的分泌信号第28页
       ·Ⅲ型分泌系统的激发第28-29页
       ·分泌系统内务组分的相互关系第29-30页
   ·甘蓝黑腐病黄单胞菌第30-31页
第2章 材料与方法第31-47页
   ·供试菌株和质粒第31-32页
   ·培养基.培养条件及菌种保存第32-33页
   ·常用抗菌素第33页
   ·常用溶液.缓冲液第33-34页
   ·DNA的沉淀第34页
   ·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除第34页
   ·DNA的凝胶电泳第34页
   ·细菌总DNA的提取第34-35页
   ·质粒的提取第35页
   ·DNA酶切第35页
   ·DNA的连接第35-36页
   ·DNA的电脉冲转化第36页
   ·电洗脱法回收DNA片段第36页
   ·载体的去磷酸化第36页
   ·DNA的Southern杂交第36-37页
   ·PCR扩增DNA片段第37-39页
   ·TAIL—PCR第39-40页
   ·DNA的测序第40页
   ·三亲本接合第40页
   ·二亲本接合第40页
   ·目标基因缺失突变体的构建第40-41页
   ·目标基因缺失突变体的验证第41页
   ·突变体的功能互补第41页
   ·脂多糖分析第41-42页
   ·胞外多糖检测第42页
   ·胞外酶检测第42页
   ·致病性试验第42-43页
   ·Xcc病情指数计算第43页
   ·过敏反应试验第43页
   ·细菌在寄主体内的生长繁殖的测定第43页
   ·细菌在培养基的生长繁殖的测定第43-44页
   ·DNA和蛋白质序列分析第44-47页
第3章 Xcc 8004菌株Tn5gusA5致病缺陷突变体的筛选及突变体插入失活基因的克隆第47-58页
   ·引言第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·Xcc 8004菌株Tn5gusA5致病缺陷突变体的筛选第48页
     ·致病缺陷突变体的致病力评估第48-49页
     ·突变体营养类型检测第49页
     ·突变体的Southern杂交分析第49-50页
     ·突变体插入失活基因的克隆第50-51页
     ·插入失活基因的缺失突变第51-52页
   ·讨论第52-58页
第4章 wbxL基因的研究第58-74页
   ·引言第58页
   ·结果与分析第58-72页
     ·wbxL基因的基本特征第58-62页
     ·wbxL基因Tn5gusA5突变体的互补第62-63页
     ·wbxL基因缺失突变体的构建第63-65页
     ·wbxL基因缺失突变体的验证第65-66页
     ·wbxL基因缺失突变体致病性变化及功能互补第66-67页
     ·wbxL基因缺失突变体致病性研究第67-69页
       ·喷雾接种第67页
       ·剪叶接种第67页
       ·注射接种第67页
       ·HR反应第67-68页
       ·突变体在寄主体内的生长繁殖第68-69页
     ·wbxL基因缺失突变体的生长繁殖第69-70页
     ·wbxL基因缺失突变体致病生化因子的变化第70-72页
       ·LPS分析第70页
       ·EPS产量第70-71页
       ·胞外酶活性第71-72页
   ·讨论第72-74页
第5章 waxE基因的研究第74-86页
   ·引言第74页
   ·结果与分析第74-85页
     ·waxE基因的基本特征第74页
     ·waxE基因缺失突变体的构建第74-78页
     ·waxE基因缺失突变体的验证第78-79页
     ·waxE基因缺失突变体致病性变化及功能互补第79页
     ·waxE基因突变体的致病性研究第79-82页
       ·喷雾接种第79-80页
       ·剪叶接种第80-81页
       ·注射接种第81页
       ·过敏反应第81页
       ·突变体在寄主体内的生长繁殖第81-82页
     ·waxE基因缺失突变体的生长繁殖第82-83页
     ·waxE基因缺失突变体致病生化因子的变化第83-85页
       ·LPS分析第83页
       ·EPS产量第83-84页
       ·胞外酶活性第84-85页
   ·讨论第85-86页
第6章 wxcA基因的研究第86-99页
   ·引言第86页
   ·结果与分析第86-97页
     ·wxcA基因的基本特征第86-89页
     ·wxcA基因缺失突变体的构建第89-90页
     ·wxcA基因缺失突变体的验证第90-91页
     ·wxcA基因缺失突变体致病性变化及功能互补第91页
     ·wxcA基因突变体的致病性研究第91-94页
       ·喷雾接种第92页
       ·剪叶接种第92-93页
       ·注射接种第93页
       ·过敏反应第93页
       ·突变体在寄主的生长繁殖第93-94页
     ·wxcA基因突变体的生长繁殖第94-95页
     ·wxcA基因缺失突变体致病生化因子的变化第95-97页
       ·LPS变化第95页
       ·EPS产量第95-96页
       ·胞外酶活性第96-97页
   ·讨论第97-99页
第7章 ppsA基因的研究第99-112页
   ·引言第99页
   ·结果与分析第99-111页
     ·ppsA基因的基本特征第99-103页
     ·ppsA基因缺失突变体的构建第103-104页
     ·ppsA基因缺失突变体的验证第104-106页
     ·ppsA基因缺失突变体的致病性变化及功能互补第106-108页
       ·剪叶接种第106页
       ·注射接种第106页
       ·HR反应第106-107页
       ·突变体在寄主内的生长繁殖第107页
       ·突变体的功能互补第107-108页
     ·ppsA基因缺失突变体的生长繁殖特征第108-109页
       ·以丙酮酸或乳酸作唯一碳源的基本培养基的生长繁殖第108页
       ·以葡萄糖作唯一碳源的基本培养基的生长繁殖第108-109页
       ·在NYGB培养基的生长繁殖第109页
     ·ppsA基因缺失突变体的致病生化因子第109-111页
       ·EPS产量第110页
       ·胞外酶活性第110-111页
   ·讨论第111-112页
第8章 总结与讨论第112-115页
参考文献第115-127页
致谢第127页

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