英文缩写词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
前言 | 第16-18页 |
文献回顾 | 第18-54页 |
一、抗体基因的结构及特征 | 第19-23页 |
二、基因工程抗体的种类 | 第23-36页 |
(一) 嵌合抗体(Chimeric Antibody) | 第23-25页 |
(二) 重构抗体(Reshaping Antibody) | 第25-28页 |
(三) Fab抗体 | 第28-29页 |
(四) Fv抗体 | 第29页 |
(五) 单链抗体(Single Chain Antibody) | 第29-30页 |
(六) 单域抗体(Single Domain Antibody) | 第30页 |
(七) 最小识别单位(Minimal Recognitin Uuits) | 第30页 |
(八) 双功能抗体(Bispecific Antibody) | 第30-32页 |
(九) 重组噬菌体抗体(Phage Surface Display) | 第32-36页 |
三、基因工程抗体的构建及表达 | 第36-48页 |
(一) 抗体可交区基因的获得 | 第36-40页 |
(二) 基因工程抗体的表达 | 第40-48页 |
四、基因工程抗体的应用及前景 | 第48-54页 |
(一) 基因工程抗体用于治疗 | 第48-50页 |
(二) 基因工程抗体的发展前景 | 第50-54页 |
第一部分:抗人肝癌单抗HAb27轻、重链可变区基因的体外扩增 | 第54-65页 |
材料与方法 | 第55-59页 |
一、实验材料 | 第55-56页 |
二、实验方法 | 第56-59页 |
结果 | 第59-62页 |
一、HAb27杂交瘤分泌McAb活性检测 | 第59页 |
二、细胞总RNA的提取 | 第59页 |
三、PCR扩增HAb27轻、重链可变区基因片段 | 第59-62页 |
讨论 | 第62-65页 |
第二部分:抗人肝癌单抗HAb27轻、重链可变区基因的定向克隆及序列测定 | 第65-96页 |
材料与方法 | 第66-78页 |
一、实验材料 | 第66-71页 |
二、实验方法 | 第71-78页 |
(一) PCR产物VH、VL的定向克隆 | 第71-73页 |
(二) HAb27 VH、VL基因的核酸序列测定 | 第73-78页 |
结果 | 第78-94页 |
一、PCR扩增VH、VL及pCU19的限制性酶切 | 第78页 |
二、重组质粒的鉴定 | 第78-79页 |
三、VH、VL亚克隆到单链M13p18、mp19中 | 第79-80页 |
四、VH、VL基因序列分析 | 第80-94页 |
讨论 | 第94-96页 |
第三部分:抗人肝癌单抗HAb27可变区基因在重组噬菌体呈现系统中的表达及初步鉴定 | 第96-120页 |
材料与方法 | 第97-107页 |
一、实验材料 | 第97-100页 |
二、实验方法 | 第100-107页 |
结果 | 第107-116页 |
一、大量提取质粒的鉴定 | 第107-108页 |
二、VH、VL基因重组入pCSM21质粒的鉴定 | 第108-112页 |
三、表达重组抗体结合抗原活性的初步鉴定 | 第112-116页 |
讨论 | 第116-120页 |
小结 | 第120-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-137页 |