英文缩略词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第14-16页 |
实验技术路线 | 第16-17页 |
第一部分 前列腺生理及前列腺增生、前列腺癌分子机制(综述) | 第17-66页 |
1 前列腺解剖结构及生理 | 第17-18页 |
2 前列腺的发生生理 | 第18-19页 |
3 前列腺细胞类型 | 第19-23页 |
·上皮细胞 | 第20-21页 |
·神经内分泌细胞 | 第21页 |
·暂时增殖细胞 | 第21页 |
·基底/干细胞 | 第21-22页 |
·间质细胞和组织基质 | 第22-23页 |
4 前列腺生长与内分泌调节 | 第23-26页 |
·雄激素 | 第23-24页 |
·雌激素 | 第24-25页 |
·雄激素结合蛋白 | 第25页 |
·催乳素 | 第25-26页 |
5 类固醇激素和生长因子对前列腺生长的调控 | 第26-66页 |
第二部分 有/无共培养条件下良性增生前列腺上皮细胞、间质细胞差异表达基因的筛选 | 第66-130页 |
1 材料与方法 | 第66-95页 |
·主要材料 | 第66-73页 |
·主要仪器 | 第66-67页 |
·标本 | 第67页 |
·主要试剂 | 第67-68页 |
·溶液的配制 | 第68-73页 |
·实验方法与步骤 | 第73-95页 |
·细胞培养 | 第73-74页 |
·细胞鉴定 | 第74-76页 |
·前列腺上皮-间质细胞共培养 | 第76-78页 |
·总RNA提取 | 第78页 |
·RNA准备 | 第78-79页 |
·mRNA差异显示 | 第79-83页 |
·PCR产物克隆 | 第83-86页 |
·测序 | 第86页 |
·核酸序列分析 | 第86页 |
·反向northern杂交 | 第86-88页 |
·半定量RT-PCR验证差异表达基因 | 第88-91页 |
·蛋白印迹分析共培养模型中KLK7蛋白表达水平 | 第91-95页 |
2 结果 | 第95-111页 |
·上皮和成纤维细胞培养 | 第95页 |
·形态学观察结果 | 第95页 |
·总RNA电泳结果 | 第95-96页 |
·PSA mRNA表达 | 第96-97页 |
·PSA及Desmin蛋白染色鉴定前列腺上皮、成纤维细胞 | 第97-98页 |
·差异显示RT-PCR | 第98-103页 |
·反向northern blot | 第103-104页 |
·克隆、测序、比对分析 | 第104-108页 |
·半定量RT-PCR验证 | 第108-110页 |
·蛋白印迹分析KLK7蛋白表达 | 第110-111页 |
3 讨论 | 第111-121页 |
·良性前列腺增生发病机制 | 第111-113页 |
·共培养 | 第113-114页 |
·差异显示PCR | 第114-116页 |
·差异表达基因 | 第116-121页 |
小结 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-130页 |
第三部分 组织激肽释放酶基因7(KLK7)及其抑制剂分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)在良性前列腺组织、前列腺癌组织中表达 | 第130-179页 |
1 材料与方法 | 第130-148页 |
·主要材料 | 第130-138页 |
·主要仪器 | 第130-131页 |
·标本 | 第131-132页 |
·主要试剂 | 第132页 |
·溶液的配制 | 第132-138页 |
·实验方法与步骤 | 第138-148页 |
·细胞培养 | 第139页 |
·总RNA提取 | 第139-140页 |
·逆转录 | 第140页 |
·PCR | 第140-141页 |
·蛋白印迹分析 | 第141-146页 |
·免疫组织化学研究KLK7与SLPI在不同类型前列腺组织中表达情况 | 第146-148页 |
2 结果 | 第148-165页 |
·细胞培养 | 第148-149页 |
·RT-PCR检测KLK7和SLPI核酸水平表达 | 第149-155页 |
·KLK7和SLPI mRNA表达 | 第149-152页 |
·KLK7和SLPI RT-PCR产物测序 | 第152-155页 |
·蛋白印迹实验分析hK7和SLPI蛋白水平表达 | 第155-156页 |
·免疫组织化学研究 | 第156-165页 |
3 讨论 | 第165-171页 |
·hK7功能及其与肿瘤的关系 | 第165-167页 |
·SLPI功能及其与肿瘤的关系 | 第167-169页 |
·作为hK7的抑制剂,SLPI与hK7的关系 | 第169-171页 |
·hK7和SLPI有可能成为肿瘤标记物 | 第171页 |
小结 | 第171-172页 |
参考文献 | 第172-179页 |
综述 | 第179-187页 |
致谢 | 第187-188页 |
学习期间发表论文 | 第188页 |