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有/无共培养条件下前列腺上皮、间质细胞差异表达基因筛选及表达研究

英文缩略词第1-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-14页
前言第14-16页
实验技术路线第16-17页
第一部分 前列腺生理及前列腺增生、前列腺癌分子机制(综述)第17-66页
 1 前列腺解剖结构及生理第17-18页
 2 前列腺的发生生理第18-19页
 3 前列腺细胞类型第19-23页
   ·上皮细胞第20-21页
   ·神经内分泌细胞第21页
   ·暂时增殖细胞第21页
   ·基底/干细胞第21-22页
   ·间质细胞和组织基质第22-23页
 4 前列腺生长与内分泌调节第23-26页
   ·雄激素第23-24页
   ·雌激素第24-25页
   ·雄激素结合蛋白第25页
   ·催乳素第25-26页
 5 类固醇激素和生长因子对前列腺生长的调控第26-66页
第二部分 有/无共培养条件下良性增生前列腺上皮细胞、间质细胞差异表达基因的筛选第66-130页
 1 材料与方法第66-95页
   ·主要材料第66-73页
     ·主要仪器第66-67页
     ·标本第67页
     ·主要试剂第67-68页
     ·溶液的配制第68-73页
   ·实验方法与步骤第73-95页
     ·细胞培养第73-74页
     ·细胞鉴定第74-76页
     ·前列腺上皮-间质细胞共培养第76-78页
     ·总RNA提取第78页
     ·RNA准备第78-79页
     ·mRNA差异显示第79-83页
     ·PCR产物克隆第83-86页
     ·测序第86页
     ·核酸序列分析第86页
     ·反向northern杂交第86-88页
     ·半定量RT-PCR验证差异表达基因第88-91页
     ·蛋白印迹分析共培养模型中KLK7蛋白表达水平第91-95页
 2 结果第95-111页
   ·上皮和成纤维细胞培养第95页
   ·形态学观察结果第95页
   ·总RNA电泳结果第95-96页
   ·PSA mRNA表达第96-97页
   ·PSA及Desmin蛋白染色鉴定前列腺上皮、成纤维细胞第97-98页
   ·差异显示RT-PCR第98-103页
   ·反向northern blot第103-104页
   ·克隆、测序、比对分析第104-108页
   ·半定量RT-PCR验证第108-110页
   ·蛋白印迹分析KLK7蛋白表达第110-111页
 3 讨论第111-121页
   ·良性前列腺增生发病机制第111-113页
   ·共培养第113-114页
   ·差异显示PCR第114-116页
   ·差异表达基因第116-121页
 小结第121-122页
 参考文献第122-130页
第三部分 组织激肽释放酶基因7(KLK7)及其抑制剂分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)在良性前列腺组织、前列腺癌组织中表达第130-179页
 1 材料与方法第130-148页
   ·主要材料第130-138页
     ·主要仪器第130-131页
     ·标本第131-132页
     ·主要试剂第132页
     ·溶液的配制第132-138页
   ·实验方法与步骤第138-148页
     ·细胞培养第139页
     ·总RNA提取第139-140页
     ·逆转录第140页
     ·PCR第140-141页
     ·蛋白印迹分析第141-146页
     ·免疫组织化学研究KLK7与SLPI在不同类型前列腺组织中表达情况第146-148页
 2 结果第148-165页
   ·细胞培养第148-149页
   ·RT-PCR检测KLK7和SLPI核酸水平表达第149-155页
     ·KLK7和SLPI mRNA表达第149-152页
     ·KLK7和SLPI RT-PCR产物测序第152-155页
   ·蛋白印迹实验分析hK7和SLPI蛋白水平表达第155-156页
   ·免疫组织化学研究第156-165页
 3 讨论第165-171页
   ·hK7功能及其与肿瘤的关系第165-167页
   ·SLPI功能及其与肿瘤的关系第167-169页
   ·作为hK7的抑制剂,SLPI与hK7的关系第169-171页
   ·hK7和SLPI有可能成为肿瘤标记物第171页
 小结第171-172页
 参考文献第172-179页
综述第179-187页
致谢第187-188页
学习期间发表论文第188页

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