β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的诱导表达
| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 1.课题研究的背景及意义 | 第8页 |
| 2.课题研究的目的 | 第8页 |
| 3.本论文主要研究内容 | 第8-9页 |
| 4.本论文的主要思路创新 | 第9页 |
| 5.下一步研究重点 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的研究现状 | 第10-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的来源 | 第10页 |
| ·β-葡萄糖苷酶在细胞中的分布 | 第10-11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第11-12页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的催化反应机制 | 第12-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的生物学功能 | 第13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第13-14页 |
| ·水解纤维素 | 第13页 |
| ·生产低聚龙胆糖 | 第13页 |
| ·在脱苦中的应用 | 第13页 |
| ·作为风味酶 | 第13-14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的制备 | 第14-15页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的生物学特点 | 第15-16页 |
| ·高密度培养的概述 | 第16-18页 |
| ·定义 | 第16-17页 |
| ·影响高密度培养的因素 | 第17-18页 |
| ·酵母的开发利用 | 第18-23页 |
| ·酵母核酸的研究进展 | 第18页 |
| ·RNA的应用 | 第18-19页 |
| ·谷胱甘肽的功能 | 第19页 |
| ·谷胱甘肽的应用 | 第19-21页 |
| ·酵母细胞壁多糖概述 | 第21-22页 |
| ·酵母细胞壁多糖的应用 | 第22-23页 |
| 第二章 基因工程菌高效表达的条件优化 | 第23-41页 |
| ·试验材料与方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·试验操作及方法 | 第24-27页 |
| ·结果与讨论: | 第27-40页 |
| ·初始pH对β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第27-29页 |
| ·组氨酸加量对β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第29-30页 |
| ·甲醇添加量对β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第30-31页 |
| ·甲醇添加时间对β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第31-32页 |
| ·接种量对诱导表达β-葡萄糖苷酶的影响 | 第32页 |
| ·PTM1加入量对β-葡萄糖苷酶诱导表达的影响 | 第32-33页 |
| ·硫酸铵浓度对β-葡萄糖苷酶表达量的影响 | 第33-34页 |
| ·磷酸氢二钾对β-葡萄糖苷酶诱导表达的影响 | 第34-35页 |
| ·Tween80对β-葡萄糖苷酶诱导表达的影响 | 第35页 |
| ·油酸对β-葡萄糖苷酶诱导表达的影响 | 第35-36页 |
| ·发酵过程中酵母的形态变化 | 第36-37页 |
| ·酶学性质 | 第37-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 重组毕赤酵母在发酵罐中高密度发酵 | 第41-50页 |
| ·材料和方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·高密度发酵的结果 | 第43-46页 |
| ·高密度发酵的过程分析 | 第46-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 发酵液中酵母的开发利用 | 第50-60页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·原料 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要实验设备 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·酵母的预处理: | 第50-51页 |
| ·发酵液及水洗液中甲醇含量的测定 | 第51页 |
| ·核酸的提取 | 第51-52页 |
| ·GSH的提取 | 第52-53页 |
| ·多糖的提取 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-59页 |
| ·发酵液及水洗酵母上清液中甲醇浓度测定结果 | 第53-54页 |
| ·碱法提取核酸的结果 | 第54页 |
| ·核酸纯度紫外鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·核酸电泳结果 | 第55页 |
| ·GSH的含量 | 第55页 |
| ·β-1,3-D-葡聚糖的含量 | 第55页 |
| ·β-1,3-D-葡聚糖纯度鉴定结果 | 第55-57页 |
| ·甘露聚糖的含量及收率 | 第57页 |
| ·甘露聚糖的纯度鉴定结果 | 第57-58页 |
| ·单糖薄层层析的结果 | 第58-59页 |
| ·小结与讨论 | 第59-60页 |
| 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 详细摘要 | 第68-70页 |
