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牛附红细胞体特异性抗原制备及双抗体夹心ELISA诊断方法的建立

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 绪论第15-24页
   ·课题提出的背景及研究意义第15-16页
     ·课题提出的背景第15页
     ·课题的研究意义第15-16页
   ·国内外研究现状第16-20页
     ·国内外研究现状第16-20页
     ·目前存在的问题第20页
   ·主要研究内容、方法及思路第20页
   ·SDS-PAGE的作用原理第20-22页
     ·聚丙烯酰胺凝胶的特性第20-21页
     ·作用原理第21页
     ·影响因素第21-22页
   ·免疫印迹(WESTERN-BLOTTING)技术原理第22-23页
     ·作用原理第22页
     ·免疫印迹法步骤第22页
     ·注意事项第22-23页
   ·切胶纯化目的蛋白原理第23-24页
第二章 材料、方法与程序第24-39页
   ·材料与仪器第24-25页
     ·试验动物第24页
     ·主要生物学试剂第24页
     ·主要化学试剂第24-25页
     ·主要仪器第25页
   ·方法与程序第25-39页
     ·主要溶液的配制第25-31页
     ·牛附红细胞体阳性血样的采集第31页
     ·牛附红细胞体抗原的制备第31页
     ·兔抗牛附红细胞体阳性血清的制备第31-32页
     ·兔阴性血清的制备第32页
     ·牛附红细胞体抗原全蛋白的SDS-PAGE试验第32-33页
     ·主要抗原蛋白的切胶纯化第33-34页
     ·纯化抗原蛋白的SDS-PAGE试验第34页
     ·纯化抗原蛋白的免疫印迹试验及特异性抗原蛋白的筛选第34-35页
     ·牛附红细胞体特异性抗原的制备第35页
     ·双抗体夹心ELISA诊断方法的建立第35-39页
第三章 结果第39-48页
   ·牛附红细胞体阳性血样的采集第39-40页
     ·血液悬滴镜检结果第39-40页
     ·血液涂片镜检结果第40页
   ·牛附红细胞体抗原制备结果第40-41页
     ·解离出的牛附红细胞体镜检结果第40-41页
     ·裂解后的抗原蛋白浓度测定结果第41页
   ·兔抗牛附红细胞体阳性血清效价测定结果第41页
   ·牛附红细胞体抗原全蛋白SDS-PAGE分析结果第41-42页
   ·纯化抗原蛋白SDS-PAGE分析结果第42页
   ·纯化抗原蛋白免疫印迹及特异性抗原蛋白筛选结果第42-43页
   ·牛附红细胞体特异性抗体制备及其血清效价测定结果第43页
   ·纯化抗体含量测定及纯度鉴定结果第43-44页
   ·酶标抗体制备结果第44页
   ·双抗体夹心ELISA试验条件选择结果第44-46页
     ·酶标板均一性测定结果第44-45页
     ·抗体最佳工作浓度和酶标抗体结合物浓度选择结果第45页
     ·抗原最低检出量试验结果第45-46页
   ·双抗体夹心ELISA的特异性试验结果第46-47页
     ·特异性阻断试验结果第46页
     ·交叉性试验结果第46-47页
   ·双抗体夹心ELISA的重复性试验结果第47页
   ·双抗体夹心ELISA的扩大性试验结果第47-48页
第四章 讨论第48-53页
   ·牛附红细胞体显微镜观察第48页
   ·牛附红细胞体抗原制备第48-49页
   ·SDS-PAGE试验第49页
   ·切胶纯化抗原蛋白成分第49-50页
   ·免疫印迹(WESTERN-BLOTTING)试验及免疫原性抗原蛋白筛选第50页
   ·阳性血清和特异性抗体的制备及纯化第50页
   ·酶标抗体的制备第50-51页
   ·双抗体夹心ELISA诊断方法的建立第51-53页
第五章 结论第53-54页
参考文献第54-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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