| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-17页 |
| 前言 | 第17-24页 |
| 材料和方法 | 第24-43页 |
| 1 | 第24-27页 |
| ·细胞来源 | 第24页 |
| ·主要试剂和材料 | 第24-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第26-27页 |
| 2 | 第27-42页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·CCK-8法测定细胞增殖活性 | 第28-29页 |
| ·β-catenin/TCF/LEF(β连环蛋白/T细胞因子/淋巴增强因子)的转录活性的测定 | 第29-31页 |
| ·真核表达载体pSilencer 2.1-U6-COX-2 shRNA的构建 | 第31-37页 |
| ·稳定表达shRNA的Hep3B细胞的筛选 | 第37页 |
| ·COX-2 shRNA对Hep3B细胞抗增殖作用的检测 | 第37-38页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析细胞mRNA表达水平 | 第38-40页 |
| ·细胞内总蛋白提取和蛋白含量测定 | 第40页 |
| ·免疫印迹(Western blotting)检测细胞内蛋白水平 | 第40-42页 |
| 3 数据处理 | 第42-43页 |
| 结果 | 第43-67页 |
| 1 肝细胞癌Hep3B细胞COX-2 mRNA表达水平 | 第43页 |
| 2 肝细胞癌Hep3B细胞EP受体mRNA表达水平 | 第43-44页 |
| 3 PGE_2对Hep3B细胞增殖活性的影响 | 第44-47页 |
| 4 EP2和EP3/EP4受体激动剂对Hep3B细胞增殖活性的影响 | 第47-49页 |
| 5 尼美舒利对Hep3B细胞增殖的抑制作用 | 第49-50页 |
| 6 PGE_2对尼美舒利抗增殖作用的影响 | 第50-51页 |
| 7 COX-2 siRNA对Hep3B细胞增殖活性的影响 | 第51-53页 |
| 8 质粒pSilencer 2.1-U6-COX-2 shRNA的构建和鉴定 | 第53-55页 |
| 9 COX-2shRNA对Hep3B细胞增殖活性的影响 | 第55-57页 |
| 10 PGE_2对Hep3B细胞β-catenin和磷酸化的β-catenin水平的影响 | 第57页 |
| 11 COX-2shRNA对Hep3B细胞β-catenin和磷酸化的β-catenin水平的影响 | 第57-58页 |
| 12 PGE_2和butaprost对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF转录活性的影响 | 第58-59页 |
| 13 COX-2shRNA对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF转录活性的影响 | 第59-60页 |
| 14 尼美舒利对Hep3B细胞β-catenin/TCF/LEF转录活性的影响 | 第60-61页 |
| 15 β-catenin siRNA对PGE_2促Hep3B细胞增殖作用的影响 | 第61-62页 |
| 16 PGE_2对磷酸化GSK-3β和GSK-3β蛋白水平的影响 | 第62-63页 |
| 17 PGE_2对磷酸化Akt和Akt蛋白水平的影响 | 第63-64页 |
| 18 PI3-K抑制剂WM对PGE_2作用的影响 | 第64-67页 |
| 讨论 | 第67-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 攻读学位期间与本课题相关的成果 | 第82-83页 |
| 缩略词表 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 统计学审稿证明 | 第87页 |
