| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-39页 |
| 1 花药培养及其遗传变异的研究 | 第13-17页 |
| ·花药培养能力的遗传分析 | 第13-14页 |
| ·花药培养中的核基因组与细胞质效应 | 第14-16页 |
| ·花药培养中的愈伤组织以及后代的染色体变异 | 第16-17页 |
| 2 体细胞的无性系变异 | 第17-20页 |
| ·体细胞无性系变异的影响因素 | 第17-19页 |
| ·品种基因型 | 第17-18页 |
| ·外植体的选择 | 第18页 |
| ·器官再生途径 | 第18页 |
| ·继代时间 | 第18-19页 |
| ·培养基成份 | 第19页 |
| ·植物体细胞无性系变异的类型 | 第19页 |
| ·植物体细胞无性系变异的机理—染色体变异 | 第19-20页 |
| 3 体细胞无性系变异的检测 | 第20-23页 |
| ·染色体鉴定法 | 第21页 |
| ·间接鉴定法 | 第21-23页 |
| ·流式细胞鉴定法 | 第21-22页 |
| ·气孔大小及保卫细胞叶绿体数目鉴定法 | 第22页 |
| ·植株形态指标鉴定法 | 第22-23页 |
| ·分子鉴定法 | 第23页 |
| ·同工酶和植株形态指标鉴定法 | 第23页 |
| 4 体细胞无性系变异的利用 | 第23-24页 |
| 5 紫花苜蓿多倍体育种的研究 | 第24-30页 |
| ·不同倍性水平紫花苜蓿 | 第25-28页 |
| ·单倍体 | 第25-26页 |
| ·三倍体 | 第26页 |
| ·四倍体 | 第26-27页 |
| ·五倍体 | 第27页 |
| ·六倍体 | 第27页 |
| ·七倍体 | 第27页 |
| ·八倍体 | 第27-28页 |
| ·不同倍性水平紫花苜蓿特征的差异及其鉴定 | 第28-29页 |
| ·形态差异 | 第28页 |
| ·生理生化差异 | 第28-29页 |
| ·紫花苜蓿倍性研究的应用 | 第29-30页 |
| 6 染色体加倍的方法 | 第30-32页 |
| ·秋水仙碱处理 | 第30-31页 |
| ·激素加倍法 | 第31-32页 |
| ·组织培养两步法、辐射处理 | 第32页 |
| 7 花药培养目前存在的问题 | 第32-33页 |
| ·倍性变异 | 第32页 |
| ·没有一种普遍适用的方案 | 第32-33页 |
| ·基因型的限制 | 第33页 |
| ·体细胞的干扰 | 第33页 |
| 8 胚胎发生及其影响因子 | 第33-36页 |
| ·生长素类 | 第34-35页 |
| ·细胞分裂素类 | 第35-36页 |
| ·赤霉素类 | 第36页 |
| ·秋水仙素促进体胚发育 | 第36页 |
| 9 体细胞胚胎发生的应用 | 第36-38页 |
| ·遗传转化的基础 | 第37页 |
| ·种质保存 | 第37页 |
| ·快速繁殖 | 第37页 |
| ·人工种子的制备 | 第37-38页 |
| 10 本研究的目的和内容 | 第38-39页 |
| 第二章 苜蓿花药培养体系的建立 | 第39-62页 |
| 1 材料和方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·试验材料的准备 | 第40页 |
| ·培养基的设计 | 第40页 |
| ·苜蓿基因型对花药愈伤组织诱导率的影响 | 第40页 |
| ·培养基与蔗糖浓度对花药愈伤组织的诱导影响 | 第40-41页 |
| ·变温处理对花药愈伤组织诱导的影响 | 第41-42页 |
| ·分化培养基对花药愈伤组织分化的影响 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·苜蓿基因型对花药愈伤组织诱导的影响 | 第42-43页 |
| ·培养基与蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响 | 第43-47页 |
| ·变温处理对花药愈伤组织诱导的影响 | 第47-51页 |
| ·低温处理对愈伤组织褐化率的影响 | 第51-52页 |
| ·不同分化培养基对愈伤组织分化率的影响 | 第52-53页 |
| 3 苜蓿花药培养成苗影响因素的研究 | 第53-56页 |
| ·材料与方法 | 第53-54页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·琼脂含量对花培植株获得率的影响 | 第53-54页 |
| ·花培植株的继代培养与复壮 | 第54页 |
| ·不同培养基对花培植株生根的影响 | 第54页 |
| ·蔗糖浓度对诱导生根的影响 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| ·琼脂浓度对分化芽成苗率的影响 | 第54-55页 |
| ·不同培养基对花培植株生根的影响 | 第55页 |
| ·不同蔗糖浓度对花培植株生根的影响 | 第55-56页 |
| ·花培植株的移栽 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| ·基因型对花药愈伤组织诱导的影响 | 第56-57页 |
| ·培养基对花药愈伤组织诱导及其分化的影响 | 第57-58页 |
| ·花药的变温处理对花药愈伤组织诱导的影响 | 第58-59页 |
| ·蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导及其花培苗生根的的影响 | 第59-60页 |
| ·琼脂浓度对成苗率的影响 | 第60页 |
| 5 结论 | 第60-62页 |
| 第三章 苜蓿花药愈伤组织DNA 含量变异的研究 | 第62-76页 |
| 1 实验材料与方法 | 第62-65页 |
| ·供试材料为 | 第62-63页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织的诱导方法及材料的处理 | 第63页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织的诱导及固体培养 | 第63页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织的悬浮培养体系 | 第63页 |
| ·流式细胞仪测定愈伤组织的DNA 含量变异 | 第63-65页 |
| ·设备与分析软件 | 第63-64页 |
| ·测定程序 | 第64-65页 |
| ·流式细胞仪的设定及软件分析 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-72页 |
| ·苜蓿细胞悬浮液制作适应的细胞分离缓冲液 | 第65页 |
| ·不加激素的状态下花药愈伤组织DNA 含量的变化 | 第65-69页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织DNA 含量分布曲线图的分析 | 第65-66页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织的细胞周期S 期及多倍性变异的分析 | 第66-68页 |
| ·培养时间与DNA 含量变异频率之间的相关分析 | 第68-69页 |
| ·不同激素对苜蓿愈伤组织DNA 含量变异的影响 | 第69-72页 |
| ·KT、NAA、6-BA 对苜蓿愈伤组织DNA 含量变异的影响 | 第69-71页 |
| ·2,4-D 对苜蓿愈伤组织DNA 含量的变异的影响 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 4 结论 | 第74-76页 |
| 第四章 苜蓿胚状体发生及影响因素的研究 | 第76-87页 |
| 1 材料与方法 | 第76-77页 |
| ·实验材料 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77页 |
| ·测定苜蓿花药愈伤组织的生长速度 | 第77页 |
| ·统计胚状体个数 | 第77页 |
| ·不同碳源对胚状体发生能力的影响 | 第77页 |
| ·低温处理对花药愈伤组织分化的影响 | 第77页 |
| ·分析方法 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-84页 |
| ·苜蓿胚状体的形成过程 | 第77-78页 |
| ·苜蓿基因型对愈伤组织胚状体分化能力的影响 | 第78-79页 |
| ·愈伤组织生长速度与分化胚状体能力之间的关系 | 第79-80页 |
| ·不同碳源对苜蓿愈伤组织分化胚状体能力的影响 | 第80-83页 |
| ·低温处理对花药愈伤组织胚状体分化能力的影响 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-85页 |
| 4 结论 | 第85-87页 |
| 第五章 苜蓿愈伤组织加倍及苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导 | 第87-97页 |
| 1 材料与方法 | 第87-89页 |
| ·实验材料 | 第87-88页 |
| ·实验方法 | 第88-89页 |
| ·采用过滤灭菌方法的秋水仙素处理愈伤组织 | 第88页 |
| ·苜蓿花药愈伤组织的悬浮培养体系 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-92页 |
| ·低浓度秋水仙素对苜蓿愈伤组织的处理效果 | 第89-90页 |
| ·高浓度秋水仙素对苜蓿愈伤组织的处理效果 | 第90-91页 |
| ·秋水仙素处理时间的选择 | 第91-92页 |
| 3 苜蓿单倍体及同源四倍体的获得 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-96页 |
| 5 结论 | 第96-97页 |
| 本研究的后续工作及应用前景 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 基金项目支持 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简介 | 第114-115页 |
| 导师简介 | 第115页 |
