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猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗的构建及间接ELISA方法的建立

摘要第1-9页
Abstract第9-13页
引言第13-15页
第一章 绪论第15-32页
   ·病原学第15-16页
   ·流行病学第16-17页
   ·临床症状及病理变化第17-19页
     ·断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)第17-18页
     ·猪皮炎肾病综合征(PDNS)第18-19页
   ·分子生物学特征第19-22页
     ·PCV2的基因组结构第19-20页
     ·猪圆环病毒的转录与复制第20-22页
   ·致病机理第22-25页
     ·PCV2在体内的分布及影响第22-24页
     ·PCV2感染对细胞因子的影响第24-25页
   ·诊断第25-28页
     ·病毒分离鉴定第25页
     ·免疫组织化学技术第25-26页
     ·PCR技术第26-28页
   ·猪圆环病毒基因工程疫苗的研究第28-29页
     ·核酸疫苗第28-29页
     ·重组疫苗第29页
     ·活载体疫苗第29页
   ·防治第29-32页
     ·加强饲养管理第30页
     ·做好疫苗接种和抗体检测第30页
     ·减少应激第30页
     ·定期保健,减少疾病发生第30-32页
第二章 猪圆环病毒Ⅱ型DNA疫苗构建及对小鼠的免疫效果第32-44页
   ·材料第33-35页
     ·细胞株和质粒第33页
     ·实验动物和细菌第33页
     ·主要试剂和试剂盒第33页
     ·主要溶液的配制第33-35页
     ·主要仪器设备第35页
   ·方法第35-41页
     ·DNA疫苗构建与鉴定第35-38页
     ·RT-PCR方法鉴定表达产物第38-40页
     ·DNA疫苗免疫小鼠及免疫效果测定第40-41页
   ·结果第41-42页
     ·DNA疫苗构建与鉴定结果第41页
     ·DNA疫苗瞬时转染后表达产物的RT-PCR检测结果第41-42页
     ·DNA核酸疫苗免疫小鼠后血清中PCV2抗体的测定值第42页
     ·核酸疫苗的安全性测定第42页
   ·讨论第42-44页
第三章 猪圆环病毒Ⅱ型间接ELISA方法的建立第44-52页
   ·材料第44-45页
     ·细菌和重组质粒第44页
     ·血清和试剂第44-45页
     ·仪器设备第45页
     ·ELISA所用的溶液第45页
   ·方法第45-47页
     ·包被抗原的制备第45-46页
     ·间接ELISA操作步骤第46页
     ·抗原的最适包被浓度和兔抗猪IgG最适工作浓度的确定第46-47页
     ·待检血清稀释度的选择第47页
     ·判定标准第47页
     ·特异性试验第47页
     ·重复性试验第47页
     ·建立的间接ELISA方法与韩国JBT的PCV2试剂盒的比较第47页
     ·临床样品血清的检测第47页
   ·结果第47-50页
     ·抗原的最适包被浓度和兔抗猪IgG最适工作浓度的选择第47-48页
     ·待检血清稀释度的确定第48页
     ·判定标准的确定第48-49页
     ·间接ELISA方法特异性试验第49页
     ·间接ELISA方法重复性测定第49-50页
     ·间接ELISA方法与韩国JBT的PCV2试剂盒的符合率比较第50页
     ·间接ELISA检测临床样品第50页
   ·讨论第50-52页
第四章 总结第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-62页

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