| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词及英汉对照 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-26页 |
| 一、植物抗病基因工程研究现状 | 第10-15页 |
| 二、研究系统获得性抗性的进展 | 第15-19页 |
| 三、抗病信号传导途径之间的相互作用 | 第19-25页 |
| 四、本项目研究路线 | 第25-26页 |
| 第一章 拟南芥NPR1基因的克隆 | 第26-32页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·酶、试剂盒、常用生化试剂 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·主要仪器设备及型号 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-27页 |
| ·拟南芥NPR1基因引物序列 | 第26页 |
| ·拟南芥RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR扩增NPR1基因 | 第27页 |
| 3 NPR1基因克隆结果与分析 | 第27-32页 |
| 第二章 植物表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第32-40页 |
| 1 实验材料 | 第32页 |
| ·菌株与质粒 | 第32页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·酶、试剂盒、常用生化试剂 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-37页 |
| ·中间载体pUC18-PR1a-NPR1的构建 | 第32-33页 |
| ·植物表达载体pCambia2300-SAR-HRP的构建 | 第33-35页 |
| ·双价植物表达载体pCambia2300-PR1a-NPR1-SAR-HRP的构建 | 第35-36页 |
| ·植物表达载体转化根癌农杆菌GV3101 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-40页 |
| ·中间载体pUC18-PR1a-NPR1、pCambia 2300-SAR-HRP的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体pCambia 2300-PR1a-NPR1-SAR-HRP的酶切鉴定 | 第38-40页 |
| 第三章 烟草的遗传转化及检测 | 第40-43页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| ·HRP基因和NPR1基因引物序列 | 第40页 |
| ·培养基的种类 | 第40页 |
| ·制备农杆菌侵染液 | 第40页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第40页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第41-42页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR检测 | 第42-43页 |
| 第四章 半定量RT-PCR抗病信号途径中PR-1a基因、PDF1.2基因、ETR1基因的表达 | 第43-46页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-44页 |
| ·引物设计与合成 | 第43页 |
| ·烟草总RNA提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA的合成 | 第44页 |
| ·目的基因和Tubulin基因的PCR扩增 | 第44页 |
| ·PCR产物的检测 | 第44页 |
| 3 结果分析 | 第44-46页 |
| ·总RNA完整性及其纯度检测 | 第44页 |
| ·NPR1、HRP、Pr-1a、PDF1.2、ETR1基因表达量半定量分析 | 第44-46页 |
| 第五章 棉花的遗传转化及检测 | 第46-49页 |
| 1 实验材料 | 第46页 |
| ·受体植物材料 | 第46页 |
| ·供试质粒 | 第46页 |
| ·试剂及溶液 | 第46页 |
| ·实验仪器及器具 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-47页 |
| ·花粉管通道法转化棉花 | 第46页 |
| ·转基因后代材料的检测鉴定 | 第46-47页 |
| 3 结果分析 | 第47-49页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第49-51页 |
| 1 结论 | 第49页 |
| 2 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 导师评阅表 | 第59页 |
