摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
绪论 | 第9-11页 |
第一章 大肠癌与核糖体蛋白相关研究背景 | 第11-27页 |
1.1 大肠癌发病的分子基础及分型 | 第11-13页 |
1.2 核糖体蛋白异常与蛋白质合成及生长发育 | 第13-14页 |
1.3 核糖体蛋白与核糖体病 | 第14页 |
1.4 核糖体蛋白的核糖体外功能 | 第14-19页 |
1.4.1 核糖体蛋白的核糖体外功能发生的基础 | 第14-15页 |
1.4.2 核糖体蛋白的核糖体外功能发生的分子机制 | 第15-17页 |
1.4.3 核糖体蛋白(RP)、MDM2及p53 之间的相互作用 | 第17-18页 |
1.4.4 核糖体蛋白与其它因子的作用 | 第18-19页 |
1.5 核糖体蛋白S15a(RPS15a) | 第19-21页 |
1.5.1 核糖体蛋白S15a的生物学特性 | 第19-20页 |
1.5.2 核糖体蛋白S15a基因的调节 | 第20页 |
1.5.3 核糖体蛋白S15a在肿瘤中的作用 | 第20-21页 |
1.6 关于核糖体蛋白S15a在肿瘤中作用的前期实验成果及后续实验计划 | 第21-27页 |
1.6.1 关于核糖体蛋白S15a在肿瘤中作用的前期实验成果 | 第21-26页 |
1.6.2 关于核糖体蛋白S15a在肿瘤中作用的后续实验计划 | 第26-27页 |
第二章 RPS15a在大肠癌中的表达量与患者预后的关系 | 第27-34页 |
2.1 主要试验材料、仪器、试剂和溶液 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-29页 |
2.2.1 标本选择 | 第27页 |
2.2.2 标本处理 | 第27-29页 |
2.2.3 患者随访 | 第29页 |
2.2.4 统计分析 | 第29页 |
2.3 结果 | 第29-33页 |
2.3.1 患者随访结果统计及预后分析 | 第29-31页 |
2.3.2 通过公共数据库分析RPS15A在肿瘤中的突变与表达情况 | 第31-33页 |
2.4 讨论 | 第33-34页 |
第三章 沉默RPS15a表达对裸鼠体内移植瘤形成的影响 | 第34-57页 |
3.1 主要试验材料、仪器、试剂和溶液 | 第34-37页 |
3.1.1 主要仪器 | 第34-35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要溶液 | 第36-37页 |
3.2 方法 | 第37-50页 |
3.2.1 RPS15a干扰慢病毒载体构建 | 第37-40页 |
3.2.2 质粒转化步骤 | 第40-41页 |
3.2.3 琼脂糖凝胶制备及电泳条件 | 第41页 |
3.2.4 细胞复苏 | 第41页 |
3.2.5 细胞传代 | 第41-42页 |
3.2.6 细胞冻存 | 第42页 |
3.2.7 细胞转染 | 第42-43页 |
3.2.8 慢病毒感染目的细胞 | 第43页 |
3.2.9 实时荧光定量PCR | 第43-46页 |
3.2.10 Western Blot | 第46-48页 |
3.2.11 动物实验 | 第48-50页 |
3.3 结果 | 第50-55页 |
3.3.1 实时荧光定量PCR检测结肠癌细胞系中RPS15a的表达量 | 第50页 |
3.3.2 慢病毒感染RKO及 SW620 结肠癌细胞系 | 第50-51页 |
3.3.3 实时荧光定量PCR及 Western Blot检测RPS15a敲除效率 | 第51-52页 |
3.3.4 裸鼠体内成瘤实验 | 第52-55页 |
3.4 讨论 | 第55-57页 |
第四章 沉默RPS15a的表达对下游相关基因表达的影响 | 第57-80页 |
4.1 主要试验材料、仪器、试剂和溶液 | 第57-59页 |
4.1.1 主要试验材料、仪器、试剂 | 第57页 |
4.1.2 基因信息 | 第57-58页 |
4.1.3 引物信息 | 第58页 |
4.1.4 抗体信息 | 第58-59页 |
4.2 方法 | 第59-63页 |
4.2.1 基因芯片实验流程 | 第59页 |
4.2.2 芯片样品总RNA质检 | 第59-60页 |
4.2.3 3 ’IVT反应 | 第60-61页 |
4.2.4 芯片杂交 | 第61页 |
4.2.5 火山图说明 | 第61-62页 |
4.2.6 散点图说明 | 第62页 |
4.2.7 统计方法 | 第62-63页 |
4.3 结果 | 第63-79页 |
4.3.1 质检结果 | 第63-64页 |
4.3.2 芯片数据的质量控制 | 第64-66页 |
4.3.3 芯片数据分析结果 | 第66-75页 |
4.3.4 芯片数据深入分析结果 | 第75-77页 |
4.3.5 芯片数据深入分析结果下游基因验证 | 第77-79页 |
4.4 讨论 | 第79-80页 |
第五章 全文结论 | 第80-81页 |
缩略词表 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第90-92页 |