| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 莱茵衣藻 | 第9-10页 |
| 1.1.1 简介 | 第9页 |
| 1.1.2 自身具备的优势 | 第9-10页 |
| 1.2 纤毛与纤毛病 | 第10-12页 |
| 1.2.1 纤毛的简介 | 第10页 |
| 1.2.2 纤毛的结构 | 第10-11页 |
| 1.2.3 纤毛的功能 | 第11页 |
| 1.2.4 纤毛病 | 第11-12页 |
| 1.3 鞭毛内运输(IFT) | 第12-14页 |
| 1.3.1 IFT的发现 | 第12页 |
| 1.3.2 IFT复合物的组成 | 第12-13页 |
| 1.3.3 IFT机制的作用 | 第13-14页 |
| 1.4 IFT57的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 大肠杆菌原核表达系统 | 第15-17页 |
| 1.5.1 表达载体的选择 | 第15-16页 |
| 1.5.2 启动子和宿主菌的影响 | 第16页 |
| 1.5.3 培养条件的控制 | 第16-17页 |
| 1.6 研究的内容和意义 | 第17-18页 |
| 1.6.1 背景及意义 | 第17页 |
| 1.6.2 研究的主要内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-41页 |
| 2.1 实验仪器与设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 菌株、藻种和质粒 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.3 培养基和标准溶液的配制 | 第21-27页 |
| 2.3.1 标准溶液的配制 | 第21-26页 |
| 2.3.2 培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.4.1 莱茵衣藻ift57基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.4.2 目的基因的获取 | 第27-30页 |
| 2.4.3 原核表达载体的构建及鉴定 | 第30-33页 |
| 2.4.4 6×His-IFT57和MBP-IFT57融合蛋白的诱导表达 | 第33-34页 |
| 2.4.5 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第34-35页 |
| 2.4.6 融合蛋白6×His-IFT57和MBP-IFT57的纯化 | 第35-37页 |
| 2.4.7 免疫学实验 | 第37-39页 |
| 2.4.8 抗血清的纯化 | 第39页 |
| 2.4.9 抗体的特异性检测 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-54页 |
| 3.1 ift57基因的生物信息学分析 | 第41-44页 |
| 3.1.1 ift57基因表达蛋白的亲水性分析 | 第41-42页 |
| 3.1.2 ift57基因表达蛋白的理化性质分析 | 第42-43页 |
| 3.1.3 ift57基因表达蛋白的结构分析 | 第43-44页 |
| 3.2 目的基因的获取 | 第44页 |
| 3.3 原核表达载体的构建及鉴定 | 第44-46页 |
| 3.3.1 空载体回收 | 第44-45页 |
| 3.3.2 表达载体的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 融合蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第46-48页 |
| 3.4.1 6×His-IFT57融合蛋白的诱导表达及鉴定 | 第46-47页 |
| 3.4.2 MBP-IFT57融合蛋白的诱导表达及鉴定 | 第47-48页 |
| 3.5 融合蛋白的纯化 | 第48-50页 |
| 3.5.1 融合蛋白6×His-IFT57的纯化 | 第48-49页 |
| 3.5.2 融合蛋白MBP-IFT27的亲和纯化 | 第49-50页 |
| 3.6 免疫学实验 | 第50-52页 |
| 3.6.1 标准曲线的绘制 | 第50-51页 |
| 3.6.2 实验动物的免疫 | 第51页 |
| 3.6.3 抗血清效价的测定 | 第51-52页 |
| 3.7 抗体的纯化以及特异性检测 | 第52-54页 |
| 3.7.1 抗血清的ProteinA纯化 | 第52-53页 |
| 3.7.2 抗体特异性的检测 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-56页 |
| 4.1 全文总结 | 第54页 |
| 4.1.1 表达载体的构建 | 第54页 |
| 4.1.2 融合蛋白的表达及纯化 | 第54页 |
| 4.1.3 动物免疫及抗血清效价的测定 | 第54页 |
| 4.1.4 多克隆抗体的纯化及其特异性检测 | 第54页 |
| 4.2 论文的创新点 | 第54-55页 |
| 4.3 论文的不足之处 | 第55-56页 |
| 5 展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-64页 |
| 7 攻读学位论文期间发表论文情况 | 第64-65页 |
| 8 致谢 | 第65-66页 |
| 9 附录 | 第66页 |
