摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-20页 |
1.1 人工授精 | 第11页 |
1.2 精液保存现状 | 第11-12页 |
1.2.1 液态保存 | 第11-12页 |
1.2.2 冷冻保存 | 第12页 |
1.2.3 常温保存的问题 | 第12页 |
1.3 常用液态保存液 | 第12-13页 |
1.4 精子获能 | 第13-14页 |
1.4.1 体内精子获能 | 第13页 |
1.4.2 体外保存发生获能 | 第13-14页 |
1.5 钙离子在细胞中主要作用 | 第14-15页 |
1.5.1 钙离子与神经信号转导 | 第14页 |
1.5.2 钙离子与凝血 | 第14页 |
1.5.3 钙离子与生殖细胞 | 第14-15页 |
1.5.3.1 钙离子在精子获能中的作用 | 第14-15页 |
1.5.3.2 钙离子在卵母细胞激活中的作用 | 第15页 |
1.6 螯合剂在精液保存中作用 | 第15-17页 |
1.6.1 金属螯合剂 | 第15-16页 |
1.6.2 EGTA与EDTA | 第16-17页 |
1.7 钙调蛋白在精液保存中的影响 | 第17-18页 |
1.7.1 钙调蛋白与获能 | 第17页 |
1.7.2 钙调蛋白拮抗剂 | 第17-18页 |
1.8 ROS与精子获能 | 第18-19页 |
1.9 研究目的与意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-26页 |
2.1 实验动物 | 第20页 |
2.2 精液采集与稀释 | 第20页 |
2.3 主要试剂和溶液配制 | 第20-21页 |
2.4 主要仪器 | 第21页 |
2.5 精子质量的检测 | 第21-23页 |
2.5.1 精子活力和运动参数检测 | 第21页 |
2.5.2 质膜完整性检测 | 第21-22页 |
2.5.3 精子获能状态检测 | 第22页 |
2.5.4 顶体完整性检测 | 第22-23页 |
2.5.5 精子ROS含量检测 | 第23页 |
2.6 体外受精 | 第23-24页 |
2.7 实验设计 | 第24-25页 |
2.7.1 常温保存中加入EGTA | 第24页 |
2.7.2常温保存中加入拮抗剂W7 | 第24页 |
2.7.3 加入EGTA及W7对精子ROS含量的影响 | 第24-25页 |
2.7.4 受精能力的检测 | 第25页 |
2.8 统计分析 | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-36页 |
3.1 EGTA对猪精液液态保存的影响 | 第26-30页 |
3.1.1 EGTA对保存精子活力和运动参数的影响 | 第26-28页 |
3.1.2 EGTA对保存精子质膜完整性的影响 | 第28页 |
3.1.3 EGTA对保存精子获能的影响 | 第28-29页 |
3.1.4 EGTA对精子顶体完整率的影响 | 第29-30页 |
3.2 W7对精子保存的影响 | 第30-34页 |
3.2.1 W7对保存精子活力和运动参数的影响 | 第30-32页 |
3.2.2 W7对保存精子质膜完整性的影响 | 第32页 |
3.2.3 W7对保存精子获能的影响 | 第32-33页 |
3.2.4 W7对精子顶体完整率的影响 | 第33-34页 |
3.3 EGTA和W7对液态保存的猪精子ROS含量的影响 | 第34-35页 |
3.4 EGTA和W7对保存的猪精子受精及后续发育能力的影响 | 第35-36页 |
3.4.1 添加EGTA对精子受精的影响 | 第35页 |
3.4.2 添加W7对精子受精的影响 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
4.1 常温保存中添加EGTA可以提高精子保存质量 | 第36-37页 |
4.2 常温保存中添加W7可以提高精子保存质量 | 第37-38页 |
4.3 EGTA和W7对精子受精能力的影响 | 第38-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-50页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |