摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
主要英文缩略词对照表 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-46页 |
1.1 细胞器 | 第10-11页 |
1.1.1 通过光学显微镜发现细胞器 | 第10页 |
1.1.2 通过电子显微镜和梯度离心发现细胞器 | 第10-11页 |
1.2 细胞迁移 | 第11-18页 |
1.2.1 细胞迁移的分类 | 第12-13页 |
1.2.2 细胞迁移的过程 | 第13-18页 |
1.3 细胞外囊泡 | 第18-40页 |
1.3.1 细胞外囊泡的分类 | 第18-21页 |
1.3.2 细胞外囊泡的成分 | 第21-25页 |
1.3.3 细胞外囊泡的生物学功能 | 第25-29页 |
1.3.4 细胞外囊泡研究的方法 | 第29-34页 |
1.3.5 细胞外囊泡在疾病中的应用 | 第34-40页 |
1.4 四次跨膜蛋白 | 第40-46页 |
1.4.1 四次跨膜蛋白的结构域以及重要修饰 | 第41-43页 |
1.4.2 四次跨膜蛋白的功能 | 第43-46页 |
第2章 实验材料与方法 | 第46-62页 |
2.1 实验材料 | 第46页 |
2.2 实验所用到的仪器 | 第46-47页 |
2.3 实验所用到的试剂 | 第47-49页 |
2.3.1 LB细菌培养基 | 第47页 |
2.3.2 PBS(细胞用)配方 | 第47-48页 |
2.3.3 Western电泳缓冲液配方 | 第48页 |
2.3.4 PBST的配方 | 第48页 |
2.3.5 Western转膜液配方 | 第48页 |
2.3.6 电镜制样用2.5%戊二醛溶液的配制 | 第48-49页 |
2.4 实验方法 | 第49-62页 |
2.4.1 细胞培养 | 第49-50页 |
2.4.2 细胞的不同转染方法 | 第50-51页 |
2.4.3 稳定细胞系的构建 | 第51-52页 |
2.4.4 迁移体分离 | 第52-53页 |
2.4.5 免疫荧光染色 | 第53-54页 |
2.4.6 荧光定量PCR | 第54-55页 |
2.4.7 光电联用实验(CorrelativeLightandElectronMicroscopy) | 第55-56页 |
2.4.8 细胞在3D基质中的培养 | 第56页 |
2.4.9 骨髓诱导巨噬细胞的方法 | 第56-57页 |
2.4.10 组织冰冻包埋切片 | 第57页 |
2.4.11 利用一种大分子染料X对细胞和组织切片进行染色 | 第57-58页 |
2.4.12 免疫印迹 | 第58-59页 |
2.4.13 质粒构建 | 第59-62页 |
第3章 石榴样结构的发现 | 第62-67页 |
3.1 利用透射电子显微镜观察到石榴样结构 | 第62-65页 |
3.2 利用扫描电子显微镜观察石榴样结构 | 第65页 |
3.3 讨论 | 第65-66页 |
3.4 小结 | 第66-67页 |
第4章 石榴样结构标记蛋白的鉴定 | 第67-77页 |
4.1 分离纯化石榴样结构 | 第67-70页 |
4.1.1 石榴样结构分离纯化方法的建立 | 第67-68页 |
4.1.2 通过透射电镜鉴定分离纯化的石榴样结构 | 第68-70页 |
4.2 通过质谱鉴定石榴样结构的蛋白组成 | 第70-71页 |
4.3 筛选石榴样结构的标记蛋白 | 第71-73页 |
4.4 利用CLEM确定标记蛋白标记的石榴样结构 | 第73-75页 |
4.5 讨论 | 第75-76页 |
4.6 小结 | 第76-77页 |
第5章 石榴样结构的形成机制 | 第77-88页 |
5.1 活细胞中石榴样结构的三维重构 | 第77-78页 |
5.2 石榴样结构的生活周期 | 第78-80页 |
5.3 石榴样结构的形成依赖于细胞迁移 | 第80-83页 |
5.3.1 细胞的汇合度影响石榴样结构形成的数量 | 第80-81页 |
5.3.2 细胞在迁移的过程中形成石榴样结构 | 第81页 |
5.3.3 纤连蛋白Fn促进石榴样结构的形成 | 第81-82页 |
5.3.4 Sharpin敲低促进石榴样结构的形成 | 第82-83页 |
5.3.5 细胞迁移的抑制剂抑制石榴样结构的形成 | 第83页 |
5.4 肌动蛋白有可能参与了迁移体的形成 | 第83-85页 |
5.5 讨论 | 第85-86页 |
5.6 小结 | 第86-88页 |
第6章 迁移体在体内存在 | 第88-93页 |
6.1 迁移体在多种细胞中广泛存在 | 第88-89页 |
6.1.1 迁移体在多种正常细胞中存在 | 第88页 |
6.1.2 迁移体在多种癌症细胞中存在 | 第88-89页 |
6.2 模拟体内环境观察迁移体的存在 | 第89-90页 |
6.2.1 细胞在三维基质中能够形成迁移体 | 第89页 |
6.2.2 细胞在另外一层细胞上能够形成迁移体 | 第89-90页 |
6.3 在组织中观察到迁移体样结构的存在 | 第90-91页 |
6.4 讨论 | 第91-92页 |
6.5 小结 | 第92-93页 |
第7章 迁移体的功能探究 | 第93-101页 |
7.1 细胞质成分通过迁移体释放到细胞外环境 | 第93页 |
7.2 细胞产生的迁移体会被周围的细胞摄取 | 第93-95页 |
7.3 迁移体中存在钙浓度的变化 | 第95-96页 |
7.4 巨噬细胞被LPS活化后迁移体中含有TNFα | 第96-98页 |
7.5 讨论 | 第98-99页 |
7.6 小结 | 第99-101页 |
第8章 建立一种大分子染料X标记迁移体的方法 | 第101-106页 |
8.1 X染料标记细胞中的迁移体 | 第101-103页 |
8.1.1 X染料标记的结构与TSPAN4标记的迁移体结构相同 | 第101页 |
8.1.2 X染料标记活细胞时存在内吞现象 | 第101-102页 |
8.1.3 X染料标记固定细胞的迁移体 | 第102-103页 |
8.2 X染料标记组织中的迁移体样结构 | 第103-104页 |
8.2.1 X染料标记小鼠不同组织中的迁移体样结构 | 第103页 |
8.2.2 X染料标记不同年龄小鼠的小肠组织中迁移体样结构 | 第103页 |
8.2.3 X染料标记不同癌症病人癌症组织中迁移体样结构 | 第103-104页 |
8.3 讨论 | 第104-105页 |
8.4 小结 | 第105-106页 |
第9章 总结与展望 | 第106-112页 |
9.1 论文总结 | 第106-108页 |
9.2 论文展望 | 第108-112页 |
9.2.1 迁移体不是起源于多泡体 | 第108-110页 |
9.2.2 对迁移体与细胞外囊泡之间的探讨 | 第110页 |
9.2.3 对迁移体形成机制的探讨 | 第110-111页 |
9.2.4 对迁移体功能的探讨 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-132页 |
致谢 | 第132-134页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第134页 |