摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
中英文缩略词表 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-37页 |
1 动物乳腺发育及泌乳 | 第15-30页 |
1.1 乳腺的基本结构 | 第15页 |
1.2 乳腺的发生过程 | 第15-17页 |
1.3 乳腺不同发育时期生长的特点 | 第17-20页 |
1.4 乳腺发育及泌乳的分子调控机制 | 第20-27页 |
1.5 乳腺蛋白质组研究进展 | 第27-30页 |
2 STAT5研究进展 | 第30-35页 |
2.1 STATs家族 | 第30-31页 |
2.2 STAT5基因简介 | 第31-32页 |
2.3 STAT5靶向调控基因表达的机制 | 第32-34页 |
2.4 STAT5在乳腺发育及泌乳中的生物学功能 | 第34-35页 |
3 本研究目的与意义 | 第35-37页 |
第二章 水牛STAT5a和STAT5b基因及其启动子克隆和分析 | 第37-59页 |
前言 | 第37-38页 |
1 材料与方法 | 第38-46页 |
1.1 试验材料 | 第38页 |
1.2 主要试剂与设备 | 第38-40页 |
1.3 试验方法 | 第40-46页 |
2 结果 | 第46-56页 |
2.1 水牛乳腺组织总RNA抽提 | 第46页 |
2.2 水牛STAT5a和STAT5b基因编码区克隆及分析 | 第46-49页 |
2.3 STAT5a和STAT5b基因非编码区克隆及分析 | 第49-52页 |
2.4 水牛STAT5a和STAT5b基因启动子区的克隆及分析 | 第52-54页 |
2.5 水牛STAT5a和STAT5b基因启动子活性分析 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
第三章 STAT5a和STAT5b基因在水牛组织中的表达模式 | 第59-70页 |
前言 | 第59-60页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
1.1 试验材料 | 第60页 |
1.2 主要试剂与设备 | 第60-61页 |
1.3 试验方法 | 第61-64页 |
2 结果 | 第64-67页 |
2.1 水牛乳腺组织超微结构 | 第64-65页 |
2.2 不同时期水牛乳腺组织HE染色结果 | 第65页 |
2.3 STAT5a和STAT5b基因在水牛乳腺组织中的表达 | 第65-66页 |
2.4 STAT5a和STAT5b基因在水牛不同组织中的表达模式 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
4 结论 | 第69-70页 |
第四章 调控STAT5a和STAT5b基因表达对水牛乳腺上皮细胞增殖及乳蛋白基因表达的影响 | 第70-85页 |
前言 | 第70-71页 |
1 材料与方法 | 第71-76页 |
1.1 试验材料 | 第71页 |
1.2 主要试剂及设备 | 第71-73页 |
1.3 试验方法 | 第73-76页 |
2 结果 | 第76-82页 |
2.1 STAT5a和STAT5b基因shRNA慢病毒包装及滴度测定 | 第76-78页 |
2.2 STAT5a和STAT5b基因表达抑制对水牛乳腺上皮细胞生长的影响 | 第78-80页 |
2.3 乳腺特异性表达水牛STAT5a基因载体的构建 | 第80-81页 |
2.4 过表达STAT5a基因对乳蛋白基因表达的影响 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
4 结论 | 第84-85页 |
第五章 催乳素作用下的水牛乳腺上皮细胞差异表达基因分析 | 第85-110页 |
前言 | 第85-86页 |
1 材料与方法 | 第86-92页 |
1.1 试验材料 | 第86页 |
1.2 主要试剂及设备 | 第86-88页 |
1.3 试验方法 | 第88-92页 |
2 结果 | 第92-105页 |
2.1 PRL作用水牛乳腺上皮细胞存活率测定 | 第92-93页 |
2.2 总RNA的提取和质量检测 | 第93-94页 |
2.3 转录组测序数据结果与分析 | 第94-101页 |
2.4 定量引物鉴定 | 第101-103页 |
2.5 差异表达基因验证 | 第103-104页 |
2.6 STAT5a和STAT5b靶向SOCS2基因的ChIP-PCR验证 | 第104-105页 |
3 讨论 | 第105-109页 |
4 结论 | 第109-110页 |
第六章 水牛乳腺组织定量蛋白质组学研究 | 第110-126页 |
前言 | 第110-111页 |
1 材料与方法 | 第111-115页 |
1.1 试验材料 | 第111页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第111-112页 |
1.3 试验方法 | 第112-115页 |
2 结果 | 第115-121页 |
2.1 水牛乳腺蛋白质质谱鉴定分析结果 | 第115-116页 |
2.2 水牛乳腺差异表达蛋白筛选 | 第116-117页 |
2.3 差异表达蛋白生物信息学分析结果 | 第117-119页 |
2.4 差异表达蛋白的相互作用分析 | 第119-120页 |
2.5 QRT-PCR验证相关基因表达 | 第120-121页 |
3 讨论 | 第121-125页 |
4 结论 | 第125-126页 |
全文总结 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-147页 |
附录 | 第147-189页 |
致谢 | 第189-190页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第190页 |