摘要 | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第8-14页 |
1 血吸虫概述 | 第8-11页 |
1.1 血吸虫分类和生活史 | 第8-9页 |
1.2 血吸虫的生殖生理 | 第9页 |
1.3 血吸虫病的流行概况及防治 | 第9-10页 |
1.4 血吸虫疫苗的研究进展 | 第10-11页 |
2 ELAV-like 2基因 | 第11-12页 |
3 RNA干扰技术及其应用 | 第12-13页 |
4 本研究的目的及意义 | 第13-14页 |
第二章 SjELAV-like 2基因的克隆表达及分布分析 | 第14-31页 |
1 实验材料 | 第14-15页 |
1.1 生物材料 | 第14页 |
1.2 主要试剂和酶 | 第14-15页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第15页 |
2 方法 | 第15-23页 |
2.1 样品的收集 | 第15页 |
2.2 SjELAV-like 2基因的克隆 | 第15-18页 |
2.3 重组质粒pET-28(+)-SjELAV-like 2的原核表达 | 第18-19页 |
2.4 rSjELAV-like 2重组蛋白的纯化 | 第19-20页 |
2.5 纯化蛋白浓度的测定 | 第20页 |
2.6 rSjELAV-like 2重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第20页 |
2.7 表达产物的Western blotting检测 | 第20-21页 |
2.8 不同时期血吸虫SjELAV-like 2基因的扩增 | 第21页 |
2.9 SjELAV-like 2蛋白在虫体中的定位分析 | 第21-22页 |
2.10 SjELAV-like 2基因在血吸虫不同时期的转录情况 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-29页 |
3.1 SjELAV-like 2基因的克隆 | 第23-24页 |
3.2 重组质粒原核表达及蛋白纯化 | 第24-25页 |
3.3 SjELAV-like 2反应原性分析 | 第25-26页 |
3.4 不同时期血吸虫SjELAV-like 2基因的扩增 | 第26-27页 |
3.5 SjELAV-like 2蛋白在虫体中的定位 | 第27页 |
3.6 SjELAV-like 2在不同时期及不同状态血吸虫差异表达分析 | 第27-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 小结 | 第30-31页 |
第三章 SjELAV-like 2基因的RNA干扰研究 | 第31-39页 |
1 实验材料 | 第31页 |
1.1 生物材料 | 第31页 |
1.2 生化试剂及主要仪器 | 第31页 |
2 方法 | 第31-34页 |
2.1 体内RNA干扰筛选最佳siRNA | 第31-32页 |
2.2 体内长期RNA干扰 | 第32-34页 |
3 结果 | 第34-37页 |
3.1 筛选最佳siRNA | 第34页 |
3.2 长期干扰对虫体SjELAV-like 2转录水平的影响 | 第34-35页 |
3.3 RNA体内长期干扰对虫体所产虫卵孵化的影响 | 第35页 |
3.4 扫描电镜观察RNAi效果 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 小结 | 第38-39页 |
第四章 全文总结 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
Abstract | 第45页 |
附录 | 第47-51页 |
致谢 | 第51页 |