| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 引言 | 第17-29页 |
| 1 牙鲆简介 | 第17页 |
| 2 鱼类性腺发育与性别决定机制 | 第17-24页 |
| 2.1 鱼类原始性腺的发生 | 第17-18页 |
| 2.2 鱼类性腺发育周期 | 第18-20页 |
| 2.3 鱼类性别决定机制 | 第20-21页 |
| 2.4 鱼类性别相关基因 | 第21-24页 |
| 3 蛋白质组学 | 第24-27页 |
| 3.1 蛋白质组学 | 第24页 |
| 3.2 iTRAQ技术 | 第24-26页 |
| 3.3 iTRAQ在鱼类差异蛋白组学中的应用 | 第26-27页 |
| 4 牙鲆性腺发育研究进展 | 第27-28页 |
| 5 研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 第一章 iTRAQ技术筛选牙鲆雌雄性腺中相关差异表达蛋白 | 第29-49页 |
| 1 实验材料与方法 | 第29-30页 |
| 1.1 实验材料 | 第29页 |
| 1.2 实验试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 实验仪器 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 蛋白质的提取及处理 | 第30页 |
| 2.2 Bradford测定蛋白浓度 | 第30-31页 |
| 2.3 液相色谱分离与LC-MS/MS分析 | 第31-32页 |
| 2.4 数据库检索与分析 | 第32页 |
| 2.5 鉴定和差异蛋白质功能注释 | 第32-33页 |
| 2.6 性腺组织切片及HE染色 | 第33页 |
| 3 实验结果 | 第33-45页 |
| 3.1 牙鲆卵巢、精巢组织切片 | 第33-35页 |
| 3.2 LCMS/MS鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.3 显著性差异蛋白质 | 第36-37页 |
| 3.4 差异蛋白质功能注释 | 第37-41页 |
| 3.5 差异蛋白的富集分析 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 iTRAQ技术定量结果 | 第45页 |
| 4.2 牙鲆雌雄性腺差异蛋白 | 第45-49页 |
| 第二章 差异表达蛋白CALB2、FMR1、WDR1的基因鉴定与表达图式分析 | 第49-83页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第49-52页 |
| 1.1 实验用鱼 | 第49-50页 |
| 1.2 实验试剂 | 第50-51页 |
| 1.3 相关试剂配置方法 | 第51-52页 |
| 1.4 实验仪器 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-60页 |
| 2.1 calb2,fmr1,wdr1基因克隆验证与序列分析 | 第52-57页 |
| 2.2 荧光定量PCR分析基因表达 | 第57-58页 |
| 2.3 检测差异蛋白表达 | 第58-60页 |
| 3 实验结果 | 第60-80页 |
| 3.1 差异性基因鉴定 | 第60-75页 |
| 3.2 差异性基因表达模式 | 第75-79页 |
| 3.3 差异性蛋白在性腺中的表达 | 第79页 |
| 3.4 CALB2蛋白在组织中的表达与定位 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-83页 |
| 4.1 差异性蛋白进化特征 | 第80页 |
| 4.2 差异性蛋白功能分析 | 第80-83页 |
| 小结与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 发表文章 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
