| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第12-28页 |
| 1.1 自主调控途径 | 第12-13页 |
| 1.2 春化途径 | 第13-15页 |
| 1.3 光周期调控途径 | 第15-18页 |
| 1.4 GA调控途径 | 第18页 |
| 1.5 花成素 | 第18-19页 |
| 1.6 拟南芥FT基因表达调控 | 第19-20页 |
| 1.7 不同植物中FT同源基因的功能 | 第20-21页 |
| 1.8 PEBP家族 | 第21-23页 |
| 1.9 TFL1/CEN-LIKE基因 | 第23-24页 |
| 1.10 TFL1/CEN-LIKE基因调控开花机理 | 第24-25页 |
| 1.11 橡胶树概况 | 第25-26页 |
| 1.12 研究意义 | 第26-27页 |
| 1.13 本研究技术路线 | 第27-28页 |
| 2 实验材料与方法 | 第28-54页 |
| 2.1 材料 | 第28-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 实验所用的菌体及载体 | 第28页 |
| 2.1.3 实验器材 | 第28页 |
| 2.1.4 常用的试剂与药品 | 第28页 |
| 2.1.5 引物 | 第28-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-54页 |
| 2.2.1 PEBP家族成员的获得 | 第35页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第35页 |
| 2.2.3 巴西橡胶树RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.4 总RNA的消化及纯化 | 第36页 |
| 2.2.5 RNA纯度和质量检测 | 第36页 |
| 2.2.6 反转录 | 第36-37页 |
| 2.2.7 PEBP 3' UTR的获得 | 第37-38页 |
| 2.2.8 3'RACE产物胶回收 | 第38页 |
| 2.2.9 回收片段的TA连接 | 第38-39页 |
| 2.2.10 菌液PCR阳性检测和测序 | 第39页 |
| 2.2.11 PEBP家族成员5'UTR的获得 | 第39-41页 |
| 2.2.12 巴西橡胶树基因组DNA提取(用于大量提取) | 第41页 |
| 2.2.13 PEBP家族成员基因全长及其ORF的获得 | 第41-42页 |
| 2.2.14 PEBP家族成员的生物信息学分析 | 第42页 |
| 2.2.15 PEBP家族成员启动子扩增 | 第42-43页 |
| 2.2.16 启动子生物信息学分析 | 第43页 |
| 2.2.17 质粒提取 | 第43页 |
| 2.2.18 PEBP家族成员在巴西橡胶树和转基因拟南芥中的表达分析 | 第43-44页 |
| 2.2.19 用于HbMFT1基因表达分析的样品采集 | 第44页 |
| 2.2.20 用于TFL1/CEN-like基因qRT-PCR的样品采集 | 第44页 |
| 2.2.21 用于FT-like基因qRT-PCR基因的样品采集 | 第44页 |
| 2.2.22 用于转化野生型拟南芥植物过表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.2.23 用于转化拟南芥tfl1-1或者ft-10突变体植物过表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 2.2.24 PEBP家族成员启动子与GUS基因重组植物表达载体的构建 | 第46-48页 |
| 2.2.25 根癌农杆菌GV3101(90RK)和GV3101(90)感受态细胞的制备 | 第48页 |
| 2.2.26 pXCS-PEBP质粒电击转化根癌农杆菌GV3101 (90RK)感受态细胞 | 第48-49页 |
| 2.2.27 pPEBP::GUS质粒电击转化根癌农杆菌GV3101 (90)感受态细胞 | 第49页 |
| 2.2.28 拟南芥的遗传转化 | 第49页 |
| 2.2.29 转基因拟南芥的筛选 | 第49页 |
| 2.2.30 转野生型拟南芥的Southern blot分析 | 第49-52页 |
| 2.2.31 转HbMFT1基因拟南芥表型分析 | 第52页 |
| 2.2.32 ABA对pHbMFT1::GUS转基因拟南芥的处理 | 第52-53页 |
| 2.2.33 GUS染色 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-111页 |
| 3.1 橡胶树HBMFT1基因研究结果与分析 | 第54-71页 |
| 3.1.1 橡胶树HbMFT1的获得 | 第54页 |
| 3.1.2 橡胶树HbMFT1蛋白进化树分析 | 第54-58页 |
| 3.1.3 橡胶树HbMFT1表达分析 | 第58-60页 |
| 3.1.4 HbMFT1基因启动子克隆及启动子元件分析 | 第60-62页 |
| 3.1.5 橡胶树HbMFT1在不同光周期和温度条件下的表达模式 | 第62页 |
| 3.1.6 pHbMFT1::GUS在转基因拟南芥中的表达模式 | 第62-64页 |
| 3.1.7 在转基因拟南芥中ABA对pHbMFT1::GUS活性的影响 | 第64-65页 |
| 3.1.8 过表达35S::HbMFT1对转基因拟南芥种子萌发和小苗生长的影响 | 第65-68页 |
| 3.1.9 过表达35S::HbMFT1对转基因拟南芥开花的影响 | 第68-70页 |
| 3.1.10 HbMFT1基因过表达对转基因拟南芥生长发育相关基因表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.2 橡胶树TFL1/CEN-LIKE基因研究结果与分析 | 第71-92页 |
| 3.2.1 TFL1/CEN-like基因的克隆与基因组结构分析 | 第71-73页 |
| 3.2.2 TFL1/CEN-like蛋白进化树分析 | 第73-76页 |
| 3.2.3 TFL1/CEN-like基因表达模式分析 | 第76-79页 |
| 3.2.4 TFL1/CEN-like基因一天中不同的表达模式分析 | 第79-80页 |
| 3.2.5 TFL1/CEN-like基因在野生型拟南芥中过表达延迟开花并改变表型 | 第80-87页 |
| 3.2.6 TFL1/CEN-like基因转化拟南芥tfl1-1突变体引起表型恢复 | 第87-88页 |
| 3.2.7 TFL1/CEN-like基因启动子顺式作用元件分析 | 第88-90页 |
| 3.2.8 TFL1/CEN-like基因启动子在转基因拟南芥中GUS活性分析 | 第90-92页 |
| 3.3 橡胶树FT-LIKE基因研究结果与分析 | 第92-111页 |
| 3.3.1 FT-like基因的克隆 | 第92页 |
| 3.3.2 FT-like蛋白同源性及进化树分析 | 第92-95页 |
| 3.3.3 橡胶树2个FT-like基因组织特异性表达分析 | 第95-96页 |
| 3.3.4 FT-like基因在不同季节的表达变化 | 第96-97页 |
| 3.3.5 不同光周期和温度对FT-like基因表达的影响 | 第97-99页 |
| 3.3.6 在野生型拟南芥中过表达35S::HbFT1和35S::HbFT2引起早花表型 | 第99-104页 |
| 3.3.7 过表达FT-like基因挽救拟南芥ft-10突变表型 | 第104-108页 |
| 3.3.8 FT-like基因启动子顺式作用元件分析 | 第108-109页 |
| 3.3.9 FT-like基因启动子在转基因拟南芥中GUS活性分析 | 第109-111页 |
| 4 讨论 | 第111-119页 |
| 4.1 关于橡胶树HBMFT1基因及其启动子的研究 | 第111-113页 |
| 4.2 关于橡胶树5个TFL1/CEN-LIKE基因及其启动子的研究 | 第113-116页 |
| 4.3 关于橡胶树2个FT-LIKE基因及其启动子的研究 | 第116-119页 |
| 5 结论 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-135页 |
| ABBREVIATIONS | 第135-137页 |
| 附图 | 第137-141页 |
| 附表 | 第141-153页 |
| 在读博士期间科研成果 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
