摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
1 绪论 | 第15-30页 |
1.1 组织工程科学的概念和研究意义 | 第15-16页 |
1.2 组织工程科学的发展历程 | 第16-18页 |
1.3 组织工程科学的组成要素 | 第18-23页 |
1.3.1 种子细胞 | 第18-22页 |
1.3.2 组织工程支架 | 第22-23页 |
1.3.3 生长因子 | 第23页 |
1.4 血管组织工程 | 第23-28页 |
1.4.1 人体动脉血管的结构 | 第24-25页 |
1.4.2 组织工程血管支架 | 第25-27页 |
1.4.3 组织工程血管支架存在的问题 | 第27-28页 |
1.5 本文的研究工作及目的 | 第28-30页 |
2 聚己内酯复合纤维支架对干细胞行为的影响 | 第30-45页 |
2.1 引言 | 第30-31页 |
2.2 实验材料与方法 | 第31-36页 |
2.2.1 实验材料 | 第31-32页 |
2.2.2 纤维支架的制备 | 第32页 |
2.2.3 磷酸盐缓冲液(PBS)浸泡前后的支架形貌 | 第32-33页 |
2.2.4 纤维支架的交联处理 | 第33页 |
2.2.5 傅里叶偏振红外光谱分析测试(FTIR) | 第33页 |
2.2.6 纤维支架的热力学性能 | 第33页 |
2.2.7 纤维支架的表面润湿性能 | 第33-34页 |
2.2.8 纤维支架的力学性能 | 第34页 |
2.2.9 MSCs的提取与传代培养 | 第34-35页 |
2.2.10 MSCs在纤维支架表面的接种 | 第35页 |
2.2.11 细胞增殖测试 | 第35页 |
2.2.12 细胞骨架的染色与细胞形态的观察 | 第35-36页 |
2.2.13 统计分析 | 第36页 |
2.3 实验结果分析与讨论 | 第36-44页 |
2.3.1 各组纤维支架的形貌分析 | 第36-38页 |
2.3.2 Gelatin引入以及交联处理对纤维支架性能的影响 | 第38-40页 |
2.3.3 纤维支架对MSCs行为的影响 | 第40-44页 |
2.4 本章小结 | 第44-45页 |
3 支架表面硬度对干细胞分化行为的影响 | 第45-60页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 实验材料与方法 | 第46-51页 |
3.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
3.2.2 纤维支架的制备 | 第47页 |
3.2.3 纤维支架的性能表征 | 第47-48页 |
3.2.4 MSCs在纤维支架上的增殖行为 | 第48页 |
3.2.5 内皮细胞特征基因PCR芯片测试 | 第48-49页 |
3.2.6 MSCs在不同纤维支架上分化后的基因含量测试 | 第49页 |
3.2.7 免疫荧光染色和免疫蛋白印迹测试 | 第49-51页 |
3.2.8 统计分析 | 第51页 |
3.3 实验结果分析与讨论 | 第51-59页 |
3.3.1 退火处理后的纤维支架性能表征 | 第51-53页 |
3.3.2 MSCs在不同支架上的增殖行为 | 第53页 |
3.3.3 支架表面硬度影响MSCs向ECs分化过程中的基因表达 | 第53-56页 |
3.3.4 支架表面硬度影响MSCs向ECs分化过程中的蛋白表达 | 第56-59页 |
3.4 本章小结 | 第59-60页 |
4 支架表面硬度调控干细胞分化的信号通路研究 | 第60-70页 |
4.1 引言 | 第60-61页 |
4.2 实验材料与方法 | 第61-64页 |
4.2.1 实验材料 | 第61-62页 |
4.2.2 纤维支架的制备 | 第62页 |
4.2.3 在各组纤维支架上生长的MSCs中MIF因子的表达 | 第62页 |
4.2.4 经MIFsiRNA处理后的MSCs在不同支架上的基因和蛋白测试 | 第62-63页 |
4.2.5 经VEGFsiRNA处理后的MSCs在不同支架上的基因和蛋白测试 | 第63-64页 |
4.2.6 统计分析 | 第64页 |
4.3 实验结果分析与讨论 | 第64-69页 |
4.3.1 支架表面硬度影响MSCs分化过程中的MIF表达 | 第64页 |
4.3.2 siRNA对MSCs的干扰效率 | 第64-65页 |
4.3.3 经MIFsiRNA处理后的MSCs在不同支架上的分化行为 | 第65-67页 |
4.3.4 经VEGFsiRNA处理后的MSCs在不同支架上的分化行为 | 第67-69页 |
4.4 本章小结 | 第69-70页 |
5 功能化支架对干细胞的分化诱导及功能维持 | 第70-84页 |
5.1 引言 | 第70-71页 |
5.2 实验材料与方法 | 第71-76页 |
5.2.1 实验材料 | 第71-72页 |
5.2.2 纳米颗粒的制备 | 第72页 |
5.2.3 功能化支架的制备 | 第72-73页 |
5.2.4 功能化支架的生长因子缓释曲线 | 第73页 |
5.2.5 纤维支架的表面润湿性能 | 第73-74页 |
5.2.6 纤维支架的力学性能 | 第74页 |
5.2.7 纤维支架的热力学性能 | 第74页 |
5.2.8 功能化支架对MSCs分化行为的诱导 | 第74-75页 |
5.2.9 基因和蛋白的定量测试 | 第75页 |
5.2.10 功能化支架对ECs行为的影响 | 第75-76页 |
5.2.11 统计分析 | 第76页 |
5.3 实验结果分析与讨论 | 第76-83页 |
5.3.1 纳米颗粒对VEGF的负载 | 第76-77页 |
5.3.2 纳米颗粒对纤维支架性能的影响 | 第77-79页 |
5.3.3 功能化支架对MSCs分化行为的影响 | 第79-81页 |
5.3.4 功能化支架对ECs行为的影响 | 第81-83页 |
5.4 本章小结 | 第83-84页 |
6 总结与展望 | 第84-87页 |
7 参考文献 | 第87-103页 |
8 攻读博士学位期间的主要科研成果 | 第103-106页 |
9 致谢 | 第106-107页 |