摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-29页 |
1 细胞自噬的研究进展 | 第15-21页 |
1.1 细胞自噬关键基因 | 第15-18页 |
1.2 自噬调控信号通路 | 第18-19页 |
1.3 自噬与脂质代谢 | 第19-21页 |
2 锌对细胞的调控机制研究进展 | 第21-22页 |
3 锌对细胞自噬影响的研究进展 | 第22-24页 |
4 锌对脂代谢影响的研究进展 | 第24-28页 |
4.1 锌对哺乳动物脂代谢的影响 | 第24-26页 |
4.2 锌对鱼类脂代谢的影响 | 第26-28页 |
5 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
第二章 黄颡鱼细胞自噬关键基因的分子特征解析及组织表达 | 第29-64页 |
1 前言 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-38页 |
2.1 实验鱼的饲养及样品采集 | 第30页 |
2.2 实验试剂 | 第30-31页 |
2.3 细胞自噬关键基因cDNA序列的克隆 | 第31-35页 |
2.4 细胞自噬关键基因序列分析 | 第35页 |
2.5 细胞自噬关键基因的组织表达分析 | 第35-38页 |
2.6 统计分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-59页 |
3.1 黄颡鱼细胞自噬关键基因cDNA序列特征 | 第38-39页 |
3.2 黄颡鱼细胞自噬关键基因氨基酸序列特征 | 第39-49页 |
3.3 黄颡鱼细胞自噬关键基因氨基酸序列系统进化分析 | 第49-57页 |
3.4 黄颡鱼细胞自噬关键基因组织分布水平 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
第三章 饲料和水体锌暴露对黄颡鱼肝脏细胞自噬的影响 | 第64-74页 |
1 前言 | 第64-65页 |
2 材料与方法 | 第65-68页 |
2.1 实验设计 | 第65-67页 |
2.1.1 饲料锌暴露黄颡鱼养殖实验 | 第65-66页 |
2.1.2 水体锌暴露黄颡鱼养殖实验 | 第66-67页 |
2.2 样品分析 | 第67-68页 |
2.2.1 肝脏电镜切片 | 第67-68页 |
2.2.2 基因表达水平分析 | 第68页 |
2.3 统计分析 | 第68页 |
3 结果与分析 | 第68-72页 |
3.1 饲料锌暴露对黄颡鱼肝脏细胞自噬的影响 | 第68-70页 |
3.2 水体锌暴露对黄颡鱼肝脏细胞自噬的影响 | 第70-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
第四章 细胞自噬在锌调控黄颡鱼肝脏脂代谢中的作用 | 第74-98页 |
1 前言 | 第74-75页 |
2 材料与方法 | 第75-82页 |
2.1 黄颡鱼养殖实验 | 第75页 |
2.2 黄颡鱼肝脏原代细胞的分离及培养 | 第75-76页 |
2.3 细胞酶活力分析 | 第76-78页 |
2.4 细胞活力及脂质蓄积分析 | 第78-79页 |
2.5 肝脏油红以及脂滴BODIPY493/503染色 | 第79页 |
2.6 肝细胞超微结构观察 | 第79页 |
2.7 肝细胞自噬囊泡荧光染色 | 第79页 |
2.8 肝细胞游离Zn~(2+)和Ca~(2+)含量测定 | 第79-80页 |
2.9 定量PCR | 第80-82页 |
2.10 蛋白质免疫印迹分析 | 第82页 |
2.11 统计分析 | 第82页 |
3 结果与分析 | 第82-95页 |
3.1 日粮锌添加缓解了黄颡鱼肝脏脂沉积 | 第82-83页 |
3.2 锌通过激活肝细胞自噬调控脂肪沉积 | 第83-88页 |
3.3 锌通过激活脂噬缓解肝细胞脂肪沉积促进脂肪分解 | 第88-90页 |
3.4 锌诱导的自噬和脂解依赖于细胞内游离的Zn~(2+) | 第90-93页 |
3.5 锌通过Ca~(2+)通路激活自噬和脂解 | 第93-95页 |
4 讨论 | 第95-98页 |
全文总结 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-116页 |
附录 | 第116-118页 |
致谢 | 第118页 |