| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 植物病害及传统防治策略 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物检疫 | 第11页 |
| 1.1.2 农业防治 | 第11-12页 |
| 1.1.3 化学防治 | 第12页 |
| 1.1.4 物理防治 | 第12页 |
| 1.1.5 生物防治 | 第12-13页 |
| 1.2 抗菌肽及其潜在作用价值 | 第13-18页 |
| 1.2.1 抗菌肽简述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 抗菌肽的潜在作用价值 | 第17-18页 |
| 1.3 抗菌肽在植物抗病基因工程的运用 | 第18-23页 |
| 1.3.1 在植物中表达抗菌肽来抵抗病害 | 第19-21页 |
| 1.3.2 存在的问题及展望 | 第21-23页 |
| 第2章 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 2.2 研究内容 | 第24页 |
| 2.2.1 构建了2x35S::spThanatin基因的双元表达载体 | 第24页 |
| 2.2.2 获得烟草转基因T1代植株并检测Thanatin基因相对表达水平 | 第24页 |
| 2.2.3 分析Thanatin对转基因烟草的青枯病耐受性的影响 | 第24页 |
| 2.3 实验方案设计 | 第24-25页 |
| 第3章 材料方法 | 第25-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25-27页 |
| 3.1.2 菌株、载体和PCR引物 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 3.1.4 主要生物学试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| 3.1.5 各种试剂及培养基的配制 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-45页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第29-35页 |
| 3.2.2 农杆菌感受态的制备及转化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 烟草再生与遗传转化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 转基因阳性烟草植株的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.5 Thanatin抗菌肽基因在T1代烟草叶片中的表达分析 | 第38-41页 |
| 3.2.6 青枯菌CQPS-1的培养及保存 | 第41页 |
| 3.2.7 烟草通过伤根浇灌法接种青枯菌CQPS-1及生理检测 | 第41-43页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第43-45页 |
| 第4章 结果分析 | 第45-55页 |
| 4.1 载体的鉴定 | 第45-49页 |
| 4.1.1 中间载体pVCT1404p1的构建与鉴定 | 第45-47页 |
| 4.1.2 表达载体pVCT2365p5的构建与鉴定 | 第47-49页 |
| 4.2 转基因烟草植株的获得及PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 4.2.1 获得转Thanatin抗菌肽基因的烟草抗性植株 | 第49页 |
| 4.2.2 转Thanatin抗菌肽基因抗性烟草的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 4.3 Thanatin抗菌肽基因在T1代烟草叶片中的表达分析 | 第50-51页 |
| 4.4 烟草植株对青枯菌CQPS-1耐受性分析及叶绿素含量测定 | 第51-55页 |
| 4.4.1 烟草接种青枯病及病发指数统计 | 第51-53页 |
| 4.4.2 烟草病发早期叶片症状及SPAD叶绿素数值测定 | 第53-55页 |
| 第5章 讨论 | 第55-57页 |
| 5.1 转基因植株的获得和鉴定 | 第55页 |
| 5.2 转基因表达分析 | 第55-56页 |
| 5.3 转Thanatin基因烟草抗病性分析 | 第56页 |
| 5.4 后续研究 | 第56-57页 |
| 第6章 结论 | 第57-59页 |
| 6.1 构建了含有2x35S::spThanatin基因的双元表达载体 | 第57页 |
| 6.2 获得了烟草转基因T1代植株并明确了Thanatin基因的表达水平 | 第57页 |
| 6.3 Thanatin基因异源表达增强了转基因烟草对青枯病的耐受性 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 附录 | 第67页 |
