| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRCT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 肺癌简介 | 第11-13页 |
| 1.2 肺癌的治疗 | 第13-15页 |
| 1.2.1 传统治疗法 | 第13页 |
| 1.2.2 肺癌的分子靶向治疗 | 第13-15页 |
| 1.3 紫杉醇简介 | 第15-18页 |
| 1.3.1 微管细胞骨架结构和功能 | 第17页 |
| 1.3.2 体内外紫杉醇耐药机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 紫杉醇的临床应用 | 第18页 |
| 1.4 紫杉醇在肺癌治疗中的临床应用 | 第18-19页 |
| 1.5 DNA甲基化芯片分析 | 第19-20页 |
| 1.6 本课题研究的内容及其意义 | 第20-21页 |
| 第二章 人肺癌A549耐药细胞株的构建 | 第21-35页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.2.4 主要试剂的配制准备 | 第22-23页 |
| 2.3 实验过程及方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 实验前准备 | 第23页 |
| 2.3.2 细胞的复苏、传代、换液及冻存 | 第23-24页 |
| 2.3.3 人肺癌A549紫杉醇耐药株的构建 | 第24-25页 |
| 2.3.4 亲本株(A549)与耐药株(A549T)细胞形态学的差异比较 | 第25页 |
| 2.3.5 细胞增殖实验 | 第25页 |
| 2.3.6 亲本株与耐药株药物半致死浓度(IC_(50))及其耐药指数(RI)的测定 | 第25-26页 |
| 2.3.7 细胞凋亡检测实验 | 第26-27页 |
| 2.3.8 细胞周期检测实验 | 第27页 |
| 2.3.9 细胞迁移实验检测 | 第27-28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-33页 |
| 2.4.1 敏感株与耐药株形态学差异 | 第28-29页 |
| 2.4.2 细胞增殖曲线 | 第29页 |
| 2.4.3 敏感株与耐药株IC_(50)与RI的测定结果 | 第29-30页 |
| 2.4.4 细胞凋亡实验结果 | 第30-31页 |
| 2.4.5 细胞周期实验结果 | 第31-32页 |
| 2.4.6 Transwell实验结果 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 850K甲基化芯片分析及相关差异基因的表达验证 | 第35-54页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 相关技术简介 | 第35-36页 |
| 3.2.1 850K甲基化芯片分析简介 | 第35页 |
| 3.2.2 qRT-PCR简介 | 第35-36页 |
| 3.3 甲基化芯片测序相关流程 | 第36-39页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第36-37页 |
| 3.3.2 实验过程 | 第37页 |
| 3.3.3 数据处理与分析 | 第37-39页 |
| 3.3.4 样本质检信息 | 第39页 |
| 3.4 甲基化芯片测序后相关数据库分析 | 第39-46页 |
| 3.4.1 差异甲基化基因富集疾病分析 | 第39-41页 |
| 3.4.2 差异甲基化基因富集通路分析 | 第41-46页 |
| 3.5 靶基因的初步筛选 | 第46-49页 |
| 3.5.1 筛选基因的甲基化芯片测序相关信息 | 第46-47页 |
| 3.5.2 筛选基因相关介绍 | 第47-49页 |
| 3.6 靶基因的表达验证 | 第49-52页 |
| 3.6.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.6.2 实验仪器 | 第49-50页 |
| 3.6.3 引物设计 | 第50页 |
| 3.6.4 RNA的提取 | 第50-51页 |
| 3.6.5 qRT-PCR对基因的mRNA验证 | 第51-52页 |
| 3.6.6 qRT-PCR反应结果 | 第52页 |
| 3.7 本章讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 KANK1在非小细胞肺癌紫杉醇耐药中的相关生物功能探索 | 第54-63页 |
| 4.1 前言 | 第54页 |
| 4.2 KANK1的相关简介 | 第54-55页 |
| 4.3 实验试剂和相关仪器 | 第55-56页 |
| 4.3.1 实验试剂 | 第55-56页 |
| 4.3.2 实验仪器 | 第56页 |
| 4.4 qRT-PCR检测干扰效率及SiRNA筛选 | 第56-58页 |
| 4.5 细胞相关功能实验 | 第58-59页 |
| 4.5.1 CCK-8法检测KANK1基因干扰前后IC_(50)变化 | 第58页 |
| 4.5.2 流式细胞仪检测干扰前后A549细胞的凋亡情况 | 第58-59页 |
| 4.6 干扰相关实验结果 | 第59-61页 |
| 4.6.1 干扰后A549细胞IC_(50)变化 | 第59-60页 |
| 4.6.2 干扰KANK1后对A549细胞凋亡的影响 | 第60-61页 |
| 4.6.3 TCGA数据库中KANK1的表达与生存率关系 | 第61页 |
| 4.7 本章小结 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第77-79页 |
| 作者简介 | 第79-80页 |
