| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第20-40页 |
| 1.1 引言 | 第20页 |
| 1.2 糖化酶概述 | 第20-29页 |
| 1.2.1 糖化酶的来源 | 第20-22页 |
| 1.2.2 糖化酶的生产 | 第22-23页 |
| 1.2.3 糖化酶的分离纯化 | 第23页 |
| 1.2.4 糖化酶的活力测定 | 第23-24页 |
| 1.2.5 糖化酶的性质 | 第24-26页 |
| 1.2.6 糖化酶的结构特征及催化机制 | 第26-28页 |
| 1.2.7 糖化酶的应用 | 第28-29页 |
| 1.3 蛋白质构象研究常用技术 | 第29-33页 |
| 1.3.1 圆二色谱技术在蛋白质构象研究中的应用 | 第29-31页 |
| 1.3.2 荧光光谱在蛋白质构象研究中的应用 | 第31-32页 |
| 1.3.3 动态光散射技术在蛋白质构象研究的应用 | 第32-33页 |
| 1.4 酶的稳定剂简介 | 第33-34页 |
| 1.4.1 酶稳定剂种类 | 第33页 |
| 1.4.2 多元醇类的稳定剂机制 | 第33-34页 |
| 1.4.3 海藻糖的稳定机制 | 第34页 |
| 1.5 固定化酶简介 | 第34-38页 |
| 1.5.1 固定化酶概述 | 第34-35页 |
| 1.5.2 固定化酶常用方法 | 第35-38页 |
| 1.5.3 固定化酶的应用 | 第38页 |
| 1.6 选题目的与意义 | 第38-40页 |
| 第2章 糖化酶的分离纯化及酶学性质分析 | 第40-63页 |
| 2.1 引言 | 第40页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第40-42页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第41页 |
| 2.2.3 菌株与培养基 | 第41-42页 |
| 2.3 实验方法 | 第42-47页 |
| 2.3.1 粗酶液收集 | 第42页 |
| 2.3.2 糖化酶的分离纯化研究 | 第42-43页 |
| 2.3.3 糖化酶活力及蛋白含量测定 | 第43-44页 |
| 2.3.4 糖化酶的纯度、分子量及粒径测定 | 第44页 |
| 2.3.5 糖化酶的 N-糖基化分析 | 第44-45页 |
| 2.3.6 糖化酶的酶学性质分析 | 第45-47页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第47-61页 |
| 2.4.1 糖化酶的分离纯化研究 | 第47-49页 |
| 2.4.2 糖化酶的纯度、分子量及粒径检测 | 第49-52页 |
| 2.4.3 纯化糖化酶的 N-糖基化分析 | 第52-53页 |
| 2.4.4 糖化酶的酶学性质分析 | 第53-61页 |
| 2.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第3章 温度诱导糖化酶失活及去折叠机制 | 第63-74页 |
| 3.1 引言 | 第63页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第63-64页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第63-64页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第64页 |
| 3.2.3 实验样品 | 第64页 |
| 3.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 3.3.1 糖化酶活力测定 | 第64页 |
| 3.3.2 蛋白含量测定 | 第64页 |
| 3.3.3 糖化酶的热稳定性 | 第64页 |
| 3.3.4 糖化酶的 Native-PAGE 分析 | 第64-65页 |
| 3.3.5 圆二色谱检测 | 第65页 |
| 3.3.6 二级结构含量计算 | 第65页 |
| 3.3.7 荧光光谱检测 | 第65-66页 |
| 3.3.8 紫外吸收光谱检测 | 第66页 |
| 3.3.9 动态光散射检测 | 第66页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第66-73页 |
| 3.4.1 糖化酶的最适温度及热稳定性 | 第66-67页 |
| 3.4.2 糖化酶的 Native-PAGE 分析 | 第67-68页 |
| 3.4.3 圆二色谱检测 | 第68-70页 |
| 3.4.4 荧光光谱检测 | 第70-71页 |
| 3.4.5 紫外吸收光谱检测 | 第71-72页 |
| 3.4.6 动态光散射检测 | 第72-73页 |
| 3.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第4章 稳定剂对糖化酶热稳定性影响及稳定机制研究 | 第74-92页 |
| 4.1 引言 | 第74页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第74-75页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第74-75页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第75页 |
| 4.2.3 实验样品 | 第75页 |
| 4.3 实验方法 | 第75-78页 |
| 4.3.1 稳定剂对糖化酶活力影响 | 第75页 |
| 4.3.2 稳定剂对糖化酶热稳定性影响 | 第75页 |
| 4.3.3 糖化酶的 Native-PAGE 分析 | 第75页 |
| 4.3.4 糖化酶的热失活动力学分析 | 第75-76页 |
| 4.3.5 稳定剂对糖化酶动力学参数影响 | 第76页 |
| 4.3.6 圆二色谱测定 | 第76-77页 |
| 4.3.7 荧光光谱测定 | 第77页 |
| 4.3.8 动态光散射测定 | 第77-78页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第78-91页 |
| 4.4.1 稳定剂对糖化酶活力影响 | 第78页 |
| 4.4.2 稳定剂对糖化酶热稳定性影响 | 第78-80页 |
| 4.4.3 糖化酶的 Native-PAGE 分析 | 第80-81页 |
| 4.4.4 糖化酶的热失活动力学分析 | 第81-83页 |
| 4.4.5 稳定剂对糖化酶动力学参数影响 | 第83-84页 |
| 4.4.6 圆二色谱分析 | 第84-86页 |
| 4.4.7 荧光光谱分析 | 第86-89页 |
| 4.4.8 动态光散射分析 | 第89-91页 |
| 4.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 第5章 糖化酶的固定化及固定化酶性质研究 | 第92-109页 |
| 5.1 引言 | 第92页 |
| 5.2 实验仪器与材料 | 第92-93页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第92-93页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第93页 |
| 5.2.3 实验样品 | 第93页 |
| 5.3 实验方法 | 第93-97页 |
| 5.3.1 固定化糖化酶的活力测定 | 第93-94页 |
| 5.3.2 蛋白含量测定 | 第94页 |
| 5.3.3 固定化树脂的载量及活力产率 | 第94页 |
| 5.3.4 固定化酶条件探索 | 第94-96页 |
| 5.3.5 固定化酶表征 | 第96页 |
| 5.3.6 固定化糖化酶的性质分析 | 第96-97页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第97-108页 |
| 5.4.1 固定化条件探索 | 第97-101页 |
| 5.4.2 固定化酶表征 | 第101-102页 |
| 5.4.3 固定化糖化酶的性质分析 | 第102-108页 |
| 5.5 本章小结 | 第108-109页 |
| 第6章 总结与创新点 | 第109-112页 |
| 6.1 总结 | 第109-110页 |
| 6.2 创新点 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-127页 |
| 攻读博士期间的科研成果 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
