摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 课题的研究背景和目的意义 | 第9页 |
1.2 长非编码RNA研究进展 | 第9-13页 |
1.2.1 长非编码RNA的功能 | 第9-11页 |
1.2.2 长非编码基因Rian与骨骼肌发育 | 第11-13页 |
1.3 骨骼肌发育的机制 | 第13-15页 |
1.3.1 肌肉的生成 | 第13页 |
1.3.2 骨骼肌生长发育的分子调控机制 | 第13-14页 |
1.3.3 骨骼肌发育过程中的重要信号通路 | 第14-15页 |
1.4 课题的主要研究内容 | 第15-18页 |
1.4.1 Irm基因在小鼠肌源细胞系C2C12 中的作用研究 | 第15-16页 |
1.4.2 Irm基因在小鼠原代骨骼肌细胞中的作用研究 | 第16-17页 |
1.4.3 技术路线 | 第17-18页 |
第2章 实验材料与方法 | 第18-25页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验动物和细胞系 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.2 实验仪器 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-25页 |
2.3.1 小鼠原代骨骼肌细胞的分离和培养 | 第19-20页 |
2.3.2 脂质体转染细胞 | 第20页 |
2.3.3 质粒的转化、提取和纯化 | 第20-21页 |
2.3.4 组织总RNA提取 | 第21页 |
2.3.5 反转录cDNA | 第21-22页 |
2.3.6 实时定量PCR | 第22-23页 |
2.3.6 Western Blot | 第23页 |
2.3.7 细胞周期分析 | 第23-24页 |
2.3.8 免疫细胞化学 | 第24页 |
2.3.9 统计学分析 | 第24-25页 |
第3章 Irm对骨骼肌细胞增殖与迁移的影响 | 第25-40页 |
3.1 引言 | 第25页 |
3.2 Irm在C2C12 细胞增殖分化过程中的表达分析 | 第25-27页 |
3.2.1 C2C12 细胞的诱导分化和鉴定 | 第25-26页 |
3.3.2 Irm在C2C12 细胞分化过程中的表达情况 | 第26-27页 |
3.3 Irm在小鼠原代骨骼肌细胞分化过程中的表达分析 | 第27-29页 |
3.3.1 原代骨骼肌细胞的分离及纯度鉴定 | 第27-29页 |
3.3.2 Irm在原代骨骼肌细胞诱导分化过程中的表达 | 第29页 |
3.4 Irm过表达载体的构建和干扰片段siRNA的设计 | 第29-31页 |
3.4.1 Irm过表达载体的构建 | 第29-30页 |
3.4.2 Irm干扰片段的设计 | 第30-31页 |
3.5 过表达Irm对C2C12 细胞增殖、迁移和细胞周期的影响 | 第31-34页 |
3.5.1 过表达Irm对C2C12 细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
3.5.2 过表达Irm对C2C12 细胞周期的影响 | 第32-33页 |
3.5.3 过表达Irm对C2C12 细胞迁移的影响 | 第33-34页 |
3.6 干扰Irm对原代骨骼肌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响 | 第34-37页 |
3.6.2 干扰Irm对原代骨骼肌细胞增殖的影响 | 第35页 |
3.6.3 干扰Irm对原代骨骼肌细胞周期的影响 | 第35-36页 |
3.6.4 干扰Irm对原代骨骼肌细胞迁移的影响 | 第36-37页 |
3.7 本章讨论 | 第37-39页 |
3.8 本章小结 | 第39-40页 |
第4章 Irm对骨骼肌细胞分化的影响及其作用 | 第40-54页 |
4.1 引言 | 第40页 |
4.2 过表达Irm对C2C12 细胞分化的影响 | 第40-44页 |
4.2.1 过表达Irm对C2C12 细胞分化形态学的影响 | 第40-42页 |
4.2.2 过表达Irm后C2C12 细胞骨骼肌marker基因检测 | 第42-44页 |
4.3 干扰Irm对原代骨骼肌细胞分化的影响 | 第44-48页 |
4.3.1 干扰Irm对原代骨骼肌细胞分化形态学的影响 | 第44-46页 |
4.3.2 干扰Irm后原代成肌细胞骨骼肌marker基因检测 | 第46-48页 |
4.4 干扰Irm后原代骨骼肌细胞全基因组表达谱分析 | 第48-50页 |
4.4.1 测序数据质量统计结果 | 第48-49页 |
4.4.2 已知转录本的差异表达分析 | 第49-50页 |
4.5 本章讨论 | 第50-53页 |
4.6 本章小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其他成果 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |