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长非编码RNA Rian/Irm在骨骼肌发育中的功能初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
第1章 绪论第9-18页
    1.1 课题的研究背景和目的意义第9页
    1.2 长非编码RNA研究进展第9-13页
        1.2.1 长非编码RNA的功能第9-11页
        1.2.2 长非编码基因Rian与骨骼肌发育第11-13页
    1.3 骨骼肌发育的机制第13-15页
        1.3.1 肌肉的生成第13页
        1.3.2 骨骼肌生长发育的分子调控机制第13-14页
        1.3.3 骨骼肌发育过程中的重要信号通路第14-15页
    1.4 课题的主要研究内容第15-18页
        1.4.1 Irm基因在小鼠肌源细胞系C2C12 中的作用研究第15-16页
        1.4.2 Irm基因在小鼠原代骨骼肌细胞中的作用研究第16-17页
        1.4.3 技术路线第17-18页
第2章 实验材料与方法第18-25页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 实验动物和细胞系第18页
        2.1.2 实验试剂第18-19页
    2.2 实验仪器第19页
    2.3 实验方法第19-25页
        2.3.1 小鼠原代骨骼肌细胞的分离和培养第19-20页
        2.3.2 脂质体转染细胞第20页
        2.3.3 质粒的转化、提取和纯化第20-21页
        2.3.4 组织总RNA提取第21页
        2.3.5 反转录cDNA第21-22页
        2.3.6 实时定量PCR第22-23页
        2.3.6 Western Blot第23页
        2.3.7 细胞周期分析第23-24页
        2.3.8 免疫细胞化学第24页
        2.3.9 统计学分析第24-25页
第3章 Irm对骨骼肌细胞增殖与迁移的影响第25-40页
    3.1 引言第25页
    3.2 Irm在C2C12 细胞增殖分化过程中的表达分析第25-27页
        3.2.1 C2C12 细胞的诱导分化和鉴定第25-26页
        3.3.2 Irm在C2C12 细胞分化过程中的表达情况第26-27页
    3.3 Irm在小鼠原代骨骼肌细胞分化过程中的表达分析第27-29页
        3.3.1 原代骨骼肌细胞的分离及纯度鉴定第27-29页
        3.3.2 Irm在原代骨骼肌细胞诱导分化过程中的表达第29页
    3.4 Irm过表达载体的构建和干扰片段siRNA的设计第29-31页
        3.4.1 Irm过表达载体的构建第29-30页
        3.4.2 Irm干扰片段的设计第30-31页
    3.5 过表达Irm对C2C12 细胞增殖、迁移和细胞周期的影响第31-34页
        3.5.1 过表达Irm对C2C12 细胞增殖的影响第31-32页
        3.5.2 过表达Irm对C2C12 细胞周期的影响第32-33页
        3.5.3 过表达Irm对C2C12 细胞迁移的影响第33-34页
    3.6 干扰Irm对原代骨骼肌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响第34-37页
        3.6.2 干扰Irm对原代骨骼肌细胞增殖的影响第35页
        3.6.3 干扰Irm对原代骨骼肌细胞周期的影响第35-36页
        3.6.4 干扰Irm对原代骨骼肌细胞迁移的影响第36-37页
    3.7 本章讨论第37-39页
    3.8 本章小结第39-40页
第4章 Irm对骨骼肌细胞分化的影响及其作用第40-54页
    4.1 引言第40页
    4.2 过表达Irm对C2C12 细胞分化的影响第40-44页
        4.2.1 过表达Irm对C2C12 细胞分化形态学的影响第40-42页
        4.2.2 过表达Irm后C2C12 细胞骨骼肌marker基因检测第42-44页
    4.3 干扰Irm对原代骨骼肌细胞分化的影响第44-48页
        4.3.1 干扰Irm对原代骨骼肌细胞分化形态学的影响第44-46页
        4.3.2 干扰Irm后原代成肌细胞骨骼肌marker基因检测第46-48页
    4.4 干扰Irm后原代骨骼肌细胞全基因组表达谱分析第48-50页
        4.4.1 测序数据质量统计结果第48-49页
        4.4.2 已知转录本的差异表达分析第49-50页
    4.5 本章讨论第50-53页
    4.6 本章小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
附录第61-62页
攻读硕士学位期间发表的论文及其他成果第62-64页
致谢第64页

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