| 缩略词表 | 第2-3页 |
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一章 资料与方法 | 第11-30页 |
| 1.1 实验样本 | 第11页 |
| 1.1.1 样本来源 | 第11页 |
| 1.1.2 样本分组 | 第11页 |
| 1.2 实验仪器与耗材 | 第11-13页 |
| 1.2.1 实验仪器 | 第11-12页 |
| 1.2.2 实验耗材 | 第12-13页 |
| 1.3 实验试剂及主要溶液配制 | 第13-16页 |
| 1.3.1 主要实验试剂 | 第13-14页 |
| 1.3.2 待测基因的PCR引物序列 | 第14-15页 |
| 1.3.3 主要溶液的配制 | 第15-16页 |
| 1.4 人角膜基质细胞（HCF）和圆锥角膜基质细胞（KCF）的传代培养及处理 | 第16-18页 |
| 1.4.1 原代角膜基质细胞的培养步骤 | 第16页 |
| 1.4.2 角膜基质细胞的传代 | 第16-17页 |
| 1.4.3 角膜基质细胞的冻存 | 第17页 |
| 1.4.4 角膜基质细胞的复苏 | 第17-18页 |
| 1.4.5 模拟氧化应激条件的处理 | 第18页 |
| 1.5 细胞内活性氧自由基（ROS）检测 | 第18页 |
| 1.6 实时定量PCR（RT-qPCR）检测法 | 第18-21页 |
| 1.6.1 样品制备 | 第18页 |
| 1.6.2 总RNA的提取 | 第18-19页 |
| 1.6.3 测定RNA浓度 | 第19页 |
| 1.6.4 反转录合成cDNA第一链 | 第19-20页 |
| 1.6.5 荧光实时定量PCR技术 | 第20-21页 |
| 1.7 Western Blot检测法 | 第21-25页 |
| 1.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第21页 |
| 1.7.2 细胞核-质蛋白的分离提取 | 第21-22页 |
| 1.7.3 BCA法测蛋白浓度 | 第22-23页 |
| 1.7.4 配制SDS-PAGE凝胶 | 第23-24页 |
| 1.7.5 加样及电泳 | 第24页 |
| 1.7.6 湿法转膜 | 第24页 |
| 1.7.7 免疫反应（目的蛋白特异性结合抗体） | 第24-25页 |
| 1.8 明胶酶谱技术 | 第25-28页 |
| 1.8.1 实验用试剂的配制 | 第25-27页 |
| 1.8.2 样本的收集 | 第27页 |
| 1.8.3 加样与电泳 | 第27-28页 |
| 1.8.4 明胶酶谱反应 | 第28页 |
| 1.8.5 明胶酶谱的保存 | 第28页 |
| 1.9 统计学分析方法 | 第28-30页 |
| 第二章 实验结果 | 第30-38页 |
| 2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.2 细胞内ROS检测 | 第31页 |
| 2.3 细胞核内Nrf2蛋白水平检测 | 第31-32页 |
| 2.4 Nrf2-ARE信号通路下游抗氧化蛋白表达检测 | 第32-35页 |
| 2.5 基质降解相关蛋白的检测 | 第35-38页 |
| 第三章 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 综述 | 第43-53页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |