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蛋白质4.1R与重症肌无力关系的探讨

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表第13-15页
引言第15-17页
第一部分 探讨 4.1R对DC细胞生物功能的影响第17-45页
    1.1 前言第17页
    1.2 材料第17-23页
        1.2.1 主要试剂第17-19页
        1.2.2 仪器设备第19-20页
        1.2.3 主要溶剂的配制第20-23页
    1.3 方法第23-32页
        1.3.1 引物设计第23页
        1.3.2 基因 4.1R过表达载体的构建第23-27页
        1.3.4 细胞培养和转染第27页
        1.3.5 mRNA的提取及逆转录反应第27-28页
        1.3.6 荧光定量PCR第28-29页
        1.3.7 蛋白质的提取和BCA法测定蛋白浓度第29页
        1.3.8 免疫印迹杂交法第29-31页
        1.3.9 细胞膜表面表达分子及表面共刺激的分子的检测(直接标记法)第31页
        1.3.10 细胞划痕实验第31页
        1.3.11 细胞小室实验第31-32页
        1.3.12 统计学分析第32页
    1.4 结果第32-41页
        1.4.1 成功构建 4.1R-Flag与 4.1R-EGFP过表达质粒第32-33页
        1.4.2 成功构建 4.1R过表达及沉默稳定株(RT-PCR验证)第33-34页
        1.4.3 成功构建 4.1R过表达及沉默稳定株(WB验证)第34-35页
        1.4.4 基因 4.1R过表达与沉默对DC细胞形态的影响第35-36页
        1.4.5 基因 4.1R过表达与沉默对DC表面分子MHCII及表面共刺激分子CD80、CD86的影响第36-39页
        1.4.6 基因 4.1R过表达与沉默对DC细胞迁移的影响(细胞划痕实验)第39页
        1.4.7 基因 4.1R过表达与沉默对DC细胞迁移的影响(Transwell实验)第39-41页
    讨论第41-43页
    小结第43-45页
第二部分 探讨 4.1R在感染致膈肌无力模型中的表达及意义第45-57页
    2.1 前言第45页
    2.2 材料及试剂第45-46页
        2.2.1 主要材料和试剂第45-46页
        2.2.2 仪器设备第46页
        2.2.3 主要溶液的配制第46页
    2.3 方法第46-48页
        2.3.1 RT-PCR引物的设计与合成第46页
        2.3.2 mRNA的提取及反转录成cDNA第46页
        2.3.3 蛋白的提取及BCA测蛋白浓度第46页
        2.3.4 免疫印迹杂交第46页
        2.3.5 免疫组织化学染色第46-47页
        2.3.6 细胞免疫组化(DAB显色)第47页
        2.3.7 统计学分析方法第47-48页
    2.4 结果第48-53页
        2.4.1 4.1R在膈肌无力模型中mRNA水平的表达第48页
        2.4.2 蛋白质 4.1R在膈肌无力模型中的表达第48-49页
        2.4.3 蛋白质 4.1R明显促进了肌肉收缩蛋白的表达第49-50页
        2.4.5 沉默 4.1R后肌肉乙酰胆碱受体在C2C12细胞的表达第50-53页
    讨论第53-55页
    小结第55-57页
总结第57-59页
参考文献第59-61页
综述第61-73页
    参考文献第67-73页
致谢第73-75页
在读期间参加的学术会议及研究成果第75-76页

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