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棉花几丁质酶基因Ghchi6的抗蚜功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 绪论第12-17页
    1.1 植食性昆虫与寄主植物的相互作用第12-15页
        1.1.1 植物与昆虫的生存竞争第12-13页
        1.1.2 植物的抗虫性机制研究第13-14页
        1.1.3 蚜虫对植物的适应性第14页
        1.1.4 植物抗蚜基因的应用现状第14-15页
    1.2 植物几丁质酶基因研究进展第15-17页
        1.2.1 植物几丁质酶的分类第15页
        1.2.2 植物几丁质酶的功能第15-16页
        1.2.3 植物几丁质酶抗虫性研究现状第16-17页
第二章 Ghchi6的克隆与表达分析第17-35页
    2.1 实验材料第17-19页
        2.1.1 供试材料第17页
        2.1.2 菌种与载体第17页
        2.1.3 工具酶第17页
        2.1.4 常用试剂第17-18页
        2.1.5 常用培养基第18-19页
    2.2 实验器材第19-20页
    2.3 实验方法第20-26页
        2.3.1 棉花叶片总RNA的提取第20-21页
        2.3.2 棉花叶片总RNA的消化第21页
        2.3.3 棉花cDNA的合成第21-22页
        2.3.4 Ghchi6的克隆第22页
        2.3.5 凝胶电泳回收第22-23页
        2.3.6 pMD18T-Ghchi6克隆载体的构建第23-25页
        2.3.7 送样测序及序列分析第25-26页
        2.3.8 QuantitativeReal-timePCR分析棉花Ghchi6的表达第26页
    2.4 实验结果第26-33页
        2.4.1 Ghchi6基因的分离鉴定第26-28页
        2.4.2 Ghchi6的测序结果与序列分析第28-32页
        2.4.3 Ghchi6在棉花组织中的诱导表达第32-33页
    2.5 讨论第33-35页
第三章 Ghchi6转基因拟南芥的抗蚜性分析第35-45页
    3.1 实验材料第35-36页
        3.1.1 供试材料第35页
        3.1.2 供试载体和菌体第35-36页
    3.2 试剂与仪器第36页
        3.2.1 实验试剂第36页
        3.2.2 实验仪器第36页
    3.3 实验方法第36-41页
        3.3.1 pMD-Ghchi6表达载体的构建第36-37页
        3.3.2 拟南芥的遗传转化第37-38页
        3.3.3 转基因拟南芥阳性苗的鉴定第38-39页
        3.3.4 转基因拟南芥RNA的提取及cDNA的合成第39-40页
        3.3.5 转基因拟南芥株系中Ghchi6的表达量分析第40页
        3.3.6 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析第40-41页
        3.3.7 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析第41页
    3.4 结果分析第41-44页
        3.4.1 转基因拟南芥阳性苗的鉴定第41页
        3.4.2 Ghchi6在转基因拟南芥中的表达分析第41-42页
        3.4.3 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析第42-43页
        3.4.4 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析第43-44页
    3.5 讨论第44-45页
        3.5.1 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析第44页
        3.5.2 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析第44-45页
第四章 Ghchi6转基因拟南芥的抗蚜机理研究第45-53页
    4.1 实验材料第46页
    4.2 实验试剂与仪器第46页
    4.3 实验方法第46-48页
        4.3.1 可溶性糖含量的测定第46页
        4.3.2 几丁质酶活性的测定第46页
        4.3.3 多酚氧化酶活性的测定第46页
        4.3.4 超氧化物歧化酶活性的测定第46页
        4.3.5 苯丙氨酸解氨酶活性的测定第46-47页
        4.3.6 胼胝质含量的测定第47页
        4.3.7 防御途径相关基因的表达量分析第47-48页
    4.4 实验结果第48-51页
        4.4.1 Ghchi6在拟南芥中过量表达对可溶性糖含量的影响第48页
        4.4.2 Ghchi6在拟南芥中过量表达对几丁质酶活性的影响第48-49页
        4.4.3 Ghchi6在拟南芥中过量表达对多酚氧化酶活性的影响第49页
        4.4.4 Ghchi6在拟南芥中过量表达对超氧化物歧化酶活性的影响第49页
        4.4.5 Ghchi6在拟南芥中过量表达对苯丙氨酸解氨酶活性的影响第49-50页
        4.4.6 Ghchi6在拟南芥中过量表达对胼胝质含量的影响第50页
        4.4.7 Ghchi6转基因拟南芥防御响应相关基因表达量分析第50-51页
    4.5 讨论第51-53页
        4.5.1 转基因拟南芥中可溶性糖的含量对桃蚜抗性的影响第51-52页
        4.5.2 转基因拟南芥中四种酶的活性对桃蚜抗性的影响第52页
        4.5.3 转基因拟南芥中胼胝质的含量对桃蚜抗性的影响第52页
        4.5.4 转基因拟南芥中防御响应相关基因表达量对桃蚜抗性的影响第52-53页
第五章 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-65页
个人简介第65页

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