摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-17页 |
1.1 植食性昆虫与寄主植物的相互作用 | 第12-15页 |
1.1.1 植物与昆虫的生存竞争 | 第12-13页 |
1.1.2 植物的抗虫性机制研究 | 第13-14页 |
1.1.3 蚜虫对植物的适应性 | 第14页 |
1.1.4 植物抗蚜基因的应用现状 | 第14-15页 |
1.2 植物几丁质酶基因研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 植物几丁质酶的分类 | 第15页 |
1.2.2 植物几丁质酶的功能 | 第15-16页 |
1.2.3 植物几丁质酶抗虫性研究现状 | 第16-17页 |
第二章 Ghchi6的克隆与表达分析 | 第17-35页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 供试材料 | 第17页 |
2.1.2 菌种与载体 | 第17页 |
2.1.3 工具酶 | 第17页 |
2.1.4 常用试剂 | 第17-18页 |
2.1.5 常用培养基 | 第18-19页 |
2.2 实验器材 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-26页 |
2.3.1 棉花叶片总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.3.2 棉花叶片总RNA的消化 | 第21页 |
2.3.3 棉花cDNA的合成 | 第21-22页 |
2.3.4 Ghchi6的克隆 | 第22页 |
2.3.5 凝胶电泳回收 | 第22-23页 |
2.3.6 pMD18T-Ghchi6克隆载体的构建 | 第23-25页 |
2.3.7 送样测序及序列分析 | 第25-26页 |
2.3.8 QuantitativeReal-timePCR分析棉花Ghchi6的表达 | 第26页 |
2.4 实验结果 | 第26-33页 |
2.4.1 Ghchi6基因的分离鉴定 | 第26-28页 |
2.4.2 Ghchi6的测序结果与序列分析 | 第28-32页 |
2.4.3 Ghchi6在棉花组织中的诱导表达 | 第32-33页 |
2.5 讨论 | 第33-35页 |
第三章 Ghchi6转基因拟南芥的抗蚜性分析 | 第35-45页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.1.1 供试材料 | 第35页 |
3.1.2 供试载体和菌体 | 第35-36页 |
3.2 试剂与仪器 | 第36页 |
3.2.1 实验试剂 | 第36页 |
3.2.2 实验仪器 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-41页 |
3.3.1 pMD-Ghchi6表达载体的构建 | 第36-37页 |
3.3.2 拟南芥的遗传转化 | 第37-38页 |
3.3.3 转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第38-39页 |
3.3.4 转基因拟南芥RNA的提取及cDNA的合成 | 第39-40页 |
3.3.5 转基因拟南芥株系中Ghchi6的表达量分析 | 第40页 |
3.3.6 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第40-41页 |
3.3.7 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析 | 第41页 |
3.4 结果分析 | 第41-44页 |
3.4.1 转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第41页 |
3.4.2 Ghchi6在转基因拟南芥中的表达分析 | 第41-42页 |
3.4.3 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第42-43页 |
3.4.4 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析 | 第43-44页 |
3.5 讨论 | 第44-45页 |
3.5.1 转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第44页 |
3.5.2 转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析 | 第44-45页 |
第四章 Ghchi6转基因拟南芥的抗蚜机理研究 | 第45-53页 |
4.1 实验材料 | 第46页 |
4.2 实验试剂与仪器 | 第46页 |
4.3 实验方法 | 第46-48页 |
4.3.1 可溶性糖含量的测定 | 第46页 |
4.3.2 几丁质酶活性的测定 | 第46页 |
4.3.3 多酚氧化酶活性的测定 | 第46页 |
4.3.4 超氧化物歧化酶活性的测定 | 第46页 |
4.3.5 苯丙氨酸解氨酶活性的测定 | 第46-47页 |
4.3.6 胼胝质含量的测定 | 第47页 |
4.3.7 防御途径相关基因的表达量分析 | 第47-48页 |
4.4 实验结果 | 第48-51页 |
4.4.1 Ghchi6在拟南芥中过量表达对可溶性糖含量的影响 | 第48页 |
4.4.2 Ghchi6在拟南芥中过量表达对几丁质酶活性的影响 | 第48-49页 |
4.4.3 Ghchi6在拟南芥中过量表达对多酚氧化酶活性的影响 | 第49页 |
4.4.4 Ghchi6在拟南芥中过量表达对超氧化物歧化酶活性的影响 | 第49页 |
4.4.5 Ghchi6在拟南芥中过量表达对苯丙氨酸解氨酶活性的影响 | 第49-50页 |
4.4.6 Ghchi6在拟南芥中过量表达对胼胝质含量的影响 | 第50页 |
4.4.7 Ghchi6转基因拟南芥防御响应相关基因表达量分析 | 第50-51页 |
4.5 讨论 | 第51-53页 |
4.5.1 转基因拟南芥中可溶性糖的含量对桃蚜抗性的影响 | 第51-52页 |
4.5.2 转基因拟南芥中四种酶的活性对桃蚜抗性的影响 | 第52页 |
4.5.3 转基因拟南芥中胼胝质的含量对桃蚜抗性的影响 | 第52页 |
4.5.4 转基因拟南芥中防御响应相关基因表达量对桃蚜抗性的影响 | 第52-53页 |
第五章 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
个人简介 | 第65页 |