摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
前言 | 第11-16页 |
第一章 CircITGA7的鉴定及在结直肠癌中的表达 | 第16-33页 |
一、材料及方法 | 第16-24页 |
1. 材料 | 第16-18页 |
2. 方法 | 第18-24页 |
二、实验结果 | 第24-31页 |
1. CircITGA7是ITGA7第4外显子通过背向剪切形成的环状RNA | 第24-26页 |
2. RNA酶R消化及放线菌素D处理验证circITGA7的稳定性 | 第26-27页 |
3. CircITGA7在结直肠癌组织中表达降低 | 第27-28页 |
4. CircITGA7在结直肠癌组织中的表达具有潜在的诊断价值 | 第28-29页 |
5. CircITGA7在结直肠癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系 | 第29-30页 |
6. CircITGA7在结直肠癌细胞株中表达降低 | 第30-31页 |
三、结论 | 第31页 |
四、讨论 | 第31-33页 |
第二章 CircITGA7对结直肠癌细胞生长及转移的影响 | 第33-62页 |
一、材料及方法 | 第33-40页 |
1. 材料 | 第33-34页 |
2. 方法 | 第34-40页 |
二、实验结果 | 第40-60页 |
1. CircITGA7过表达载体的构建及验证 | 第40-42页 |
2. CircITGA7过表达慢病毒的制备及稳定过表达细胞株的筛选 | 第42-43页 |
3. CircITGA7过表达对结直肠癌细胞体外增殖及迁移的影响 | 第43-50页 |
4. CircITGA7过表达对结直肠癌细胞体内生长及转移的影响 | 第50-54页 |
5. CircITGA7干扰片段的筛选及验证 | 第54-55页 |
6. CircITGA7干扰慢病毒的制备及稳定干扰细胞株的筛选及验证 | 第55-56页 |
7. 干扰circITGA7表达对结直肠癌细胞生长及迁移的影响 | 第56-60页 |
三、结论 | 第60页 |
四、讨论 | 第60-62页 |
第三章 CircITGA7调节结直肠癌细胞生长及转移的机制 | 第62-91页 |
一、材料及方法 | 第62-75页 |
1. 材料 | 第62-65页 |
2. 方法 | 第65-75页 |
二、实验结果 | 第75-88页 |
1. RNA-seq及KEGG富集分析筛选circITGA7调控的信号通路 | 第75-78页 |
2. Western blot验证circITGA7对Ras信号通路的调控 | 第78-79页 |
3. FISH及RNA核浆分离技术检测circITGA7的亚细胞分布 | 第79-81页 |
4. CircITGA7通过结合miRNA-370-3p上调NF1表达从而抑制Ras通路 | 第81-87页 |
5. CircITGA7与蛋白结合的初步探索 | 第87-88页 |
三、结论 | 第88页 |
四、讨论 | 第88-91页 |
第四章 CircITGA7表达的上游调控机制的初步研究 | 第91-109页 |
一、材料及方法 | 第91-99页 |
1. 材料 | 第91-92页 |
2. 方法 | 第92-99页 |
二、实验结果 | 第99-106页 |
1. ITGA7在结直肠癌组织中表达下调 | 第99页 |
2. ITGA7基因的突变分析 | 第99-100页 |
3. ITGA7启动子区甲基化检测 | 第100-102页 |
4. 转录因子RREB1对ITGA7及circITGA7表达的影响 | 第102-105页 |
5. CircITGA7上下游内含子序列对circITGA7表达的影响 | 第105-106页 |
三、结论 | 第106-107页 |
四、讨论 | 第107-109页 |
全文讨论 | 第109-114页 |
参考文献 | 第114-126页 |
英文缩写词注解 | 第126-127页 |
攻读博士学位期间成果 | 第127-128页 |
致谢 | 第128-129页 |