| 序言 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 缩略词表 | 第19-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-26页 |
| 1 miRNA的生物结构 | 第21页 |
| 2 miRNA在恶性肿瘤中的作用及相关机制 | 第21-23页 |
| 2.1 miRNA与癌细胞增殖和凋亡 | 第22页 |
| 2.2 miRNA与肿瘤血管新生 | 第22-23页 |
| 2.3 miRNA与癌细胞侵袭和转移 | 第23页 |
| 3 miRNA与结直肠癌发生发展的关系 | 第23-24页 |
| 4 miRNA在结直肠癌中的应用 | 第24-25页 |
| 5 结语和展望 | 第25-26页 |
| 第2章 miRNA-141在人结直肠癌组织及人结直肠癌细胞系中的表达情况 | 第26-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 临床样本 | 第28-29页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR | 第29-32页 |
| 2.2.4 原位杂交 | 第32-33页 |
| 2.2.5 数据统计 | 第33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-35页 |
| 2.3.1 miR-141在结直肠癌组织中的表达水平 | 第33-34页 |
| 2.3.2 结直肠癌组织中miR-141的表达水平与患者临床病理学特征的关系 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 2.5 小结 | 第37-38页 |
| 第3章 miR-141对人结直肠癌细胞HT29生物学行为的作用 | 第38-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-47页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
| 3.2.2 构建miR-141稳定表达的HT29细胞株 | 第41-43页 |
| 3.2.3 实时荧光定量PCR | 第43-45页 |
| 3.2.4 细胞划痕实验 | 第45-46页 |
| 3.2.5 CCK-8 检测HT29细胞增殖能力 | 第46页 |
| 3.2.6 Transwell小室法检测HT29细胞侵袭能力 | 第46页 |
| 3.2.7 流式细胞术检测HT29细胞的凋亡水平 | 第46-47页 |
| 3.2.8 数据统计 | 第47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-53页 |
| 3.3.1 重组质粒的转染效率 | 第47-48页 |
| 3.3.2 重组过表达质粒对HT29细胞中miRNA-141 表达水平的作用 | 第48页 |
| 3.3.3 miR-141过表达对HT29细胞增殖的作用 | 第48-50页 |
| 3.3.4 miR-141过表达对HT29细胞迁移能力的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.5 miR-141过表达对HT29细胞侵袭能力的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.6 miR-141过表达对HT29细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 第4章 miR-141下游靶基因的预测及验证 | 第56-76页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第56-58页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-69页 |
| 4.2.1 miR-141的靶基因预测 | 第58页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第58-59页 |
| 4.2.3 构建miR-141稳定表达的HT29细胞株 | 第59-61页 |
| 4.2.4 荧光素酶报告基因实验 | 第61-62页 |
| 4.2.5 细胞转染 | 第62-63页 |
| 4.2.6 实时荧光定量PCR | 第63-65页 |
| 4.2.7 细胞划痕实验 | 第65页 |
| 4.2.8 CCK-8检测HT29细胞增殖能力 | 第65-66页 |
| 4.2.9 Transwell小室法检测HT29细胞侵袭能力 | 第66页 |
| 4.2.10 流式细胞术检测HT29细胞的凋亡水平 | 第66页 |
| 4.2.11 Western blot | 第66-69页 |
| 4.2.12 数据统计 | 第69页 |
| 4.3 结果 | 第69-72页 |
| 4.3.1 miRNA-141的靶基因预测 | 第69-70页 |
| 4.3.2 双荧光素酶报告基因实验 | 第70-71页 |
| 4.3.3 miR-141对HT29细胞中ZEB1表达的影响 | 第71-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-74页 |
| 4.5 小结 | 第74-76页 |
| 第5章 ZEB1在miR-141抑制结直肠癌细胞生物学行为中的作用及机制 | 第76-98页 |
| 5.1 实验材料 | 第76-78页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第76-78页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-88页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第78-79页 |
| 5.2.2 构建miR-141稳定表达的HT29细胞株 | 第79-81页 |
| 5.2.3 siRNA细胞转染 | 第81-82页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR | 第82-84页 |
| 5.2.5 细胞划痕实验 | 第84页 |
| 5.2.6 CCK-8检测HT29细胞增殖能力 | 第84-85页 |
| 5.2.7 Transwell小室法检测HT29细胞侵袭能力 | 第85页 |
| 5.2.8 流式细胞术检测HT29细胞的凋亡水平 | 第85页 |
| 5.2.9 Western blot | 第85-88页 |
| 5.2.10 数据统计 | 第88页 |
| 5.3 结果 | 第88-96页 |
| 5.3.1 siRNA干扰对HT29细胞中ZEB1表达水平的影响 | 第88-91页 |
| 5.3.2 ZEB1表达下调对miRNA-141抑制HT29细胞增殖的作用 | 第91-92页 |
| 5.3.3 ZEB1表达下调对miRNA-141抑制HT29细胞迁移的作用 | 第92-93页 |
| 5.3.4 ZEB1表达下调对miRNA-141抑制HT29细胞侵袭的作用 | 第93页 |
| 5.3.5 ZEB1表达下调对miRNA-141促进HT29细胞凋亡的作用 | 第93-94页 |
| 5.3.6 miR-141调控ZEB1下游信号通路分子 | 第94-96页 |
| 5.4 讨论 | 第96-97页 |
| 5.5 小结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 综述 | 第108-118页 |
| 参考文献 | 第114-118页 |
| 本文创新点 | 第118-120页 |
| 攻读博士期间所取得的科研成果 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
