缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
前言 | 第18-19页 |
文献回顾 | 第19-31页 |
1 肿瘤转移机制概述 | 第19-22页 |
1.1 上皮间充质转化(EMT)与肿瘤转移 | 第20-21页 |
1.2 肿瘤干细胞与肿瘤转移 | 第21-22页 |
2 胃癌转移的国内外研究进展 | 第22-24页 |
3 PAX 家族成员之 PAX3 | 第24-28页 |
3.1 PAX 家族在肿瘤中的作用 | 第24-25页 |
3.2 PAX 在消化系统肿瘤中的表达与功能 | 第25页 |
3.3 PAX3 的结构与功能 | 第25-27页 |
3.4 PAX3 与肿瘤 | 第27-28页 |
4 肿瘤转移 MICRORNA 调控之 MIR-206 | 第28-31页 |
第一部分 高通量筛选胃癌转移相关转录因子 | 第31-45页 |
引言 | 第31页 |
1 材料 | 第31-32页 |
1.1 主要试剂 | 第31-32页 |
1.2 主要仪器 | 第32页 |
2 方法 | 第32-37页 |
2.1 细胞培养 | 第32页 |
2.2 胃癌转移细胞模型的鉴定 | 第32-35页 |
2.3 高通量转录因子活性谱芯片筛选转移相关转录因子 | 第35-37页 |
2.4 统计学分析 | 第37页 |
3 结果 | 第37-42页 |
3.1 不同胃癌细胞亚系的体内外迁移、侵袭能力有显著差别 | 第37-39页 |
3.2 不同胃癌细胞亚系的细胞增殖能力无明显差别 | 第39-40页 |
3.3 芯片结果 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
第二部分 PAX3 促进胃癌细胞的侵袭和转移 | 第45-68页 |
引言 | 第45页 |
1 材料 | 第45-47页 |
1.1 主要试剂 | 第45-46页 |
1.2 主要仪器 | 第46-47页 |
2 方法 | 第47-53页 |
2.1 组织芯片 | 第47页 |
2.2 免疫组织化学检测 | 第47-48页 |
2.3 WESTERN BLOT 实验 | 第48-49页 |
2.4 慢病毒载体的构建与包装 | 第49-51页 |
2.5 慢病毒稳定转染细胞系的建立 | 第51页 |
2.6 表达萤火虫荧光素酶报告基因的慢病毒稳转细胞系的建立 | 第51页 |
2.7 TRANSWELL 迁移及侵袭实验 | 第51页 |
2.8 高内涵细胞分析系统检测细胞迁移 | 第51-52页 |
2.9 体内转移实验 | 第52页 |
2.10 细胞凋亡检测 | 第52-53页 |
2.11 统计学分析 | 第53页 |
3 结果 | 第53-65页 |
3.1 PAX3 在胃癌组织中的表达升高 | 第53-57页 |
3.2 PAX3 在高转移胃癌细胞系中表达升高 | 第57页 |
3.3 慢病毒转染效率检测 | 第57-59页 |
3.4 PAX3 促进胃癌细胞的迁移、侵袭 | 第59-61页 |
3.5 PAX3 促进胃癌细胞的体内转移能力 | 第61-64页 |
3.6 上调 PAX3 表达细胞的抗凋亡能力增强 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
第三部分 MIR-206 通过负性调控 PAX3 抑制胃癌细胞的侵袭和转移 | 第68-93页 |
引言 | 第68页 |
1 材料 | 第68-70页 |
1.1 主要试剂和材料 | 第68-69页 |
1.2 主要仪器 | 第69-70页 |
2 实验方法 | 第70-83页 |
2.1 胃癌组织取样 | 第70页 |
2.2 双荧光素报告基因实验 | 第70-79页 |
2.3 SYBR GREEN 实时定量荧光 PCR | 第79-82页 |
2.4 细胞转染 | 第82-83页 |
2.5 WESTERN BLOT | 第83页 |
2.6 TRANSWELL 体外迁移及侵袭实验 | 第83页 |
2.7 裸鼠体内转移实验 | 第83页 |
2.8 统计学分析 | 第83页 |
3 结果 | 第83-90页 |
3.1 MIR-206 是 PAX3 的上游调控分子 | 第83-87页 |
3.2 MIR-206 抑制胃癌细胞的侵袭和转移 | 第87-89页 |
3.3 MIR-206 通过负性调控 PAX3 从而抑制胃癌细胞的侵袭和转移 | 第89-90页 |
4 讨论 | 第90-93页 |
第四部分 PAX3 转录激活 MET 促进胃癌转移 | 第93-103页 |
引言 | 第93页 |
1 材料 | 第93-94页 |
1.1 主要试剂和材料 | 第93-94页 |
1.2 主要仪器 | 第94页 |
2 实验方法 | 第94-97页 |
2.1 双荧光素报告基因实验 | 第94-95页 |
2.2 实时定量 PCR | 第95页 |
2.3 WESTERN BLOT | 第95-96页 |
2.4 免疫荧光 | 第96页 |
2.5 免疫组化 | 第96-97页 |
2.6 统计学分析 | 第97页 |
3 结果 | 第97-102页 |
3.1 PAX3 转录激活 MET,促进 MET 的表达升高 | 第97-100页 |
3.2 胃癌组织中 PAX3 与 MET 表达正相关 | 第100-102页 |
4 讨论 | 第102-103页 |
小结 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-113页 |
个人简历和研究成果 | 第113-115页 |
致谢 | 第115-116页 |