中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 SAP大鼠肺组织中HIF-1α、MMP-9的表达 | 第18-43页 |
(二) 材料和方法 | 第18-28页 |
1. 材料 | 第18-20页 |
2. 方法 | 第20-21页 |
3. 血清 HIF-1α 检测: | 第21-22页 |
4. 血清 MMP-9 检测: | 第22-23页 |
5. 血清 TNF-α 检测:采用 ELISA 法,严格按试剂盒说明书操作。 | 第23页 |
6. 肺组织、胰腺组织 HE 染色及病理学评分: | 第23页 |
7. 采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 蛋白表达情况: | 第23-25页 |
8.应用逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 mRNA 表达情况: | 第25-27页 |
9.统计学处理:数据以 mean±SD 表示,应用 SPSS 20.0 统计软件分析,采用单因素方差分析,以 P<0.05 表示差异有统计学意义。 | 第27-28页 |
(三) 结果 | 第28-33页 |
1. 一般情况及大体解剖观察 | 第28页 |
2. 动脉血气、血清淀粉酶的变化 | 第28-29页 |
3. 各组中 HIF-1α、MMP-9 mRNA 的表达 | 第29页 |
4. Western-blot 方法检测各组中 HIF-1α、MMP-9 蛋白的表达 | 第29-30页 |
5. HIF-1α、MMP-9、TNF-α活性测定 | 第30-31页 |
6. 胰腺和肺组织病理学改变及病理评分测定 | 第31-33页 |
(四) 讨论 | 第33-36页 |
(五) 结论 | 第36-37页 |
(六) 参考文献 | 第37-43页 |
第二部分 HIF-1α、MMP-9 在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中作用的研究 | 第43-58页 |
(一) 材料和方法 | 第43-46页 |
1. 材料 | 第43-45页 |
2. 方法 | 第45页 |
3. 肺组织湿干比值测定 | 第45页 |
4.肺组织伊文思蓝检测 | 第45-46页 |
5.血清 HIF-1α 检测 | 第46页 |
6.血清 MMP-9 检测 | 第46页 |
7.血清 TNF-α 检测 | 第46页 |
8.肺组织、胰腺组织 HE 染色及病理学评分: | 第46页 |
9.RT-PCR 技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 mRNA 表达情况 | 第46页 |
10.采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 蛋白表达情况 | 第46页 |
11.统计学处理:数据以 mean±SD 表示,应用 SPSS 20.0 统计软件分析,采用单因素方差分析 | 第46页 |
(二) 结果 | 第46-52页 |
1. 动脉血气、血清淀粉酶和肺组织湿干比值的变化 | 第46-47页 |
2. 肺组织伊文思蓝含量测定 | 第47页 |
3. 各组中 HIF-1α、MMP-9 mRNA 的表达 | 第47-48页 |
4. Western-blot 方法检测各组中 HIF-1α、MMP-9 蛋白的表达 | 第48-49页 |
5. HIF-1α、MMP-9、TNF-α活性测定 | 第49-50页 |
6. 胰腺和肺组织病理学改变及病理评分测定 | 第50-52页 |
(三) 讨论 | 第52-55页 |
(四) 结论 | 第55-56页 |
(五) 参考文献 | 第56-58页 |
第三部分 大黄素通过下调 HIF-1α的表达抑制脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤 | 第58-81页 |
(一) 材料和方法 | 第58-68页 |
1. 材料 | 第58-61页 |
2. 方法 | 第61-62页 |
3. 大肠杆菌感受态的制备 | 第62页 |
4. 质粒转化 | 第62-63页 |
5. 质粒提取 | 第63页 |
6. 细胞转染 | 第63-64页 |
7. 应用 RT-PCR 技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 、IL-6、TNF-α mRNA 表达情况 | 第64-66页 |
8. 采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α 蛋白表达情况 | 第66-67页 |
9.细胞培养上清液中 TNF-α 检测 | 第67页 |
10. 细胞培养上清液中 IL-6 检测 | 第67-68页 |
11. 统计学方法 | 第68页 |
(二) 结果 | 第68-75页 |
1. MTT 法检测各组细胞生长抑制率 | 第68-69页 |
2. 各组中 IL-6、TNF-α活性 | 第69-70页 |
3. 各组中 HIF-1α、IL-6、TNF-αmRNA | 第70-71页 |
4. 各组中 HIF-1α的变化 | 第71-72页 |
5. HIF-1α干扰 A549 细胞模型的建立 | 第72-73页 |
6. 干扰 HIF-1α后 ELISA 法检测 LPS-sh-HIF-1α和 LPS-ns-sh-HIF-1αIL-6、TNF-α的活性 | 第73-74页 |
7. 大黄素和 HIF-1α协同作用效果 | 第74-75页 |
(三) 讨论 | 第75-77页 |
(四) 结论 | 第77-78页 |
(五) 参考文献 | 第78-81页 |
综述 | 第81-94页 |
参考文献 | 第87-94页 |
缩略语表 | 第94-95页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |