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HIF-1α、MMP-9在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中的作用及大黄素干预的实验研究

中文摘要第8-11页
英文摘要第11-14页
前言第15-18页
第一部分 SAP大鼠肺组织中HIF-1α、MMP-9的表达第18-43页
    (二) 材料和方法第18-28页
        1. 材料第18-20页
        2. 方法第20-21页
        3. 血清 HIF-1α 检测:第21-22页
        4. 血清 MMP-9 检测:第22-23页
        5. 血清 TNF-α 检测:采用 ELISA 法,严格按试剂盒说明书操作。第23页
        6. 肺组织、胰腺组织 HE 染色及病理学评分:第23页
        7. 采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 蛋白表达情况:第23-25页
        8.应用逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 mRNA 表达情况:第25-27页
        9.统计学处理:数据以 mean±SD 表示,应用 SPSS 20.0 统计软件分析,采用单因素方差分析,以 P<0.05 表示差异有统计学意义。第27-28页
    (三) 结果第28-33页
        1. 一般情况及大体解剖观察第28页
        2. 动脉血气、血清淀粉酶的变化第28-29页
        3. 各组中 HIF-1α、MMP-9 mRNA 的表达第29页
        4. Western-blot 方法检测各组中 HIF-1α、MMP-9 蛋白的表达第29-30页
        5. HIF-1α、MMP-9、TNF-α活性测定第30-31页
        6. 胰腺和肺组织病理学改变及病理评分测定第31-33页
    (四) 讨论第33-36页
    (五) 结论第36-37页
    (六) 参考文献第37-43页
第二部分 HIF-1α、MMP-9 在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中作用的研究第43-58页
    (一) 材料和方法第43-46页
        1. 材料第43-45页
        2. 方法第45页
        3. 肺组织湿干比值测定第45页
        4.肺组织伊文思蓝检测第45-46页
        5.血清 HIF-1α 检测第46页
        6.血清 MMP-9 检测第46页
        7.血清 TNF-α 检测第46页
        8.肺组织、胰腺组织 HE 染色及病理学评分:第46页
        9.RT-PCR 技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 mRNA 表达情况第46页
        10.采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 蛋白表达情况第46页
        11.统计学处理:数据以 mean±SD 表示,应用 SPSS 20.0 统计软件分析,采用单因素方差分析第46页
    (二) 结果第46-52页
        1. 动脉血气、血清淀粉酶和肺组织湿干比值的变化第46-47页
        2. 肺组织伊文思蓝含量测定第47页
        3. 各组中 HIF-1α、MMP-9 mRNA 的表达第47-48页
        4. Western-blot 方法检测各组中 HIF-1α、MMP-9 蛋白的表达第48-49页
        5. HIF-1α、MMP-9、TNF-α活性测定第49-50页
        6. 胰腺和肺组织病理学改变及病理评分测定第50-52页
    (三) 讨论第52-55页
    (四) 结论第55-56页
    (五) 参考文献第56-58页
第三部分 大黄素通过下调 HIF-1α的表达抑制脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤第58-81页
    (一) 材料和方法第58-68页
        1. 材料第58-61页
        2. 方法第61-62页
        3. 大肠杆菌感受态的制备第62页
        4. 质粒转化第62-63页
        5. 质粒提取第63页
        6. 细胞转染第63-64页
        7. 应用 RT-PCR 技术检测肺组织 HIF-1α、MMP-9 、IL-6、TNF-α mRNA 表达情况第64-66页
        8. 采用 Western blot 方法检测肺组织 HIF-1α 蛋白表达情况第66-67页
        9.细胞培养上清液中 TNF-α 检测第67页
        10. 细胞培养上清液中 IL-6 检测第67-68页
        11. 统计学方法第68页
    (二) 结果第68-75页
        1. MTT 法检测各组细胞生长抑制率第68-69页
        2. 各组中 IL-6、TNF-α活性第69-70页
        3. 各组中 HIF-1α、IL-6、TNF-αmRNA第70-71页
        4. 各组中 HIF-1α的变化第71-72页
        5. HIF-1α干扰 A549 细胞模型的建立第72-73页
        6. 干扰 HIF-1α后 ELISA 法检测 LPS-sh-HIF-1α和 LPS-ns-sh-HIF-1αIL-6、TNF-α的活性第73-74页
        7. 大黄素和 HIF-1α协同作用效果第74-75页
    (三) 讨论第75-77页
    (四) 结论第77-78页
    (五) 参考文献第78-81页
综述第81-94页
    参考文献第87-94页
缩略语表第94-95页
攻读学位期间发表文章情况第95-96页
致谢第96-97页

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