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应用斑马鱼研究影响神经管畸形PCP通路基因的功能

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一部分 前言第8-20页
 1 神经管畸形的研究进展第8-13页
   ·神经管畸形的概述第8页
   ·神经管的发生和闭合第8-11页
   ·神经管畸形的研究进展第11-13页
 2 斑马鱼概述第13-17页
   ·斑马鱼的生物学特征第13-15页
   ·斑马鱼的研究历史第15-16页
   ·斑马鱼及其它模式动物PCP通路研究进展第16-17页
 3 斑马鱼原位杂交技术介绍第17-19页
 4 生物信息学在序列分析中的应用第19页
 5 研究的目的和意义第19-20页
第二部分 材料与方法第20-44页
 1 实验材料第20-23页
   ·实验样品的种系、采集与饲养第20页
   ·主要实验仪器第20页
   ·实验试剂第20-23页
 2 实验方法第23-44页
   ·实验材料的收集第23-24页
   ·显微注射表达元件的构建(转基因质粒)第24-29页
   ·斑马鱼基因组DNA的制备第29-30页
   ·斑马鱼胚胎总RNA的抽提第30-32页
   ·用于PCR扩增的第一链cDNA合成第32-33页
   ·斑马鱼Dishevelled(Dvl1、Dvl2及Dvl3)基因cDNA扩增第33-37页
   ·体外转录地高辛标记RNA反义探针(Dvl1,Dvl2,Dvl3)第37-38页
   ·整胚原位杂交第38-42页
   ·观察和拍照第42-44页
第三部分 实验结果第44-56页
 1 斑马鱼Vang12基因生物信息学分析第44-47页
   ·斑马鱼Vang12基因生物信息学分析第44-47页
 2 重组真核表达载体的构建结果第47-50页
   ·人和斑马鱼的Vang12基因和pEGFP-C_1重组质粒的构建结果第47-48页
   ·人和斑马鱼的Vang12基因和PME-MCS重组质粒的构建结果第48-50页
 3 斑马鱼Dishevelled(Dvl1/Dvl2/Dvl3)基因在胚胎发育过程中的时空表达谱第50-53页
   ·斑马鱼胚胎总RNA的提取结果第50页
   ·RT-PCR扩增结果第50-51页
   ·原位杂交的地高辛探针的制备结果第51-52页
   ·原位杂交结果分析第52-53页
 4 Dvl1/Dvl2/Dvl3的生物信息学分析第53-56页
   ·斑马鱼Dvl1/Dvl2/Dvl3氨基酸序列分析结果第53-54页
   ·斑马鱼Dvl1/Dvl2/Dvl3蛋白保守结构位点的分析结果第54-56页
第四部分 讨论第56-58页
 1 斑马鱼Vang12基因生物信息学分析和转基因表达载体的构建第56页
 2 斑马鱼Dishevelled基因的生物信息学分析和表达谱的研究第56-58页
第五部分 总结第58-60页
参考文献第60-66页
致谢第66-68页
攻读学位期间的研究成果第68-69页

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