摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一部分 前言 | 第8-20页 |
1 神经管畸形的研究进展 | 第8-13页 |
·神经管畸形的概述 | 第8页 |
·神经管的发生和闭合 | 第8-11页 |
·神经管畸形的研究进展 | 第11-13页 |
2 斑马鱼概述 | 第13-17页 |
·斑马鱼的生物学特征 | 第13-15页 |
·斑马鱼的研究历史 | 第15-16页 |
·斑马鱼及其它模式动物PCP通路研究进展 | 第16-17页 |
3 斑马鱼原位杂交技术介绍 | 第17-19页 |
4 生物信息学在序列分析中的应用 | 第19页 |
5 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二部分 材料与方法 | 第20-44页 |
1 实验材料 | 第20-23页 |
·实验样品的种系、采集与饲养 | 第20页 |
·主要实验仪器 | 第20页 |
·实验试剂 | 第20-23页 |
2 实验方法 | 第23-44页 |
·实验材料的收集 | 第23-24页 |
·显微注射表达元件的构建(转基因质粒) | 第24-29页 |
·斑马鱼基因组DNA的制备 | 第29-30页 |
·斑马鱼胚胎总RNA的抽提 | 第30-32页 |
·用于PCR扩增的第一链cDNA合成 | 第32-33页 |
·斑马鱼Dishevelled(Dvl1、Dvl2及Dvl3)基因cDNA扩增 | 第33-37页 |
·体外转录地高辛标记RNA反义探针(Dvl1,Dvl2,Dvl3) | 第37-38页 |
·整胚原位杂交 | 第38-42页 |
·观察和拍照 | 第42-44页 |
第三部分 实验结果 | 第44-56页 |
1 斑马鱼Vang12基因生物信息学分析 | 第44-47页 |
·斑马鱼Vang12基因生物信息学分析 | 第44-47页 |
2 重组真核表达载体的构建结果 | 第47-50页 |
·人和斑马鱼的Vang12基因和pEGFP-C_1重组质粒的构建结果 | 第47-48页 |
·人和斑马鱼的Vang12基因和PME-MCS重组质粒的构建结果 | 第48-50页 |
3 斑马鱼Dishevelled(Dvl1/Dvl2/Dvl3)基因在胚胎发育过程中的时空表达谱 | 第50-53页 |
·斑马鱼胚胎总RNA的提取结果 | 第50页 |
·RT-PCR扩增结果 | 第50-51页 |
·原位杂交的地高辛探针的制备结果 | 第51-52页 |
·原位杂交结果分析 | 第52-53页 |
4 Dvl1/Dvl2/Dvl3的生物信息学分析 | 第53-56页 |
·斑马鱼Dvl1/Dvl2/Dvl3氨基酸序列分析结果 | 第53-54页 |
·斑马鱼Dvl1/Dvl2/Dvl3蛋白保守结构位点的分析结果 | 第54-56页 |
第四部分 讨论 | 第56-58页 |
1 斑马鱼Vang12基因生物信息学分析和转基因表达载体的构建 | 第56页 |
2 斑马鱼Dishevelled基因的生物信息学分析和表达谱的研究 | 第56-58页 |
第五部分 总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第68-69页 |