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β-半乳糖苷酶制备低聚半乳糖工艺开发及交联酶聚体的制备

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-26页
    1.1 功能性低聚糖第11-14页
        1.1.1 特性第12页
        1.1.2 物理和化学性质第12页
        1.1.3 生理功能第12-13页
        1.1.4 几种常见功能性低聚糖的性质及生产制备方法第13-14页
    1.2 低聚半乳糖第14-18页
        1.2.1 理化性质第14页
        1.2.2 生理功能第14-15页
        1.2.3 制备方法第15-16页
        1.2.4 纯化方法第16-18页
    1.3 β-半乳糖苷酶第18-24页
        1.3.1 催化机理第19-20页
        1.3.2 用途第20页
        1.3.3 固定化第20-24页
    1.4 本文研究内容第24-26页
第二章 β-半乳糖苷酶制备低聚半乳糖条件优化第26-34页
    2.1 引言第26页
    2.2 仪器与材料第26-27页
        2.2.1 实验仪器第26-27页
        2.2.2 实验材料第27页
    2.3 实验方法第27-29页
        2.3.1 低聚半乳糖的 HPLC 检测第27-28页
        2.3.2 pH 对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第28页
        2.3.3 温度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第28页
        2.3.4 反应时间对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第28页
        2.3.5 底物浓度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第28-29页
        2.3.6 加酶量对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第29页
    2.4 结果与讨论第29-33页
        2.4.1 pH 对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第29-30页
        2.4.2 温度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第30页
        2.4.3 反应时间对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第30-31页
        2.4.4 初始底物浓度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第31-32页
        2.4.5 加酶量对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第32-33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 金属离子对β-半乳糖苷酶酶活影响及应用第34-43页
    3.1 引言第34页
    3.2 仪器与材料第34-35页
        3.2.1 仪器第34-35页
        3.2.2 实验材料第35页
    3.3 实验方法第35-37页
        3.3.1 低聚半乳糖的 HPLC 检测第35页
        3.3.2 金属离子种类对β-半乳糖苷酶转糖苷酶活的影响第35页
        3.3.3 Na~+、NH_4~+、K~+浓度β-半乳糖苷酶酶活的影响第35页
        3.3.4 Na~+、NH_4~+、K~+对β-半乳糖苷酶二级结构的影响第35-36页
        3.3.5 Na~+、NH_4~+、K~+使β-半乳糖苷酶的变性和复性第36页
        3.3.6 在 K~+最适浓度下优化 GOS 的制备工艺条件第36-37页
    3.4 结果与讨论第37-42页
        3.4.1 金属离子种类对β-半乳糖苷酶转糖苷活性的影响第37页
        3.4.2 Na~+、NH_4~+、K~+浓度β-半乳糖苷酶酶活的影响第37-38页
        3.4.3 Na~+、NH_4~+、K~+对β-半乳糖苷酶二级结构的影响第38-39页
        3.4.4 Na~+、NH_4~+、K~+使β-半乳糖苷酶的变性和复性第39-40页
        3.4.5 K~+存在时,优化制备 GOS 的底物浓度和反应时间第40-41页
        3.4.6 K~+存在时,优化制备 GOS 的加酶量第41页
        3.4.7 金属离子对乳糖酶解体系作用结果对比第41-42页
    3.5 小结第42-43页
第四章 硼酸钠对β-半乳糖苷酶制备低聚半乳糖的影响第43-52页
    4.1 引言第43-44页
    4.2 材料和仪器第44页
        4.2.1 实验仪器第44页
        4.2.2 实验材料第44页
    4.3 实验方法第44-45页
        4.3.1 低聚半乳糖收率和乳糖转化率的测定第44页
        4.3.2 硼酸钠络合体系制备 GOS 的最适催化 pH第44页
        4.3.3 硼酸钠络合体系制备 GOS 的最适催化温度第44-45页
        4.3.4 反应时间和初始底物浓度对 GOS 产量的影响第45页
        4.3.5 硼酸钠浓度对 GOS 产量的影响第45页
        4.3.6 加酶量对 GOS 产量的影响第45页
    4.4 结果与讨论第45-50页
        4.4.1 硼酸钠络合体系的最适催化 pH第45-46页
        4.4.2 硼酸钠络合体系的最适催化温度第46-47页
        4.4.3 反应时间和乳糖浓度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第47-48页
        4.4.4 硼酸钠浓度对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第48-49页
        4.4.5 加酶量对乳糖转化率和 GOS 产量的影响第49页
        4.4.6 制备 GOS 过程中加入硼酸钠与未加体系对比第49-50页
    4.5 小结第50-52页
第五章 β-半乳糖苷酶交联酶聚体的制备及其性质研究第52-63页
    5.1 引言第52-53页
    5.2 实验材料和仪器第53页
        5.2.1 实验材料第53页
        5.2.2 实验仪器第53页
    5.3 实验方法第53-55页
        5.3.1 β-半乳糖苷酶酶活的测定第53页
        5.3.2 糖类含量的 HPLC 检测第53页
        5.3.3 β-半乳糖苷酶 CLEAs 的制备第53-54页
        5.3.4 β-半乳糖苷酶 CLEAs 的酶学性质第54-55页
        5.3.5 β-半乳糖苷酶 CLEAs 催化乳糖合成低聚半乳糖第55页
    5.4 结果与讨论第55-62页
        5.4.1 β-半乳糖苷酶 CLEAs 制备条件优化第55-59页
        5.4.2 β-半乳糖苷酶 CLEAs 的酶学性质研究第59-61页
        5.4.3 β-半乳糖苷酶 CLEAs 催化乳糖合成低聚半乳糖第61-62页
    5.5 小结第62-63页
第六章 β-半乳糖苷酶磁性交联酶聚体的制备及其性质研究第63-76页
    6.1 引言第63页
    6.2 实验材料和仪器第63-64页
        6.2.1 实验材料第63页
        6.2.2 实验仪器第63-64页
    6.3 实验方法第64-66页
        6.3.1 β-半乳糖苷酶酶活的测定第64页
        6.3.2 β-半乳糖苷酶磁性交联酶聚体的制备第64-65页
        6.3.3 β-半乳糖苷酶磁性 CLEAs 的酶学性质第65-66页
        6.3.4 β-半乳糖苷酶磁性 CLEAs 在乳糖体系中的重复利用性测定第66页
    6.4 结果与讨论第66-74页
        6.4.1 β-半乳糖苷酶磁性 CLEAs 制备条件优化第66-71页
        6.4.2 β-半乳糖苷酶磁性 CLEAs 的酶学性质第71-74页
        6.4.3 重复利用性第74页
    6.5 小结第74-76页
第七章 结论与展望第76-79页
    7.1 结论第76-77页
    7.2 创新点第77页
    7.3 展望第77-79页
参考文献第79-88页
发表论文和参加科研情况说明第88-89页
附录第89-92页
致谢第92页

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