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番木瓜体胚发生转录组分析和胚胎发育基因表达的研究

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词表第15-16页
第一章 综述第16-25页
    1.1 番木瓜概述第16-17页
    1.2 胚胎发育相关研究进展第17-20页
        1.2.1 胚胎发育的过程第17-18页
        1.2.2 胚胎发育相关基因的研究第18页
        1.2.3 EMB976基因的相关研究第18-20页
    1.3 体细胞胚发育的相关研究第20页
    1.4 TILLING技术的发展和应用第20-24页
        1.4.1 TILLING技术概述第20页
        1.4.2 TILLING技术发展第20-21页
        1.4.3 TILLING技术的流程第21-23页
        1.4.4 TILLING技术的应用第23-24页
    1.5 本研究的研究目的和意义第24-25页
        1.5.1 番木瓜产业化种植的便利性第24页
        1.5.2 为无籽番木瓜培育奠定基础第24-25页
第二章 番木瓜体细胞胚发生的形态学、组织细胞学观察及转录组分析第25-39页
    2.1 实验材料第25页
    2.2 仪器与试剂第25页
    2.3 实验方法第25-28页
        2.3.1 胚性愈伤组织的诱导第25页
        2.3.2 胚性愈伤组织的性别鉴定第25-26页
        2.3.3 体细胞胚发育的形态学观察第26页
        2.3.4 体细胞胚发育的组织学观察第26-27页
        2.3.5 体细胞胚的转录组分析第27-28页
    2.4 结果与分析第28-37页
        2.4.1 番木瓜体细胞胚性别鉴定第28-29页
        2.4.2 番木瓜体细胞胚发育过程观察第29-30页
        2.4.3 番木瓜体细胞胚发育过程组织学观察第30-31页
        2.4.4 转录组分析第31-37页
    2.5 讨论第37-39页
第三章 TILLING筛选番木瓜胚胎发育相关基因突变体第39-47页
    3.1 实验材料第39页
    3.2 实验仪器与试剂第39页
    3.3 实验方法第39-45页
        3.3.1 EMS诱变处理第39页
        3.3.2 幼苗移栽第39页
        3.3.3 基因组DNA提取第39-40页
        3.3.4 目的片段扩增第40-41页
        3.3.5 DNA建库第41-44页
        3.3.6 文库测序第44-45页
        3.3.7 数据分析第45页
        3.3.8 初步验证第45页
    3.4 实验结果与分析第45-46页
    3.5 讨论第46-47页
第四章 Cp49基因在拟南芥同源基因突变体中的表达与恢复第47-59页
    4.1 实验材料第47页
    4.2 仪器与试剂第47页
    4.3 实验方法第47-51页
        4.3.1 物种基因进化树构建第47页
        4.3.2 恢复载体构建第47-48页
        4.3.3 拟南芥突变体表型鉴定第48-49页
        4.3.4 浸花转化法转化拟南芥突变体植株第49-50页
        4.3.5 转基因拟南芥的鉴定第50-51页
    4.4 结果与分析第51-58页
        4.4.1 系统进化树构建第51-52页
        4.4.2 拟南芥恢复载体构建第52-53页
        4.4.3 拟南芥突变体鉴定第53-55页
        4.4.4 恢复载体转化苗的鉴定与表型观察第55-58页
    4.5 讨论第58-59页
第五章 Cp49基因在番木瓜中的敲除和沉默表达第59-69页
    5.1 实验材料第59页
    5.2 仪器与试剂第59页
    5.3 实验方法第59-64页
        5.3.1 番木瓜Cp49-XY~h基因编辑载体的构建第59-60页
        5.3.2 番木瓜Cp49-X基因编辑载体的构建第60-62页
        5.3.3 番木瓜RNAi载体构建第62页
        5.3.4 番木瓜Cp49基因在体胚发生过程中的表达第62-63页
        5.3.5 番木瓜愈伤诱导及转化第63-64页
    5.4 结果及分析第64-68页
        5.4.1 载体构建验证第64-65页
        5.4.2 Cp49基因在体胚发生过程中的表达第65-66页
        5.4.3 番木瓜愈伤组织的诱导第66-67页
        5.4.4 番木瓜遗传转化第67-68页
    5.5 讨论第68-69页
第六章 结论与展望第69-71页
    6.1 结论第69-70页
    6.2 展望第70-71页
参考文献第71-76页
附录第76-89页
致谢第89页

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