摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-12页 |
1 研究内容和技术路线 | 第12-14页 |
1.1 研究内容 | 第12-13页 |
1.1.1 构建胃癌相关 ceRNA(lncRNA-miRNA-mRNA)网络图 | 第12页 |
1.1.2 检测目的 lncRNA—FER1L4 在胃癌组织和细胞中的表达水平 | 第12页 |
1.1.3 双萤光素酶报告基因实验检测 miRNA 与靶标的相互作用 | 第12页 |
1.1.4 检测 miR-106a-5p 在正常和胃癌细胞中对靶标的抑制效果 | 第12页 |
1.1.5 沉默 FER1L4,检测 miR-106a-5p 和 PTEN 的表达水平 | 第12页 |
1.1.6 沉默 FER1L4,检测细胞周期和细胞增殖的变化 | 第12-13页 |
1.2 技术路线 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-27页 |
2.1 材料 | 第14-17页 |
2.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 组织标本 | 第16-17页 |
2.1.4 细胞株 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-27页 |
2.2.1 细胞培养和传代 | 第17页 |
2.2.2 细胞冻存 | 第17页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第17页 |
2.2.4 miRNA 类似物和 siRNA 合成 | 第17-18页 |
2.2.5 瞬时转染 | 第18页 |
2.2.6 总 RNA 提取 | 第18-19页 |
2.2.7 lncRNA 芯片检测表达谱 | 第19页 |
2.2.8 qRT-PCR | 第19-21页 |
2.2.9 Western blot 检测蛋白质表达水平 | 第21-24页 |
2.2.10 双萤光素酶报告基因实验 | 第24-25页 |
2.2.11 流式细胞术检测细胞周期 | 第25页 |
2.2.12 RTCA 检测细胞增殖 | 第25页 |
2.2.13 统计分析 | 第25-27页 |
3 实验结果 | 第27-45页 |
3.1 胃癌相关 ceRNA 网络 | 第27-29页 |
3.1.1 胃癌组织和癌旁组织中差异表达的 lncRNA | 第27-28页 |
3.1.2 miRcode 预测 lncRNA 和 miRNA 相互作用 | 第28页 |
3.1.3 经实验验证的 miRNA 靶标(mRNA) | 第28页 |
3.1.4 ceRNA 网络和回归分析 | 第28-29页 |
3.2 FER1L4 在胃癌组织和胃癌细胞中低表达 | 第29-34页 |
3.2.1 FER1L4 在胃癌组织中低表达 | 第29-33页 |
3.2.2 FER1L4 在胃癌细胞中低表达 | 第33-34页 |
3.3 FER1L4 与 miR-106a-5p 直接相互作用 | 第34-36页 |
3.4 miR-106a-5p 降低 FER1L4 和 PTEN 的表达水平 | 第36页 |
3.5 下调 FER1L4 对 miR-106a-5p 水平的影响 | 第36-40页 |
3.6 下调 FER1L4 对 PTEN 表达水平的影响 | 第40-41页 |
3.7 下调 FER1L4 对细胞周期的影响 | 第41-42页 |
3.8 下调 FER1L4 对细胞增殖的影响 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-50页 |
5 全文小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录A 缩略词 | 第54-55页 |
附录B 综述 | 第55-66页 |
参考文献 | 第63-66页 |
在学研究成果 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |