英文缩略词 | 第7-8页 |
第一部分 Sp1对非小细胞肺癌中BRK1基因转录调控的研究 | 第8-44页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 导论 | 第10-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-32页 |
1. 实验材料与主要试剂 | 第14-18页 |
1.1. 菌株和细胞系 | 第14页 |
1.2. 质粒载体 | 第14-15页 |
1.3. 抗体 | 第15页 |
1.4. 主要试剂 | 第15-18页 |
2. 主要溶液配制 | 第18-20页 |
3. 主要仪器 | 第20-21页 |
4. 实验方法 | 第21-32页 |
4.1. 细胞培养 | 第21页 |
4.2. 质粒定点突变 | 第21-22页 |
4.3. Sp1真核表达载体构建 | 第22-24页 |
4.4. 双荧光素酶报告基因实验 | 第24页 |
4.5. siRNA基因沉默实验 | 第24-25页 |
4.6. 质粒大量提取 | 第25页 |
4.7. RNA提取和实时定量PCR | 第25-26页 |
4.8. 蛋白提取和定量 | 第26-27页 |
4.9. 免疫印迹实验Western Blot | 第27-28页 |
4.10. 电泳迁移率实验EMSA | 第28-29页 |
4.11. 染色质免疫共沉淀ChIP | 第29-31页 |
4.12. 统计学分析 | 第31-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-39页 |
1. Sp1预测结合位点突变抑制S831片段转录活性 | 第32-33页 |
2. Mithramycin A抑制S831片段转录活性 | 第33-34页 |
3. Sp蛋白家族Sp1、Sp3和Sp4基因沉默对BRK1表达的影响 | 第34页 |
4. Sp1瞬时外源过表达对BRK1表达的影响 | 第34-37页 |
5. Sp1能够结合BRK1基因上游序列 | 第37-39页 |
第四章 讨论 | 第39-43页 |
第五章 小结 | 第43-44页 |
第二部分 肺癌相关基因SMC4相互作用蛋白的研究 | 第44-71页 |
摘要 | 第44-45页 |
Abstract | 第45-46页 |
第一章 导论 | 第46-50页 |
第二章 材料与方法 | 第50-56页 |
1. 实验材料与主要试剂 | 第50-51页 |
1.1. 抗体 | 第50页 |
1.2. 免疫细胞荧光试剂 | 第50页 |
1.3. 蛋白质免疫共沉淀试剂 | 第50-51页 |
1.4. 其他试剂 | 第51页 |
2. 主要溶液配制 | 第51-52页 |
3. 主要仪器 | 第52页 |
4. 实验方法 | 第52-56页 |
4.1. 细胞培养 | 第52页 |
4.2. 免疫细胞荧光染色 | 第52页 |
4.3. 免疫共沉淀Co-IP | 第52-53页 |
4.4. SDS-PAGE与考马斯亮蓝染色 | 第53页 |
4.5. LC-MS/MS质谱分析 | 第53-55页 |
4.6. 表达谱芯片数据统计分析 | 第55-56页 |
第三章 实验结果 | 第56-65页 |
1. SMC4在细胞中的定位 | 第56-57页 |
2. SMC4免疫共沉淀和质谱分析结果 | 第57-61页 |
2.1. SMC4免疫共沉淀的差异蛋白 | 第57页 |
2.2. LC-MS/MS鉴定SMC4相互作用蛋白 | 第57-61页 |
3. SMC4相互作用蛋白的表达谱芯片数据分析 | 第61-64页 |
4. Co-IP-Western Blot验证SMC4与MAP4和IQGAP1的结合作用 | 第64-65页 |
第四章 讨论 | 第65-70页 |
第五章 小结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
文献综述 | 第77-82页 |
参考文献 | 第80-82页 |
课题资助基金 | 第82-83页 |
已发表论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
个人简历 | 第86页 |