| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1 XHF 的检测、治疗和疫苗研究概况 | 第12-16页 |
| 1.1 XHF 的检测 | 第12-14页 |
| 1.2 XHF 的治疗 | 第14-15页 |
| 1.2.1 一般治疗措施 | 第14页 |
| 1.2.2 利巴韦林 | 第14页 |
| 1.2.3 抗体治疗 | 第14-15页 |
| 1.2.4 其他抗病毒治疗 | 第15页 |
| 1.3 XHF 的疫苗 | 第15-16页 |
| 2 XHF 核蛋白结构及功能特点 | 第16-17页 |
| 3 XHF 糖蛋白结构及功能特点 | 第17-19页 |
| 4 M 基因进化树及遗传特异性 | 第19-21页 |
| 5 病毒抗原表位的基本研究方法 | 第21-23页 |
| 5.1 抗原表位的分类 | 第21页 |
| 5.2 病毒抗原表位的预测方法 | 第21-22页 |
| 5.3 抗原肽的合成方法 | 第22页 |
| 5.4 病毒抗原表位的筛选、鉴定方法 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-29页 |
| 第二章 新疆出血热病毒核蛋白优势表位抗原的筛选 | 第29-41页 |
| 摘要 | 第29页 |
| 前言 | 第29-30页 |
| 1 材料和试剂 | 第30-32页 |
| 1.1 材料 | 第30-31页 |
| 1.2 试剂 | 第31-32页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第31页 |
| 1.2.2 主要溶液配方 | 第31-32页 |
| 2 研究方法 | 第32-34页 |
| 2.1 XHFV NP 蛋白及其截短蛋白的的诱导表达 | 第32页 |
| 2.2 原核表达融合蛋白的纯化 | 第32-34页 |
| 2.2.1 His 标签蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.2 GST 标签蛋白的纯化 | 第33页 |
| 2.2.3 PAGE 胶蛋白微量回收 | 第33页 |
| 2.2.4 Bradford 法测量蛋白浓度 | 第33-34页 |
| 2.3 间接 ELISA 法筛选优势抗原表位 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-39页 |
| 3.1 重组蛋白的诱导及纯化 | 第34-35页 |
| 3.2 间接 ELISA 实验结果 | 第35-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-41页 |
| 第三章 重组新疆出血热病毒 S 和 M 基因疫苗的构建及免疫效果 | 第41-59页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 引言 | 第41-42页 |
| 1 材料和试剂 | 第42-45页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.2 试剂 | 第43-45页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第43页 |
| 1.2.2 培养基和主要溶液配方 | 第43-45页 |
| 2 方法 | 第45-52页 |
| 2.1 病毒总 RNA 的提取 | 第45-46页 |
| 2.2 DNA 疫苗的构建与鉴定 | 第46-49页 |
| 2.2.1 S, M 基因的克隆与鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.2 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第47页 |
| 2.2.3 重组真核质粒的转化和筛选： | 第47-48页 |
| 2.2.4 重组质粒的大量提取及纯化 | 第48-49页 |
| 2.3 小鼠免疫 | 第49-50页 |
| 2.4 MTT 法检测淋巴细胞增殖 | 第50页 |
| 2.5 细胞因子 IFN-γ,IL-4 水平的检测 | 第50-51页 |
| 2.6 ELISA 法检测小鼠血清中抗体效价 | 第51页 |
| 2.7 Western Blotting 检测 | 第51-52页 |
| 2.8 统计学分析 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-56页 |
| 3.1 重组质粒的酶切及 PCR 鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2 脾 T 淋巴细胞增殖反应分析 | 第53-54页 |
| 3.3 细胞因子水平的检测结果 | 第54-55页 |
| 3.4 小鼠血清的抗体水平检测结果 | 第55-56页 |
| 3.5 Western blot 分析抗体的特异性 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第四章 新疆出血热病毒 M 基因编码蛋白分段表达及其抗原性的初步研究 | 第59-81页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 引言 | 第59-60页 |
| 1 材料和试剂 | 第60-61页 |
| 1.1 材料 | 第60-61页 |
| 1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 2 研究方法 | 第61-67页 |
| 2.1 Gc1 和 Gc2 蛋白的表达，纯化及多克隆抗体的制备 | 第61-63页 |
| 2.1.1 原核表达载体的构建 | 第61页 |
| 2.1.2 r-Gc1，r-Gc2 融合蛋白的优化表达及纯化 | 第61-62页 |
| 2.1.3 兔抗 rGc1，rGc2 多克隆抗体的制备 | 第62页 |
| 2.1.4 多克隆抗体效价的测定 | 第62-63页 |
| 2.2 XHFV Gc 蛋白生物信息学分析 | 第63页 |
| 2.3 改良生物合成肽策略 | 第63-64页 |
| 2.4 XHFV Gc 蛋白 16 肽融合蛋白表达载体的构建 | 第64-66页 |
| 2.5 XHFV Gc 蛋白 16 肽融合蛋白的表达 | 第66-67页 |
| 2.6 Western blot 检测 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-77页 |
| 3.1 Gc 蛋白的生物信息学分析 | 第67-68页 |
| 3.2 pET-28a-Gc1 及 pET-28a-Gc2 原核表达载体的构建和鉴定 | 第68页 |
| 3.3 r-Gc1，r-Gc2 融合蛋白的优化表达及纯化 | 第68-71页 |
| 3.4 抗 rGc1，rGc2 多克隆抗体的滴度测定 | 第71-72页 |
| 3.5 Western blot 分析抗体的特异性 | 第72-73页 |
| 3.6 16 肽的诱导表达 | 第73页 |
| 3.7 Western blot 分析 16 肽的抗原性 | 第73-74页 |
| 3.8 16 肽抗原表位的保守性分析 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 个人简介 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
