摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第9-16页 |
1.1 CYP450 的概况 | 第9-13页 |
1.1.1 CYP450 的分布 | 第9-10页 |
1.1.2 CYP450 的结构 | 第10-11页 |
1.1.3 CYP450 的命名 | 第11页 |
1.1.4 CYP450 的功能 | 第11-12页 |
1.1.5 CYP450 的研究方向 | 第12-13页 |
1.2 我国常用水产药物使用状况 | 第13-14页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第14-16页 |
第二章 池蝶蚌 CYP450 基因的克隆及生物信息学分析 | 第16-35页 |
摘要 | 第16页 |
2.1 实验材料和方法 | 第16-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第16页 |
2.1.2 总 RNA 的提取 | 第16-17页 |
2.1.3 RNA 质量的检测 | 第17页 |
2.1.4 SMART cDNA 的合成 | 第17-18页 |
2.1.5 Hs-CYP450 基因中间部分片段的获得 | 第18-19页 |
2.1.6 RACE PCR 获得 Hs-CYP450 基因的全长 | 第19-20页 |
2.1.7 PCR 产物检测 | 第20页 |
2.1.8 目的片段的回收、克隆与测序 | 第20-22页 |
2.2 实验结果及序列生物信息学分析 | 第22-32页 |
2.2.1 RNA 的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 中间片段、5'-RACE 和 3'-RACE PCR 产物 | 第23页 |
2.2.3 Hs-CYP450 基因的全长拼接及分析 | 第23-25页 |
2.2.4 Hs-CYP450 蛋白氨基酸组成分析 | 第25-26页 |
2.2.5 Hs-CYP450 蛋白亲水性与疏水性分析 | 第26-27页 |
2.2.6 Hs-CYP450 蛋白的结构域分析 | 第27-28页 |
2.2.7 Hs-CYP450 蛋白二级结构预测及分析 | 第28-30页 |
2.2.8 Hs-CYP450 蛋白的三级结构预测 | 第30-31页 |
2.2.9 Hs-CYP450 基因系统进化分析 | 第31-32页 |
2.3 讨论 | 第32-35页 |
第三章 池蝶蚌细胞色素 P450 酶相关功能研究 | 第35-47页 |
摘要 | 第35页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.2 Hs-CYP450 蛋白的组织差异性表达 | 第36-39页 |
3.2.1 不同组织的 RNA 提取 | 第36页 |
3.2.2 荧光定量 PCR 引物设计 | 第36页 |
3.2.3 荧光定量 PCR | 第36-37页 |
3.2.4 Hs-CYP450 蛋白的组织差异性表达结果 | 第37-39页 |
3.3 四种水产药物对池蝶蚌 Hs-CYP450 基因表达影响 | 第39-44页 |
3.3.1 实验材料 | 第39页 |
3.3.2 实验药品 | 第39页 |
3.3.3 实验方法 | 第39-40页 |
3.3.4 实验结果 | 第40-44页 |
3.4 讨论 | 第44-47页 |
第四章 结论与展望 | 第47-50页 |
4.1 结论 | 第47-48页 |
4.2 展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录A:主要仪器设备 | 第56-57页 |
附录B:主要试剂及试剂盒 | 第57-58页 |
附录C:相关软件 | 第58-59页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第59页 |