摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
符号说明 | 第13-14页 |
引言 | 第14-17页 |
1 材料与方法 | 第17-34页 |
1.1 主要仪器及试剂 | 第17-19页 |
1.2 hUC-MSCs的来源 | 第19页 |
1.3 细胞培养及转染效率测定 | 第19-24页 |
1.3.1 hUC-MSCs的分离培养 | 第19-20页 |
1.3.2 干细胞的冻存与复苏 | 第20页 |
1.3.3 干细胞的鉴定 | 第20-21页 |
1.3.4 siRNA-HDAC1转染细胞 | 第21页 |
1.3.5 qRT-PCR法检测HDAC1mRNA表达 | 第21-23页 |
1.3.6 Westernblot检测HDAC1蛋白表达 | 第23-24页 |
1.4 脑损伤模型的建立 | 第24-25页 |
1.5 动物分组 | 第25页 |
1.6 LY294002侧脑室注射 | 第25-26页 |
1.7 体重检测和mNSS评分 | 第26页 |
1.8 行为学功能检测 | 第26-27页 |
1.8.1 悬尾实验(Tailsuspensiontest,TST) | 第26页 |
1.8.2 强迫游泳实验(Forcedswimtest,FST) | 第26页 |
1.8.3 糖水偏好实验(Sucrosepreferencetest,SPT) | 第26-27页 |
1.9 血脑屏障测定 | 第27页 |
1.10 hUC-MSCs迁移验证 | 第27-29页 |
1.11 组织冰冻切片制备 | 第29页 |
1.12 CV染色 | 第29-30页 |
1.13 Luxolfastblue染色 | 第30页 |
1.14 PI染色 | 第30页 |
1.15 HEt染色 | 第30页 |
1.16 Elisa检测 | 第30-31页 |
1.17 qRT-PCR检测脑内神经相关mRNA的表达 | 第31-32页 |
1.18 免疫组织荧光化学 | 第32页 |
1.19 WesternBlot | 第32-33页 |
1.20 统计学处理 | 第33-34页 |
2 结果 | 第34-44页 |
2.1 不同时期hUC-MSCs的形态学观察和表面抗原鉴定 | 第34-35页 |
2.2 shRNA慢病毒shRNA-HDAC1转染hUC-MSCs及效率鉴定 | 第35页 |
2.3 MSC迁移验证 | 第35-36页 |
2.4 MSC-siHDAC1移植减少大脑损伤体积、BBB开放程度,促进神经功能恢复 | 第36-38页 |
2.5 MSC-siHDAC1能阻止TBI后神经元丢失,退行性病变和细胞凋亡 | 第38-39页 |
2.6 MSC-siHDAC1能减轻TBI后白质损伤 | 第39-40页 |
2.7 MSC-siHDAC1减轻损伤部位的氧化应激反应和炎症反应 | 第40页 |
2.8 MSC-siHDAC1促进SGZ区神经干细胞增殖和神经细胞再生 | 第40-42页 |
2.9 MSC-siHDAC1通过激活PTEN/PI3K/AKT通路发挥神经保护作用 | 第42-43页 |
2.10 LY294002 抑制 PI3K 通路减轻 MSC-si HDAC1 的神经保护作用 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
综述 学习记忆中的表观遗传调控和染色质重塑 | 第52-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
个人简历、研究生期间发表文章 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |