中英文缩写词对照 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1.前言 | 第16-19页 |
2.实验材料 | 第19-22页 |
2.1 实验动物和细胞 | 第19-20页 |
2.2 药品与试剂 | 第20页 |
2.3 仪器与设备 | 第20-22页 |
3.实验方法 | 第22-36页 |
3.1 动物实验 | 第22-23页 |
3.1.1 移植瘤模型的建立 | 第22页 |
3.1.2 移植瘤组织的HE染色和免疫组化 | 第22-23页 |
3.2 细胞培养 | 第23-24页 |
3.2.1 SMMC-7721细胞的复苏与培养 | 第23页 |
3.2.2 SMMC-7721细胞的传代 | 第23-24页 |
3.3 细胞转染实验 | 第24-25页 |
3.4 荧光定量Real-timePCR实验 | 第25-28页 |
3.4.1 组织/细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
3.4.2 RNA定量 | 第26页 |
3.4.3 CDNA的合成 | 第26-28页 |
3.5 Westernblot实验 | 第28-32页 |
3.5.1 组织/细胞总蛋白的提取 | 第28页 |
3.5.2 BCA测定总蛋白 | 第28-29页 |
3.5.3 Westernblot实验用液的配制 | 第29-31页 |
3.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第31-32页 |
3.5.5 转膜 | 第32页 |
3.5.6 蛋白免疫印迹 | 第32页 |
3.6 四甲基偶氮唑盐比色法(MTT) | 第32-33页 |
3.7 平板克隆 | 第33页 |
3.8 划痕实验 | 第33-34页 |
3.9 细胞凋亡 | 第34页 |
3.10 计算机模拟对接 | 第34-35页 |
3.11 CD光谱 | 第35页 |
3.12 统计学分析 | 第35-36页 |
4.实验结果 | 第36-56页 |
4.1 HERC5和ISG15在HCC中的表达 | 第36-38页 |
4.1.1 HERC5和ISG15在人肝癌组织中的表达 | 第36-37页 |
4.1.2 HERC5和ISG15在HepG2和SMMC-7721中的表达 | 第37-38页 |
4.2 HERC5对HepG2和SMMC-7721细胞功能的影响 | 第38-41页 |
4.2.1 HERC5对细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
4.2.2 HERC5对单细胞克隆能力的影响 | 第39-40页 |
4.2.3 沉默HERC5对细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
4.3 HERC5与p53及其通路蛋白的关系 | 第41-43页 |
4.3.1 沉默HERC5对p53通路的影响 | 第41-42页 |
4.3.2 过表达HERC5对p53通路的影响 | 第42-43页 |
4.4 HZ-6d稳定结合于HERC5富G序列 | 第43-44页 |
4.5 HZ-6d体内抗肿瘤活性的检测 | 第44-47页 |
4.5.1 HZ-6d对移植瘤重量和体积的影响 | 第44-46页 |
4.5.2 HE染色观察移植瘤组织病理学改变 | 第46页 |
4.5.3 HZ-6d能够减少移植瘤组织中HERC5和ISG15的表达 | 第46-47页 |
4.6 HZ-6d体外抗肿瘤活性的检测 | 第47-52页 |
4.6.1 HZ-6d对细胞增殖能力的影响 | 第47-48页 |
4.6.2 HZ-6d对单细胞克隆形成的影响 | 第48-49页 |
4.6.3 HZ-6d 对细胞迁移能力的影响 | 第49-50页 |
4.6.4 HZ-6d对细胞凋亡的影响 | 第50-51页 |
4.6.5 HZ-6d减少细胞中HERC5和ISG15的表达 | 第51-52页 |
4.7 HZ-6d对p53及其通路蛋白的影响 | 第52-53页 |
4.8 HZ-6d对p53mRNA的影响 | 第53-54页 |
4.9 HZ-6d抗肿瘤机制的探讨 | 第54-56页 |
5.讨论 | 第56-59页 |
6.结论 | 第59页 |
7.参考文献 | 第59-66页 |
附录 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
综述 | 第68-100页 |
References | 第85-100页 |