糠秕马拉色菌与表皮葡萄球菌相互作用研究

摘要	第4-9页
Abstract	第9-15页
英文缩略语	第16-22页
第一部分糠秕马拉色菌上清液对表皮葡萄球菌增殖、生物膜形成的影响	第22-35页
1 前言	第22-24页
2 材料与方法	第24-29页
2.1 实验材料	第24-26页
2.1.1 实验对象	第24页
2.1.2 培养基	第24-25页
2.1.3 实验试剂	第25页
2.1.4 实验仪器	第25-26页
2.2 实验方法	第26-29页
2.2.1 糠秕马拉色菌上清液制备	第26页
2.2.2 表皮葡萄球菌(ATCC12228~(TM))生长曲线的测定	第26-27页
2.2.3 流式细胞仪计数表皮葡萄球菌数量(ATCC12228~(TM))	第27-28页
2.2.4 表皮葡萄球菌(ATCC35984~(TM))生物膜结晶紫半定量检测	第28页
2.2.5 共聚焦显微镜观察表皮葡萄球菌(ATCC35984~(TM))生物膜	第28页
2.2.6 统计学分析	第28-29页
3 结果	第29-32页
3.1 糠秕马拉色菌上清液促进表皮葡萄球菌增殖	第29-30页
3.2 糠秕马拉色菌上清液促进表皮葡萄球菌(ATCC35984~(TM))生物膜形成	第30-32页
4 讨论	第32-34页
5 结论	第34-35页
第二部分糠秕马拉色菌上清液及受糠秕马拉色菌影响的表皮葡萄球菌(ATCC12228~(TM))蛋白质组学分析	第35-60页
1 前言	第35-37页
2 材料和方法	第37-46页
2.1 实验材料	第37-38页
2.1.1 实验对象	第37页
2.1.2 材料与试剂	第37-38页
2.1.2 实验仪器	第38页
2.2 实验方法	第38-46页
2.2.1 糠秕马拉色菌上清液制备	第38页
2.2.2 糠秕马拉色菌上清液蛋白质组学分析	第38-39页
2.2.3 制备表皮葡萄球菌菌悬液	第39页
2.2.4 表皮葡萄球菌(ATCC12228~(TM))差异蛋白组学分析	第39-42页
2.2.5 平行反应监测法验证目标蛋白	第42-43页
2.2.6 PCR验证	第43-45页
2.2.7 数据分析	第45-46页
3 结果	第46-57页
3.1 糠秕马拉色菌上清液中蛋白质分析	第46-50页
3.2 表皮葡萄球菌(ATCC12228~(TM))差异蛋白分析	第50-55页
3.3 PRM验证差异表达的蛋白质	第55-56页
3.4 Real-timePCR在mRNA水平观察差异蛋白表达水平	第56-57页
4 讨论	第57-59页
5 结论	第59-60页
第三部分 pH对表皮葡萄球菌增殖及生物膜形成的影响及糠秕马拉色菌升高培养基pH的机制	第60-77页
1 前言	第60-61页
2 材料与方法	第61-67页
2.1 实验材料	第61-62页
2.1.1 实验对象	第61页
2.1.2 培养基	第61页
2.1.3 实验试剂	第61页
2.1.4 实验仪器	第61-62页
2.2 实验方法	第62-67页
2.2.1 糠秕马拉色菌上清液制备	第62页
2.2.2 pH检测	第62页
2.2.3 生长曲线(ATCC12228~(TM))	第62-64页
2.2.4 流式细胞仪计数表皮葡萄球菌数量(ATCC12228~(TM))	第64页
2.2.5 结晶紫半定量法检测生物膜	第64页
2.2.6 荧光显微镜观察生物膜	第64-65页
2.2.7 脲酶检测	第65页
2.2.8 NH_4~+离子检测	第65页
2.2.9 透射电镜观察不同脂质培养条件对糠秕马拉色菌形态的影响	第65-66页
2.2.10 脲酶活性检测	第66页
2.2.11 数据分析	第66-67页
3 结果	第67-74页
3.1 pH值检测	第67页
3.2 pH值对表皮葡萄球菌(ATCC12228~(TM))增殖的影响	第67-69页
3.3 pH值对表皮葡萄球菌(ATCC35984~(TM))生物膜形成的影响	第69-70页
3.4 糠秕马拉色菌通过脲酶升高pH	第70-71页
3.5 脂质条件对糠秕马拉色菌的形态及脲酶活性的影响	第71-74页
4 讨论	第74-76页
5 结论	第76-77页
第四部分葡萄球菌脂磷壁酸通过NF-κB通路抑制糠秕马拉色菌诱导的细胞因子的表达	第77-93页
1 前言	第77-79页
2 材料与方法	第79-86页
2.1 实验材料	第79-81页
2.1.1 实验对象	第79页
2.1.2 实验试剂	第79-80页
2.1.3 实验仪器	第80-81页
2.2 实验方法	第81-86页
2.2.1 细胞培养	第81页
2.2.2 糠秕马拉色菌与HaCaT细胞共培养	第81页
2.2.3 MTS 检测细胞活性	第81-82页
2.2.4 RNA的提取	第82页
2.2.5 反转录合成cDNA	第82-83页
2.2.6 实时荧光定量PCR	第83-84页
2.2.7 ELISA	第84页
2.2.8 蛋白印迹	第84-85页
2.2.9 数据分析	第85-86页
3 结果	第86-90页
3.1 糠秕马拉色菌及脂磷壁酸对HaCaT细胞活性的影响	第86页
3.2 糠秕马拉色菌对HaCaT细胞炎症因子表达的影响	第86-87页
3.3 脂磷壁酸抑制糠秕马拉色菌诱导的IL-6及IL-1βmRNA表达	第87-88页
3.4 糠秕马拉色菌和脂磷壁酸对HaCaT细胞上清中IL-6及IL-1β分泌的影响	第88页
3.5 脂磷壁酸通过NF-κB通路抑制糠秕马拉色菌诱导的细胞因子的表达	第88-90页
4 讨论	第90-92页
5 结论	第92-93页
本研究创新性的自我评价	第93-94页
参考文献	第94-101页
综述	第101-115页
参考文献	第108-115页
攻读学位期间取得的研究成果	第115-116页
致谢	第116-117页
个人简历	第117页