ABSTRACT | 第8页 |
摘要 | 第9-18页 |
Chapter one: Review of Literature | 第18-29页 |
1.1 Introduction | 第18-19页 |
1.2 Transcription factors (TFs) | 第19-23页 |
1.2.1 AP2/EREBP transcription factors | 第20-22页 |
1.2.2 AREB transcription factors | 第22-23页 |
1.2.3 NAC transcription factors | 第23页 |
1.2.4 WRKY transcription factors | 第23页 |
1.2.5 Zinc finger transcription factors | 第23页 |
1.3 Arabidopsis thaliana: the model plant | 第23-25页 |
1.4 Abiotic stresses | 第25-27页 |
1.4.1 Drought stress | 第25-26页 |
1.4.2 Salinity stress | 第26页 |
1.4.3 Cold stress | 第26页 |
1.4.4 Heat stress | 第26-27页 |
1.5 Research objectives and outline of the experimental design | 第27-29页 |
1.5.1 Research objectives | 第27-28页 |
1.5.2 Flow chart of research process | 第28-29页 |
Chapter Two: Materials and Methods | 第29-40页 |
2.1 Materials | 第29-32页 |
2.1.1 Plant Materials and Growth Conditions | 第29-31页 |
2.1.1.1 Brachypodium distachyon Growth Conditions | 第29页 |
2.1.1.2 Arabidopsis thaliana Growth Conditions | 第29页 |
2.1.1.3 Sterilization Arabidopsis seeds | 第29-31页 |
2.1.2 Database software and online tools | 第31页 |
2.1.3 List of primers used in the present study | 第31-32页 |
2.2 Methods | 第32-40页 |
2.2.1 Bd DREB gene analysis | 第32-33页 |
2.2.1.1 Multiple sequence alignment and phylogenetic analysis | 第32页 |
2.2.1.2 Chromosome distribution analysis | 第32-33页 |
2.2.2 Overexpression Bd DREB1G gene in Arabidopsis | 第33-39页 |
2.2.2.1 General sterilization procedures | 第33-34页 |
2.2.2.2 Recombinant DNA techniques for cloning and DNA analysis | 第34页 |
2.2.2.2.1 RNA isolation and c DNA synthesis | 第34页 |
2.2.2.2.2 Quantitative real-time PCR analysis | 第34页 |
2.2.2.3 Gene cloning | 第34-35页 |
2.2.2.4 PCR product purification | 第35页 |
2.2.2.5 T/A cloning of PCR products | 第35页 |
2.2.2.6 Preparation of ultra-competent bacterial cells | 第35-36页 |
2.2.2.7 Transformation to E.coli | 第36页 |
2.2.2.8 Plasmid extraction | 第36-37页 |
2.2.2.9 Restriction enzymes digestion and ligation | 第37-39页 |
2.2.2.9.1 Plasmid extraction | 第37页 |
2.2.2.9.2 Agrobacterium | 第37-38页 |
2.2.2.9.3 Transformation to arabidopsis with MS media | 第38页 |
2.2.2.9.4 Transgenic plants | 第38页 |
2.2.2.9.4.1 Arabidopsis transformation | 第38页 |
2.2.2.9.5 Screening of transgenic Arabidopsis and DNA extraction | 第38-39页 |
2.2.3 Statistical analysis | 第39-40页 |
Chapter Three: Results and discussion | 第40-50页 |
3.1 Results | 第40-47页 |
3.1.1 the analysis of Bd DREB gene family | 第40-42页 |
3.1.1.1 Phylogenetic analysis | 第40-41页 |
3.1.1.2 Gene duplication and syntey analysis of Bd AP2 genes | 第41-42页 |
3.1.2 overexpression of Bd DREB1G in Arabidopsis thaliana | 第42-47页 |
3.1.2.1 Pre- experimental | 第42-44页 |
3.1.2.2 Cloning and sequence analysis of the Brachypodium DREB gene | 第44-45页 |
3.1.2.3 Screening and identification of transgenic Arabidopsis thaliana | 第45-46页 |
3.1.2.3.1 Screening test resistance to kanamycin | 第45-46页 |
3.1.2.3.2 PCR identified transgenic seedlings Arabidopsis | 第46页 |
3.1.2.4 Detection of gene expression in transgenic Arabidopsis thaliana | 第46页 |
3.1.2.5 Phenotypic analysis of transgenic Arabidopsis plants | 第46-47页 |
3.2 Discussion | 第47-50页 |
Chapter Four: conclusions and recommendations | 第50-51页 |
References | 第51-57页 |
Acknowledgements | 第57-59页 |
CURRICULUM VITAE | 第59页 |