摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 川硬皮肿腿蜂研究现状 | 第10页 |
1.2 寄生蜂的学习行为 | 第10-12页 |
1.3 触角感器研究进展 | 第12-13页 |
1.4 挥发性化学物质对寄生蜂的影响 | 第13-15页 |
1.4.1 信息化学物概述 | 第13-14页 |
1.4.2 植物挥发性物质 | 第14页 |
1.4.3 昆虫挥发性化学信息物 | 第14-15页 |
1.5 昆虫嗅觉反应机制 | 第15-20页 |
1.5.1 昆虫的嗅觉识别过程 | 第15-16页 |
1.5.2 气味结合蛋白研究进展 | 第16-20页 |
1.6 昆虫趋性行为反应 | 第20-21页 |
2 研究目的和意义 | 第21-22页 |
3 技术路线 | 第22-23页 |
4 研究内容 | 第23-38页 |
4.1 试验材料 | 第23页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第23页 |
4.1.2 实验仪器和试剂 | 第23页 |
4.2 川硬皮肿腿蜂OBP1、OBP2的表达及纯化 | 第23-33页 |
4.2.1 总RNA提取 | 第23-25页 |
4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
4.2.3 特异性引物设计及目的基因PCR扩增 | 第26-27页 |
4.2.4 目的基因产物的检测及胶回收 | 第27-28页 |
4.2.5 胶回收产物的连接及转化 | 第28-29页 |
4.2.6 重组质粒DNA和pET-28a(+)的双酶切 | 第29-30页 |
4.2.7 原核表达载体的构建 | 第30页 |
4.2.8 目的蛋白的原核表达 | 第30-31页 |
4.2.9 大量表达及纯化 | 第31-33页 |
4.3 OBP1、OBP2与气味分子结合特性分析 | 第33-36页 |
4.3.1 蛋白及气味标样处理 | 第33-36页 |
4.3.2 试验方法 | 第36页 |
4.4 川硬皮肿腿蜂对气味的趋性行为反应 | 第36-38页 |
4.4.1 挥发性气味物质的制备 | 第36页 |
4.4.2 室内“Y”型嗅觉仪 | 第36-37页 |
4.4.3 川硬皮肿腿蜂雌成虫羽化初期的学习处理 | 第37页 |
4.4.4 川硬皮肿腿蜂行为测定 | 第37-38页 |
5 结果与分析 | 第38-55页 |
5.1 川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白OBP1与OBP2原核表达载体的构建 | 第38-40页 |
5.1.1 川硬皮肿腿蜂头部总RNA的提取及质量检测 | 第38页 |
5.1.2 OBP1与OBP2序列扩增 | 第38-39页 |
5.1.3 OBP1和OBP2与pET -28a(+)载体构建重组质粒 | 第39-40页 |
5.2 OBP1与OBP2蛋白表达及纯化 | 第40-42页 |
5.3 荧光探针1-NPN与OBP1和OBP2的结合曲线 | 第42-43页 |
5.4 挥发性气味标样与OBP1和OBP2的结合能力 | 第43-49页 |
5.5 川硬皮肿腿蜂行为趋性 | 第49-55页 |
6 结论与讨论 | 第55-60页 |
6.1 OBP1、OBP2的表达及纯化 | 第55-56页 |
6.2 OBP1、OBP2与气味结合特性的探讨 | 第56-57页 |
6.3 川硬皮肿腿蜂趋性行为反应 | 第57-58页 |
6.4 川硬皮肿腿蜂OBP1、OBP2对气味的结合性与行为趋性的关系 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |