| 致谢 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-12页 |
| 英文摘要 | 第12-18页 |
| 论文创新点 | 第19-20页 |
| 缩略词表 | 第20-25页 |
| 引言 | 第25-28页 |
| 实验试剂与仪器 | 第28-32页 |
| 1 细胞 | 第28页 |
| 2 实验仪器 | 第28页 |
| 3 实验试剂 | 第28-29页 |
| 4 实验抗体 | 第29页 |
| 5 实验溶液 | 第29-32页 |
| 5.1 D,L-Hcy配制 | 第29页 |
| 5.2 实验相关溶液配制 | 第29-32页 |
| 实验方法 | 第32-37页 |
| 1 内皮细胞贴壁培养 | 第32页 |
| 2 MTT法检测内皮细胞活力 | 第32页 |
| 2.1 不同浓度Hcy处理内皮细胞24 h对细胞活力的影响 | 第32页 |
| 2.2 同一浓度Hcy处理内皮细胞不同时间对细胞活力的影响 | 第32页 |
| 3 透射电镜观察Hcy对内皮细胞亚细胞结构的影响 | 第32-33页 |
| 4 JC-1染色检测内皮细胞线粒体膜电位 | 第33页 |
| 5 内皮细胞总一氧化氮(NO)水平测定 | 第33-34页 |
| 6 内皮细胞活性氧(ROS)水平检测 | 第34页 |
| 7 内皮细胞ATP含量检测 | 第34页 |
| 8 内皮细胞线粒体Ca~(2+)浓度检测 | 第34-35页 |
| 9 细胞免疫荧光检测蛋白表达 | 第35页 |
| 10 蛋白质免疫共沉淀检测蛋白质-蛋白质相互作用 | 第35页 |
| 11 Western-blot检测内皮细胞蛋白水平 | 第35-36页 |
| 11.1 细胞蛋白提取 | 第35-36页 |
| 11.1.1 细胞总蛋白提取 | 第35页 |
| 11.1.2 线粒体蛋白提取 | 第35-36页 |
| 11.2 蛋白质免疫印迹(Western-blot) | 第36页 |
| 12 数据分析 | 第36-37页 |
| 第一部分 Hey引起内皮细胞线粒体毒性作用研究 | 第37-48页 |
| 1 实验结果 | 第37-45页 |
| 1.1 Hcy减弱内皮细胞活力 | 第37-38页 |
| 1.2 Hcy对内皮细胞损伤的影响 | 第38-40页 |
| 1.2.1 Hcy下调内皮细胞标志蛋白表达 | 第38-39页 |
| 1.2.2 Hcy引起内皮细胞舒张因子和收缩因子失衡 | 第39-40页 |
| 1.3 Hcy对内皮细胞亚细胞结构的影响 | 第40-42页 |
| 1.4 Hcy引起内皮细胞线粒体功能障碍 | 第42-45页 |
| 1.4.1 Hcy引起内皮细胞线粒体膜电位降低 | 第42-44页 |
| 1.4.2 Hcy引起内皮细胞ATP水平降低 | 第44页 |
| 1.4.3 Hcy引起细胞内ROS水平升高 | 第44-45页 |
| 2 讨论 | 第45-47页 |
| 3 小结 | 第47-48页 |
| 第二部分 Hey致内皮细胞线粒体功能障碍的机制研究 | 第48-61页 |
| 1 实验结果 | 第48-58页 |
| 1.1 Hcy引起内皮细胞线粒体Ca~(2+)浓度升高 | 第48-49页 |
| 1.2 Hcy致内皮细胞线粒体Ca(2+)浓度升高可能与MAM结构增强有关 | 第49-51页 |
| 1.3 Hcy致线粒体Ca~(2+)浓度升高是其引起内皮细胞线粒体功能障碍的重要原因 | 第51-52页 |
| 1.4 Hcy通过升高线粒体Ca~(2+)浓度激活GSK3β影响线粒体动态平衡 | 第52-55页 |
| 1.5 Hcy致线粒体Ca~(2+)浓度升高参与其引起的内皮细胞线粒体自噬 | 第55-58页 |
| 2 讨论 | 第58-60页 |
| 3 小结 | 第60-61页 |
| 总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 综述 | 第71-86页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 作者简历及在读期间所获成果 | 第86-87页 |
