| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 虫酰肼的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.1.1 虫酰肼的开发及应用现状 | 第12-13页 |
| 1.1.2 虫酰肼的毒理学研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞DNA损伤的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.2.1 DNA损伤 | 第14-15页 |
| 1.2.2 DNA损伤类型和修复系统 | 第15-16页 |
| 1.2.3 DNA损伤应答信号 | 第16页 |
| 1.3 细胞周期调控的研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 细胞周期概述 | 第16页 |
| 1.3.2 细胞周期调控机制 | 第16-18页 |
| 1.3.2.1 细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶在细胞周期中的调控作用 | 第17页 |
| 1.3.2.2 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂在细胞周期中的调控作用 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 细胞周期与肿瘤 | 第18页 |
| 1.4 细胞凋亡的研究 | 第18-19页 |
| 1.5 ATM/ATR介导的信号通路与肿瘤研究 | 第19-21页 |
| 1.5.1 ATM/p53介导的细胞周期阻滞 | 第19-20页 |
| 1.5.2 ATM/p53介导的细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 1.6 选题背景、研究内容及研究意义 | 第21-23页 |
| 第2章 虫酰肼诱导HeLa细胞增殖毒性及DNA损伤研究 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 实验药品与试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.1.4.1 克隆形成实验试剂配制 | 第24页 |
| 2.1.4.2 蛋白免疫荧光印迹试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 克隆形成实验 | 第25-26页 |
| 2.2.2 蛋白免疫荧光印迹实验 | 第26-27页 |
| 2.2.3 统计分析 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-28页 |
| 2.3.1 虫酰肼诱导HeLa细胞增殖毒性 | 第27页 |
| 2.3.2 虫酰肼诱导HeLa细胞DNA损伤 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第3章 虫酰肼对HeLa细胞周期的影响以及作用机制的研究 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第31页 |
| 3.1.4.1 细胞周期阻滞检测试剂配制 | 第31页 |
| 3.1.4.2 普通琼脂糖凝胶电泳试剂配制 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 流式细胞周期检测 | 第31-32页 |
| 3.2.2 普通琼脂糖凝胶电泳 | 第32-34页 |
| 3.2.3 统计分析 | 第34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-36页 |
| 3.3.1 虫酰肼诱导HeLa细胞发生周期阻滞 | 第34-35页 |
| 3.3.2 虫酰肼诱导HeLa细胞G1/S期阻滞相关基因检测结果 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第4章 虫酰肼诱导HeLa细胞凋亡分子机制的研究 | 第38-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第39-40页 |
| 4.1.4.1 Western blotting试剂配制 | 第39页 |
| 4.1.4.2 Calcein-AM-CoCl_2试剂配制 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 Western blotting | 第40-41页 |
| 4.2.2 Calcein-AM-CoCl_2实验 | 第41页 |
| 4.2.3 特异性线粒体标记探针实验 | 第41页 |
| 4.2.4 ATP含量检测实验 | 第41-42页 |
| 4.2.5 统计分析 | 第42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-45页 |
| 4.3.1 虫酰肼诱导HeLa细胞凋亡相关蛋白表达变化 | 第42-43页 |
| 4.3.2 虫酰肼诱导HeLa细胞线粒体通透性变化 | 第43-44页 |
| 4.3.3 虫酰肼诱导HeLa细胞线粒体数量的减少 | 第44页 |
| 4.3.4 虫酰肼诱导HeLa细胞线粒体功能受损 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第5章 虫酰肼诱导小鼠急性毒性试验研究 | 第46-56页 |
| 5.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.1.1 实验动物和细胞 | 第46页 |
| 5.1.2 主要器材 | 第46页 |
| 5.1.3 仪器设备 | 第46页 |
| 5.1.4 药品与试剂 | 第46-47页 |
| 5.1.5 主要试剂配制 | 第47页 |
| 5.1.5.1 小鼠肝、肾损伤效应检测试剂配制 | 第47页 |
| 5.1.5.2 Western blotting试剂配制 | 第47页 |
| 5.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 5.2.1 小鼠肝、肾损伤效应检测 | 第47-48页 |
| 5.2.2 Caspase-3/9酶活检测 | 第48页 |
| 5.2.3 Western blotting | 第48页 |
| 5.2.4 小鼠肝、肾细胞氧化损伤检测 | 第48-49页 |
| 5.2.5 统计分析 | 第49页 |
| 5.3 实验结果 | 第49-54页 |
| 5.3.1 虫酰肼诱导小鼠肝、肾损伤效应检测结果 | 第49-51页 |
| 5.3.2 虫酰肼诱导小鼠肝、肾组织细胞凋亡分子机制研究结果 | 第51-53页 |
| 5.3.3 虫酰肼诱导小鼠肝、肾细胞氧化损伤检测结果 | 第53-54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第6章 全文总结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及获奖情况 | 第69页 |
