| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-41页 |
| 1. 药物载体及其特性 | 第12-16页 |
| 1.1 药物载体的基本特性---长循环性 | 第12-14页 |
| 1.2 药物载体的主动靶向性 | 第14-16页 |
| 2. 用作药物载体的聚合物胶束 | 第16-20页 |
| 2.1 聚合物胶束对难溶性药物的增溶作用 | 第16-17页 |
| 2.2 聚合物胶束的组成 | 第17-18页 |
| 2.3 脂质为内核的胶束 | 第18-19页 |
| 2.4 聚合物胶束制剂临床试验的最新进展 | 第19-20页 |
| 3. 叶酸受体介导的靶向药物传输 | 第20-26页 |
| 3.1 叶酸受体概述 | 第20-21页 |
| 3.2 叶酸受体靶向的实现策略 | 第21-22页 |
| 3.3 叶酸直接偶联药物分子的靶向传输 | 第22-23页 |
| 3.4 叶酸偶联药物载体的靶向传输 | 第23-25页 |
| 3.5 叶酸偶联物制剂临床试验的最新进展 | 第25页 |
| 3.6 肿瘤组织FRs表达量的局限性及其上调 | 第25-26页 |
| 4. 研究目的和内容 | 第26-28页 |
| 参考文献 | 第28-41页 |
| 第二章 Folate-PEG-DSPE的合成和表征 | 第41-55页 |
| 1. 引言 | 第41-42页 |
| 2. 仪器和材料 | 第42页 |
| 2.1 仪器 | 第42页 |
| 2.2 材料 | 第42页 |
| 3. 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.1 合成路线 | 第42-43页 |
| 3.2 实验步骤 | 第43-46页 |
| 3.2.1 叶酸的活化和folate-PEG-amine的合成 | 第43-45页 |
| 3.2.2 N-Suc-DSPE的合成 | 第45-46页 |
| 3.2.3 Folate-PEG-DSPE的合成和纯化 | 第46页 |
| 4. 结果与讨论 | 第46-53页 |
| 4.1 离子交换柱层析监测谱图及纯化后样品的液相谱图 | 第46-48页 |
| 4.1.1 柱层析 | 第46-47页 |
| 4.1.2 离子交换柱层析纯化样品的HPLC分析 | 第47-48页 |
| 4.1.3 Folate-PEG-amine的核磁氢谱 | 第48页 |
| 4.2 N-Suc-DSPE合成反应的TLC监测及产物的结构表征 | 第48-51页 |
| 4.2.1 反应终止时的TLC显色图 | 第48页 |
| 4.2.2 N-Suc-DSPE的红外光谱 | 第48页 |
| 4.2.3 N-Suc-DSPE的核磁氢谱 | 第48-51页 |
| 4.3 folate-PEG-DSPE的核磁氢谱(~1H NMR)表征 | 第51-53页 |
| 4.3.1 folate-PEG-DSPE的核磁氢谱 | 第51-52页 |
| 4.3.2 HPLC法分析folate-PEG-DSPE | 第52-53页 |
| 5. 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第三章 载香豆素6胶束的制备及表征 | 第55-65页 |
| 1. 引言 | 第55-56页 |
| 2. 仪器和材料 | 第56页 |
| 2.1 仪器 | 第56页 |
| 2.2 材料 | 第56页 |
| 3. 实验部分 | 第56-58页 |
| 3.1 载香豆素6胶束的制备方法 | 第56-57页 |
| 3.2 透射电镜观察胶束的形态和粒径 | 第57页 |
| 3.3 动态光散射法检测胶束粒径 | 第57页 |
| 3.4 高效液相色谱法建立香豆素6含量测定的标准曲线 | 第57页 |
| 3.5 胶束的载药量和包封率测定 | 第57页 |
| 3.6 高效液相色谱法分析叶酸偶联胶束中的Folate-PEG-DSPE | 第57-58页 |
| 3.7 胶束稳定性的考察 | 第58页 |
| 4. 结果与讨论 | 第58-61页 |
| 4.1 载香豆素6普通胶束和叶酸偶联胶束的透射电镜形态 | 第58页 |
| 4.2 动态光散射法检测胶束粒径 | 第58-59页 |
| 4.3 高效液相色谱法分析胶束的载药量和包封率 | 第59-61页 |
| 4.4 叶酸偶联胶束中Folate-PEG-DSPE的HPLC分析 | 第61页 |
| 4.5 载香豆素6胶束的稳定性考察 | 第61页 |
| 5. 小结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第四章 载米托蒽醌聚合物胶束的制备及表征 | 第65-73页 |
| 1. 引言 | 第65-66页 |
| 2. 仪器和材料 | 第66页 |
| 2.1 仪器 | 第66页 |
| 2.2 材料 | 第66页 |
| 3. 实验方法 | 第66-68页 |
| 3.1 载米托蒽醌的胶束制备方法 | 第66-67页 |
| 3.2 添加磷脂酰乙醇胺的载米托蒽醌胶束的制备 | 第67页 |
| 3.3 动态光散射法检测载米托蒽醌胶束的粒径分布 | 第67页 |
| 3.4 高效液相色谱法建立米托蒽醌含量测定的标准曲线 | 第67页 |
| 3.5 胶束的载药量和包封率测定 | 第67页 |
| 3.6 胶束稳定性的考察 | 第67-68页 |
| 4. 结果与讨论 | 第68-71页 |
| 4.1 载米托蒽醌的胶束的粒径分析 | 第68-69页 |
| 4.2 高效液相色谱法分析胶束的载药量和包封率 | 第69-70页 |
| 4.3 DSPE的添加对于载米托蒽醌胶束载药量和包封率的影响 | 第70-71页 |
| 4.4 三乙胺在制备载米托蒽醌的聚合物胶束中的作用 | 第71页 |
| 4.5 载米托蒽醌聚合物胶束的稳定性 | 第71页 |
| 5. 小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| 第五章 叶酸偶联胶束的细胞水平评价 | 第73-82页 |
| 1. 引言 | 第73-74页 |
| 2. 仪器和材料 | 第74-75页 |
| 2.1 仪器 | 第74页 |
| 2.2 材料 | 第74-75页 |
| 3. 实验方法 | 第75-76页 |
| 3.1 Hela细胞的培养 | 第75页 |
| 3.2 荧光显微镜观察Hela细胞对载药胶束的摄取 | 第75页 |
| 3.3 流式细胞仪定量分析Hela细胞对载药胶束的摄取 | 第75页 |
| 3.4 游离叶酸对FR介导的内吞作用的影响 | 第75-76页 |
| 4. 结果与讨论 | 第76-80页 |
| 4.1 荧光显微镜观察Hela细胞对普通胶束和叶酸偶联胶束的摄取 | 第76-77页 |
| 4.2 流式细胞仪分析Hela细胞对普通胶束和叶酸偶联胶束的摄取 | 第77页 |
| 4.3 游离叶酸对FR介导的内吞作用的抑制作用及无叶酸培养基的使用 | 第77-80页 |
| 5. 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-82页 |
| 第六章 叶酸受体α上调对于Hela细胞摄取叶酸偶联胶束的影响 | 第82-98页 |
| 1. 引言 | 第82-83页 |
| 2. 仪器和材料 | 第83页 |
| 2.1 仪器 | 第83页 |
| 2.2 材料 | 第83页 |
| 3. 实验方法 | 第83-89页 |
| 3.1 常用溶液的配制 | 第83-84页 |
| 3.2 Hela细胞的常规培养 | 第84页 |
| 3.3 Hela细胞用不同剂量地塞米松处理96小时 | 第84页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR法检测地塞米松对FRα mRNA水平的影响 | 第84-87页 |
| 3.5 流式细胞仪检测地塞米松处理Hela细胞后FR-α表达水平 | 第87-88页 |
| 3.5.1 用Alexa fluor 488试剂盒标记FRα单抗和同型对照抗体(Isotype IgG) | 第87页 |
| 3.5.2 地塞米松处理96h Hela细胞的收集 | 第87-88页 |
| 3.5.3 Alexa fluor 488标记的FRα单抗与细胞的孵育 | 第88页 |
| 3.5.4 单抗结合的Hela细胞的固定及上机检测 | 第88页 |
| 3.6 荧光显微镜定性观察地塞米松处理的Hela细胞对叶酸偶联胶束的摄取 | 第88页 |
| 3.7 流式细胞仪定量分析Hela细胞对普通胶束和叶酸偶联胶束的摄取 | 第88-89页 |
| 4. 结果与讨论 | 第89-95页 |
| 4.1 地塞米松对Hela细胞叶酸受体α表达水平的上调作用 | 第89-93页 |
| 4.1.1 RT-PCR技术检测地塞米松处理后的Hela细胞FRαmRNA水平 | 第89-91页 |
| 4.1.2 流式细胞术检测地塞米松处理后的Hela细胞表面FRα水平变化 | 第91-92页 |
| 4.1.3 地塞米松处理对于Hela细胞形态及增殖活性的影响 | 第92-93页 |
| 4.2 地塞米松处理对Hela细胞摄取叶酸偶联胶束的影响 | 第93-95页 |
| 4.2.1 荧光显微镜观察地塞米松处理后的Hela细胞对叶酸偶联胶束的摄取 | 第93-94页 |
| 4.2.2 流式细胞仪分析地塞米松处理后的Hela细胞对叶酸偶联胶束的摄取 | 第94-95页 |
| 5. 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-98页 |
| 全文总结 | 第98-100页 |
| 主要创新点 | 第100-101页 |
| 论文发表情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
