| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 论文中术语、缩略语一览表 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 单克隆抗体的结构、来源及其应用 | 第12-15页 |
| 1.1.1 单克隆抗体的结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 单克隆抗体的来源 | 第13-14页 |
| 1.1.3 单克隆抗体的应用 | 第14-15页 |
| 1.2 单克隆抗体的分离纯化 | 第15-20页 |
| 1.2.1 盐析法 | 第16页 |
| 1.2.2 辛酸—硫酸铵沉淀法 | 第16页 |
| 1.2.3 亲和层析法 | 第16-17页 |
| 1.2.4 凝胶过滤层析法 | 第17-18页 |
| 1.2.5 疏水层析法 | 第18页 |
| 1.2.6 固定化金属螯合亲和层析法 | 第18-19页 |
| 1.2.7 离子交换层析法 | 第19-20页 |
| 1.3 本课题的研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 分泌人绒毛膜促性腺激素单抗杂交瘤细胞的制备 | 第21-30页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验动物、细胞株 | 第21-22页 |
| 2.2.2 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.3.1 免疫动物 | 第23-24页 |
| 2.3.2 细胞融合 | 第24页 |
| 2.3.3 杂交瘤细胞的筛选 | 第24-25页 |
| 2.3.4 间接ELISA 测阳性孔 | 第25页 |
| 2.3.5 杂交瘤细胞的单克隆化 | 第25-26页 |
| 2.3.6 蛋白含量测定 | 第26-27页 |
| 2.3.7 单克隆抗体效价测定 | 第27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.4.1 小鼠血清抗体效价检测 | 第27-28页 |
| 2.4.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第28-29页 |
| 2.4.3 杂交瘤细胞上清蛋白含量及抗体效价的检测 | 第29-30页 |
| 第三章 人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体腹水的制备及初步纯化 | 第30-39页 |
| 3.1 前言 | 第30-31页 |
| 3.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第31页 |
| 3.2.2 试剂 | 第31页 |
| 3.2.3 仪器 | 第31-32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.3.1 F1 小鼠的分组 | 第32-33页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞的接种 | 第33页 |
| 3.3.3 收集腹水 | 第33页 |
| 3.3.4 辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水单抗 | 第33页 |
| 3.3.5 蛋白含量测定方法 | 第33页 |
| 3.3.6 单克隆抗体效价的测定 | 第33-34页 |
| 3.3.7 抗体蛋白纯度的鉴定及回收率的计算—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 | 第34-35页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第35-39页 |
| 3.4.1 两种免疫抑制剂对小鼠腹水产量的影响 | 第35页 |
| 3.4.2 性别对小鼠腹水产量的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.3 周龄对小鼠腹水产量的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.4 辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水单抗 | 第37-39页 |
| 第四章 应用蛋白A 亲和层析法纯化hCG 单克隆抗体 | 第39-59页 |
| 4.1 前言 | 第39页 |
| 4.2 实验材料 | 第39-41页 |
| 4.2.1 试剂 | 第39-40页 |
| 4.2.2 仪器 | 第40-41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-43页 |
| 4.3.1 蛋白A 亲和层析过程 | 第41-42页 |
| 4.3.2 考察上样缓冲液pH 值对抗体吸附的影响 | 第42页 |
| 4.3.3 考察上样缓冲液离子强度对抗体吸附的影响 | 第42页 |
| 4.3.4 考察洗脱液pH 值对抗体洗脱的影响 | 第42-43页 |
| 4.3.5 流速对抗体吸附洗脱的影响 | 第43页 |
| 4.3.6 单克隆抗体效价的测定 | 第43页 |
| 4.3.7 抗体蛋白纯度的鉴定及回收率的计算—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 | 第43页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第43-59页 |
| 4.4.1 上样缓冲液pH 值对抗体吸附的影响 | 第43-46页 |
| 4.4.2 上样缓冲液离子强度对抗体吸附的影响 | 第46-50页 |
| 4.4.3 洗脱液pH 值对抗体洗脱的影响 | 第50-53页 |
| 4.4.4 流速对抗体吸附洗脱的影响 | 第53-57页 |
| 4.4.5 纯化后抗体效价的检测 | 第57-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 结论 | 第59-60页 |
| 5.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第66页 |
