| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 质粒的复制类型及其分类 | 第11-16页 |
| 1.1.1 质粒的滚环复制机制 | 第12-13页 |
| 1.1.2 质粒的θ复制机制 | 第13-16页 |
| 1.2 解螺旋酶在质粒复制中的作用简介 | 第16-21页 |
| 1.2.1 解螺旋酶的特征及分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 细菌质粒复制起始中解螺旋酶的特征 | 第18-19页 |
| 1.2.3 与复制相关的解螺旋酶 | 第19-20页 |
| 1.2.4 DnaB解旋酶的招募和装配 | 第20-21页 |
| 1.3 苏云金芽胞杆菌质粒的研究简介 | 第21-22页 |
| 1.4 本实验的研究背景 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-31页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第25-30页 |
| 2.1.2 培养基 | 第30页 |
| 2.1.3 细菌用抗生素及其培养温度 | 第30页 |
| 2.1.4 试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.4.1 试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.4.2 仪器 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 分子生物学基本操作 | 第31页 |
| 2.2.2 酵母双杂交实验 | 第31-32页 |
| 2.2.3 蛋白质浓度的测定 | 第32页 |
| 2.2.4 EMSA(琼脂糖凝胶阻滞实验) | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-49页 |
| 3.1 ORF15蛋白的超量表达与纯化 | 第34-38页 |
| 3.1.1 构建表达ORF15蛋白的重组菌株及ORF15蛋白的超量表达 | 第34-38页 |
| 3.1.2 ORF15蛋白的纯化 | 第38页 |
| 3.2 PcrA26蛋白的超量表达与纯化 | 第38-42页 |
| 3.2.1 构建表达PcrA26蛋白的重组菌株及PcrA26蛋白的超量表达 | 第38-42页 |
| 3.3 ORF15蛋白与复制起始区段(ORI)之间的结合实验 | 第42-45页 |
| 3.3.1 复制起始区段(ORI)的PCR扩增 | 第42-43页 |
| 3.3.2 EMSA实验验证ORF15蛋白与复制起始区段(ORI)之间的结合实验 | 第43-45页 |
| 3.4 酵母双杂交实验体内验证蛋白质之间的相互作用 | 第45-49页 |
| 3.4.1 酵母双杂交重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| 3.4.2 酵母双杂交 | 第46-49页 |
| 3.4.2.1 Rep26自身的聚合作用 | 第46-47页 |
| 3.4.2.2 PcrA26自身的聚合作用 | 第47-48页 |
| 3.4.2.3 PcrA26与Rep26之间的相互作用 | 第48-49页 |
| 4.讨论 | 第49-51页 |
| 5.小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
