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陕西省苹果和葡萄炭疽病病原鉴定

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第13-22页
    1.1 苹果炭疽病简介第13页
    1.2 葡萄炭疽病简介第13-14页
    1.3 炭疽病病原菌分类第14-16页
        1.3.1 炭疽菌属的分类第14-15页
        1.3.2 炭疽菌种的分类第15-16页
        1.3.3 国内炭疽菌属和种的分类研究第16页
    1.4 胶孢炭疽菌第16-17页
    1.5 尖孢炭疽菌第17-18页
    1.6 分子生物学技术在炭疽菌分类中的应用第18-20页
        1.6.1 常用的分子生物学技术第18-19页
        1.6.2 常用的分子生物学技术优缺点比较第19-20页
        1.6.3 各种分子标记在炭疽菌分类中的应用第20页
    1.7 本研究的目的和意义第20-22页
第二章 材料与方法第22-36页
    2.1 样本的采集第22页
    2.2 病原菌的分离和纯化第22页
    2.3 致病性测定第22-23页
    2.4 病原菌的形态鉴定第23页
        2.4.1 菌落形态观察和测定第23页
        2.4.2 分生孢子形态、大小观察和测量第23页
        2.4.3 附着胞的观察第23页
    2.5 病原菌的分子鉴定第23-30页
        2.5.1 试剂第23-24页
        2.5.2 仪器第24页
        2.5.3 主要溶液及培养基的配制第24-25页
        2.5.4 改良CTAB 法提取基因组DNA第25-26页
        2.5.5 rDNA-ITS 序列PCR 扩增第26页
        2.5.6 rDNA-ITSPCR 扩增产物测序第26-27页
        2.5.7 ITS 序列数据分析和系统树的构建第27-28页
        2.5.8 多基因序列PCR 扩增第28-29页
        2.5.9 多基因PCR 扩增产物测序第29页
        2.5.10 多基因序列数据分析和系统树的构建第29-30页
    2.6 苹果炭疽菌的SSR 引物设计和初步筛选第30-36页
        2.6.1 供试菌株第30页
        2.6.2 半简并引物扩增第30-31页
        2.6.3 目的片段的回收第31-32页
        2.6.4 感受态细胞的制备(0.1MCaCl_2 法)第32页
        2.6.5 连接转化第32-33页
        2.6.6 菌落PCR 鉴定第33页
        2.6.7 质粒的提取第33-34页
        2.6.8 SSR 引物的设计和合成第34页
        2.6.9 SSR 引物筛选第34-36页
第三章 结果与分析第36-56页
    3.1 标本的采集、分离和保存第36页
    3.2 致病性的测定第36页
    3.3 菌株的形态鉴定第36-38页
    3.4 菌株的分子鉴定第38-42页
        3.4.1 rDNA-ITS 序列PCR 扩增产物的检测第38页
        3.4.2 rDNA-ITS 系统发育树第38-40页
        3.4.3 多基因PCR 扩增产物的检测第40-41页
        3.4.4 多基因序列系统发育树第41-42页
    3.5 种类描述第42-51页
        3.5.1 果生炭疽菌Colletotrichum fructicola Prihastuti, L. Cai & K.D. Hyde,Fungal Diversity 39:96,国内新纪录种(图3-8)第42-43页
        3.5.2 暹罗炭疽菌Colletotrichum siamense Prihastuti, L. Cai & K.D. Hyde,Fungal Diversity 39:98,国内新纪录种(图3-9)第43-44页
        3.5.3 海水仙炭疽菌Colletotrichum hymenocallidis Y.L. Yang, Zuo Y. Liu, K.D. Hyde & L. Cai,Fungal Diversity 39:138(图3-10)第44-46页
        3.5.4 松针炭疽菌Colletotrichum fioriniae (Marcelino & Gouli) R.G. Shivas & Y.P.Tan,Fungal Diversity 39:117,国内新纪录种(图3-11)第46-47页
        3.5.5 眉县炭疽菌Colletotrichum meixiane R. Qin & R. Zhang, sp. nov.,新种(图3-第47-48页
        3.5.6 降帐炭疽菌Colletotrichum jiangzeis R. Qin & R. Zhang, sp. nov.,新种(图3-第48-50页
        3.5.7 葡萄炭疽菌Colletotrichum vitise R. Qin & R. Zhang, sp. nov.,新种(图3-第50-51页
    3.6 SSR 引物设计和初步筛选第51-56页
        3.6.1 半简并引物的扩增结果第51-52页
        3.6.2 半简并引物测序结果第52-53页
        3.6.3 SSR 引物设计结果第53-54页
        3.6.4 半简并引物筛选结果第54-56页
第四章 结论与讨论第56-59页
    4.1 讨论第56-58页
        4.1.1 标本的采集、分离和保存第56页
        4.1.2 病原学鉴定第56-57页
        4.1.3 多基因序列分析第57页
        4.1.4 SSR 引物设计第57-58页
    4.2 结论第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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