| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩写名词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 前言 | 第11页 |
| 1.2 植物在各种逆境下的信号传导途径 | 第11-15页 |
| 1.2.1 植物在非生物胁迫下的信号传导途径 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物在生物胁迫下的信号传导途径 | 第13-14页 |
| 1.2.3 胁迫信号传导的交叉(crosstalk) | 第14-15页 |
| 1.3 用于提高植物抗逆性的候选基因及编码产物 | 第15-22页 |
| 1.3.1 抗逆反应中直接起保护作用的功能蛋白基因 | 第15-16页 |
| 1.3.2 在信号传递和胁迫诱导基因表达中起调节作用的调节因子 | 第16-22页 |
| 1.3.2.1 感应和传导胁迫信号的酶类 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 调控信号传递及基因表达的转录因子 | 第17-22页 |
| 1.4 植物抗逆相关基因的克隆策略 | 第22-26页 |
| 1.4.1 依据序列同源性克隆基因 | 第23页 |
| 1.4.2 基于突变体技术的克隆策略 | 第23-24页 |
| 1.4.3 基于RNA水平的差别表达基因克隆方法 | 第24-26页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.2 菌株、质粒、载体、感受态 | 第27页 |
| 2.3 实验材料逆境处理 | 第27-28页 |
| 2.4 DNA及RNA抽提和mRNA分离 | 第28页 |
| 2.5 独立cDNA文库的构建和文库扩繁 | 第28页 |
| 2.6 文库的均一化处理 | 第28-29页 |
| 2.7 测序及EST生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.8 macroarry制作及处理 | 第30-31页 |
| 2.9 超量表达、干涉、gus/gfp融合表达载体及启动子载体构建 | 第31-32页 |
| 2.10 植物遗传转化 | 第32页 |
| 2.11 表达分析RT-PCR和q-PCR | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-53页 |
| 3.1 不同逆境处理的独立cDNA文库的构建 | 第33-35页 |
| 3.2 测序及EST序列分析 | 第35-43页 |
| 3.2.1 测序及EST去载体拼接 | 第35-37页 |
| 3.2.2 序列注释及BLAST分析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 GO分类注释 | 第38-42页 |
| 3.2.4 KEGG分析 | 第42-43页 |
| 3.2.5 转录因子分析 | 第43页 |
| 3.3 DNA array分析筛选黄萎病诱导表达的基因 | 第43-44页 |
| 3.4 候选基因的表达分析克隆测序及载体构建 | 第44-53页 |
| 3.4.1 WRKY类转录因子克隆和遗传转化 | 第44-50页 |
| 3.4.1.1 WRKY类转录因子的克隆、基因结构及表达谱分析 | 第45-49页 |
| 3.4.1.1.1 GbWRKY33的克隆和基因结构分析 | 第45-46页 |
| 3.4.1.1.2 GbWRKY15的克隆和基因结构分析 | 第46-47页 |
| 3.4.1.1.3 GbWRKY53的克隆和基因结构分析 | 第47-48页 |
| 3.4.1.1.4 GbWRKY21(5A14)的克隆和表达分析 | 第48-49页 |
| 3.4.1.2 GbWRKY33启动子克隆及载体构建 | 第49-50页 |
| 3.4.2 钾高效转运基因的分离和克隆 | 第50-51页 |
| 3.4.3 磷转运基因的克隆和遗传转化 | 第51-53页 |
| 4 结果分析与讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 均一化cDNA文库的构建 | 第53-54页 |
| 4.2 批量验证功能基因的思考 | 第54页 |
| 4.3 钾、磷在抗病中的应用 | 第54-55页 |
| 5 总结与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| Protocols | 第64-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
