| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-18页 |
| 第一章 疯牛病研究概述 | 第10-13页 |
| 1.1 疯牛病简介 | 第10页 |
| 1.2 疯牛病的起源和现状 | 第10-11页 |
| 1.3 疯牛病的临床特征、检测和预防 | 第11页 |
| 1.4 疯牛病的致病机理 | 第11-13页 |
| 第二章 Prnp 基因的研究进展 | 第13-18页 |
| 2.1 Prnp 基因的结构 | 第13页 |
| 2.2 Prnp 基因的功能 | 第13页 |
| 2.3 Prnp 基因的多态性与 TSE 抗病力的关联性 | 第13-17页 |
| 2.3.1 Prnp 基因与 TSE 的关联性 | 第13-14页 |
| 2.3.2 Prnp 基因的多态性与 TSE 抗病性 | 第14-17页 |
| 2.4 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 试验研究 | 第18-46页 |
| 第三章 牦牛 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失多态检测 | 第18-33页 |
| 3.1 材料与方法 | 第18页 |
| 3.1.1 试验用牦牛 | 第18页 |
| 3.1.2 试验用两对引物 | 第18页 |
| 3.2 试验设计 | 第18页 |
| 3.3 牦牛肝组织 DNA 的提取和检测 | 第18-19页 |
| 3.3.1 基因组 DNA 的提取 | 第18-19页 |
| 3.3.2 基因组 DNA 的电泳检测 | 第19页 |
| 3.4 聚合酶链式反应（PCR） | 第19页 |
| 3.5 Prnp 基因启动子区域 23bp 和第一内含子区域 12bp 插入/缺失多态检测 | 第19-20页 |
| 3.5.1 启动子区域 23bp 插入/缺失的多态鉴定 | 第19-20页 |
| 3.5.2 第一内含子区域 12bp 插入/缺失的多态鉴定 | 第20页 |
| 3.6 统计分析 | 第20页 |
| 3.7 结果与分析 | 第20-23页 |
| 3.7.1 DNA 提取的效果检测 | 第20-21页 |
| 3.7.2 牦牛 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失的检测 | 第21-22页 |
| 3.7.3 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失的基因频率和基因型频率的分析 | 第22页 |
| 3.7.4 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失的单倍型构建 | 第22-23页 |
| 3.8 讨论 | 第23-32页 |
| 3.8.1 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失的等位基因的鉴定 | 第23页 |
| 3.8.2 牛 Prnp 基因多态性的研究分析 | 第23-24页 |
| 3.8.3 基于 Prnp 基因 23bp 和 12bp 插入/缺失多态评估 BSE 抗性 | 第24-32页 |
| 3.9 小结 | 第32-33页 |
| 第四章 牦牛延髓组织中 Prnp 基因相对表达量的测定 | 第33-45页 |
| 4.1 材料与方法 | 第33页 |
| 4.1.1 试验用牦牛 | 第33页 |
| 4.1.2 试验用两对引物 | 第33页 |
| 4.2 试验设计 | 第33页 |
| 4.3 总 RNA 的提取及检测 | 第33-34页 |
| 4.3.1 总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| 4.3.2 总 RNA 的浓度、纯度及完整性检测 | 第34页 |
| 4.4 反转录合成 cDNA | 第34-35页 |
| 4.5 荧光定量 PCR | 第35-36页 |
| 4.5.1 荧光定量 PCR 产物的回收 | 第35页 |
| 4.5.2 Prnp 基因和 Actb 基因标准曲线的建立 | 第35页 |
| 4.5.3 荧光定量 PCR 反应程序及体系 | 第35-36页 |
| 4.5.4 样品中各基因相对表达量的检测 | 第36页 |
| 4.6 数据统计与分析 | 第36页 |
| 4.7 结果与分析 | 第36-43页 |
| 4.7.1 牦牛延髓组织总 RNA 的纯度、浓度及完整性检测 | 第36-37页 |
| 4.7.2 牦牛 Prnp 基因和 Actb 基因 PCR 扩增产物的电泳检测 | 第37页 |
| 4.7.3 实时荧光定量 PCR | 第37-40页 |
| 4.7.4 实时荧光定量 PCR 的结果 | 第40-43页 |
| 4.8 讨论 | 第43-44页 |
| 4.8.1 Prnp 基因的相对表达量在不同基因型中差异显著 | 第43-44页 |
| 4.8.2 Prnp 基因的相对表达量在不同年龄、性别和毛色中无差异显著 | 第44页 |
| 4.9 小结 | 第44-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
| 攻读硕士研究生期间发表论文情况 | 第53页 |
